国家重点基础研究发展计划(G1999054201)
- 作品数：34 被引量：126H指数：6
- 相关作者：粟永萍周继红许民辉张云东朱佩芳更多>>
- 相关机构：第三军医大学第三军医大学大坪医院首都医科大学附属北京天坛医院更多>>
- 发文基金：国家重点基础研究发展计划海外青年学者合作研究基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 分化抑制因子ID1’基因酵母双杂交诱饵载体的构建及自激活作用的检测被引量：2
- 2003年
- 目的 :构建酵母双杂交用分化抑制因子ID1’基因的诱饵载体 ,并检测其自激活作用。方法 :PCR扩增ID1’基因全长 ,酶切后与诱饵载体pHybLex/Zeo连接形成重组诱饵载体 ,电穿孔方法转化到酵母细胞EGY48中 ,β -半乳糖苷酶滤膜分析检测重组诱饵载体对报告基因LacZ的自激活情况。结果 :扩增出ID1’基因全长 ,成功构建了重组诱饵载体pHybLex/Zeo -ID1’ ,经酶切和测序鉴定正确 ;重组诱饵载体无自发激活报告基因功能。结论 :重组诱饵载体构建成功 ,对报告基因无自激活作用 。
- 贾思远齐洁罗向东
- 关键词：分子生物学分化抑制因子酵母双杂交诱饵载体
- 颈交感神经阻滞对放烧复合伤小鼠死亡率的影响及其可能的作用途径(英文)被引量：7
- 2006年
- 背景:颈交感神经阻滞促进机体神经-内分泌-免疫系统等稳态的恢复,其能否抑制创伤后应激紊乱导致的内稳态失衡仍不明确。目的:观察颈交感神经阻滞对放烧复合伤小鼠死亡率的影响,探讨颈交感神经阻滞可否成为严重创伤后续损害简单有效的治疗手段。设计:随机分组设计,动物对照实验。单位:解放军广州军区广州总医院麻醉科。材料:实验于2004-02/2005-07在解放军第三军医大学复合伤研究所完成。选择昆明小鼠160只,随机抽签法分为对照组80只(仅对动物给予放烧复合伤,颈部注射生理盐水0.3mL)和颈交感神经阻滞组80只(对动物给予放烧复合伤,伤后给予颈交感神经阻滞,1次/d,连续14d)。方法:动物致伤方法:①放射损伤:60Coγ射线5Gy,照射距离1.5m,吸收剂量率(5.17～5.33)mGy/s,全身一次均匀照射。②烧伤:放射损伤后给予20g/L凝固汽油涂于背部燃烧8s造成15%总体表面积Ⅲ度烧伤(病理切片证实)。颈交感神经阻滞方法:对大鼠进行双侧颈交感神经阻滞,注射5g/L利多卡因0.2mL,注射后5min观察小鼠是否出现类似于霍纳综合征症状。主要观察指标:观察两组动物伤后2,5,7,10,15,20,30d死亡率及伤后7,14,21d外周血红细胞、白细胞、血小板计数的变化,另观察颈交感神经阻滞对放烧复合伤后3,6,14d血清肿瘤坏死因子α、白细胞介素1β、白细胞介素6的影响。结果:纳入动物160只,均进入结果分析。①与对照组比较,颈交感神经阻滞治疗使放烧复合伤后5,7,10,15,20,30d的死亡率显著降低犤对照组各时相点累计死亡率分别为8%,22%,32%,54%,74%,82%,90%;颈交感神经阻滞组分别为8%,14%,16%,22%,28%,34%,56%犦。②颈交感神经阻滞组伤后7,14,21d的血红细胞计数、血小板计数及白细胞计数与对照组比较显著增加犤以21d为例,血红细胞计数分别为23.21×1012L-1,14.58×1012L-1;血小板计数分别为16.87×1011L-1,12.57×1011L-1;白细胞计�
- 陆建华施冲粟永萍程天民杜智勇
- 关键词：神经节交感神经传导阻滞
- 促肾上腺皮质激素释放激素对下丘脑神经元CREB的调控被引量：2
- 2008年
- 目的:研究促肾上腺皮质激素释放激素(Corticotropin-releasing hormone,CRH)对下丘脑神经元内CREB(CAMP-responsive element-binding protein)含量变化的调节作用。方法:取孕17d胎鼠下丘脑分散培养下丘脑神经元,采用PTI(Photon technology international,PTI)荧光成像系统测量下丘脑神经元胞浆内游离钙浓度([Ca2+]i)变化;测量和分析外源性CRH对培养下丘脑神经元内钙信号变化的影响,用Western blot方法测定神经元内P-CREB的含量变化,分别与用细胞膜L-型钙通道拮抗剂尼莫地平或CRH1受体(CRH1R)特异性拮抗剂CP-154526处理下丘脑神经元后[Ca2+]i和P-CREB的变化作比较。结果:正常对照组的下丘脑神经元[Ca2+]i含量较低,外源性CRH刺激后,[Ca2+]i立即升高;预先应用尼莫地平或CP-154526处理再用CRH刺激的神经元[Ca2+]i含量的增加明显被抑制,同时也可明显抑制神经元内P-CREB含量的增加。结论:在急性应激反应中,CRH可直接与下丘脑神经元CRH1R结合,开放膜L-型钙离子通道促使钙离子内流使[Ca2+]i明显增加,从而进一步激活神经元内P-CREB信号通路。说明在调节下丘脑神经元激活过程中CRH可能起了重要的作用。
- 张云东顾小红朱佩芳王正国周继红许民辉
- 关键词：钙通道下丘脑神经元P-CREB促肾上腺皮质激素释放激素
- 大鼠肺部严重创伤后早期下丘脑c-fos和CRH_1受体的表达被引量：1
- 2005年
- 目的 探讨严重创伤后早期下丘脑c fos与促肾上腺皮质激素释放激素 1受体 (CRH1R)蛋白含量变化的关系。方法 以大鼠右肺中部重度创伤加右股骨中段骨折为模型 ,采用免疫组织化学染色、West ern印迹方法观察大鼠下丘脑组织内c fos和CRH1R表达变化。分组 对照组 ,撞击伤后 15、30分钟、1、2、6、12小时撞击伤组、撞击伤治疗组 ,治疗组用CRH1R特异性阻滞剂CP 15 4 5 2 6治疗。结果 伤后下丘脑c fos含量 30分钟达高峰 ,以后迅速下降 ;CRH1R含量的变化明显迟于c fos的变化 ,撞击伤后 1小时CRH1R含量明显增加 ,主要分布于室旁核和视上核 ,在 1～ 6小时时相点表达明显增加 ,12小时开始回落 ;用CP 15 4 5 2 6治疗的大鼠 ,撞击伤后下丘脑c fos和CRH1R含量的增加明显被抑制。结论 严重创伤后下丘脑迅速增加的c fos对CRH1R的上调可能起关键的作用 ,早期快速表达的c fos蛋白起激活CRH1R表达的作用。
- 张云东朱佩芳王正国赵继宗周继红许民辉邹咏文黄显凯粟永萍吴海
- 关键词：C-FOS促肾上腺皮质激素释放激素受体下丘脑
- 严重创伤早期大鼠下丘脑G蛋白偶联受体激酶的变化被引量：2
- 2005年
- 目的研究G蛋白偶联受体激酶(GRK)在大鼠下丘脑的分布和严重创伤后时相变化及其与应激早期下丘脑促肾上腺皮质激素释放激素(CRH)分泌的关系。方法采用胸部撞击和单侧股骨中段骨折进行致伤。50只成年Wistar大鼠随机分为正常对照组和创伤组,通过免疫组化实验研究GRK在下丘脑的分布,Westernblot实验研究室旁核GRK的蛋白表达,RT-PCR技术研究室旁核CRH的转录活性。结果在下丘脑室旁核有GRK2/3的分布,但未发现GRK6的阳性染色;GRK2/3的总蛋白在创伤后30min显著下降(P<0.05),90min恢复近正常水平;CRHmRNA表达在伤后30min显著升高(P<0.05),60min、90min的升高非常显著(P<0.01)。结论在创伤应激过程早期GRK2/3的蛋白表达受到了抑制,推测下丘脑室旁核促肾上腺皮质激素释放激素1型受体(CRHR1)的同源性脱敏受到了抑制,间接促进了下丘脑室旁核CRH的分泌。
- 谭浩许民辉周继红邹咏文张云东
- 关键词：CRH下丘脑室旁核成年WISTAR大鼠G蛋白偶联受体激酶创伤应激
- C-Jun蛋白对糖皮质激素受体表达及转录激活能力的影响被引量：3
- 2005年
- 目的观察促进与抑制c-Jun蛋白表达对糖皮质激素受体(GR)表达和转录激活能力的影响,探索c-Jun与GR功能的相互关系。方法采用基因重组技术,构建PAVU6-c.JunsiRNA干涉质粒,电穿孔法分别转染U1937细胞c-Jun蛋白表达真核载体与PAVU6-cJunsiRNA干涉质粒,观察c-Jun表达对GR表达和转录激活能力的影响。结果成功构建PAVU6-cJunsiRNA干涉质粒,转化U937细胞后GR的表达和转录激活活性有增强,而转染c-Jun表达载体pCMV-c.JunGR的表达和转录激活活性有所减弱。结论c-Jun蛋白表达水平对GR的表达和转录激活活性有影响,抑制c-Jun蛋白表达,一定程度上可促进GR表达并增强其转录激活功能。
- 程晓刚粟永萍罗成基刘晓宏
- 关键词：C-JUN糖皮质激素受体转录激活RNA干涉
- Calpain inhIbitorⅠ对烧伤小鼠肝脏NF-κB转录及炎性细胞因子分泌的影响被引量：2
- 2007年
- 探讨Calpain inhibitor I(CI-I)对严重烧伤小鼠肝脏IκBa表达,NF-κB转录及炎性细胞因子分泌的影响。将CI-Ⅰ腹腔给药预处理小鼠1 h后背部行20%全身体表面积(TBSA)Ⅲ度烧伤,收集肝组织,检测其IκBa表达,NF-κB转录和血清TNF-a、IL-1B、IL-6分泌水平。与烧伤对照组比较,CI-Ⅰ预处理后肝脏NF-κB转录活性和炎性细胞因子分泌有所降低。提示CI-Ⅰ预处理可有效抑制严重烧伤小鼠肝细胞NF-κB活化和血清炎性细胞因子分泌,从而有利于烧伤后的炎症调节。
- 程晓刚王蒙粟永萍罗成基刘晓宏
- 关键词：CALPAININHIBITORNF-ΚB细胞因子烧伤
- 星状神经节阻滞对内毒素血症小鼠炎性细胞因子水平及死亡率的影响被引量：2
- 2012年
- 目的:探讨星状神经节阻滞(SGB)对内毒素血症小鼠血清炎性细胞因子及死亡率的影响,明确SGB可否成为系统性炎性反应综合征(SIRS)简单有效的辅助治疗手段。方法:内毒素血症小鼠分为SGB治疗组(颈部注射利多卡因)及对照组(颈部注射生理盐水),观察两组动物腹腔注射脂多糖(LPS)后2、7、14d血清TNF-α、IL-1β、IL-6的变化及2、4、7、10、15、20d累积死亡率的变化。结果:SGB治疗使内毒素血症小鼠2、7、14d的血清炎性细胞因子TNF-α、IL-1β、IL-6水平显著下降;注射LPS后2、4、7、10、15、20d的死亡率显著降低。结论:SGB可抑制内毒素血症小鼠过度的炎性反应,降低内毒素血症小鼠的死亡率,从而成为有益于SIRS治疗的简单有效的新手段。
- 李建玉宋骤杨雪吴群林陆建华
- 关键词：内毒素血症星状神经节阻滞死亡率细胞因子
- 热应激对血管内皮细胞增殖的影响及其机制初探被引量：4
- 2003年
- 目的 探讨热应激条件下对血管内皮细胞增殖的影响 ,进一步从DNA损伤后P5 3mRNA、P2 1mRNA表达改变角度探讨增殖调控的机理。方法 以建立的血管内皮细胞热应激 (4 3℃ ,2小时 )为实验模型 ,应用流式细胞仪观察热应激后血管内皮细胞株ECV30 4的细胞周期变化 ,单细胞凝胶电泳方法观察热应激对血管内皮细胞DNA的损伤 ,RT PCR检测P5 3mRNA、P2 1mRNA表达改变情况。结果 热应激可使血管内皮细胞DNA产生显著损伤 (P <0 .0 5 ) ,继而P5 3mRNA表达增高 ,并促进P2 1mRNA的上调表达 ,最终使细胞产生G1期阻滞。结论 热应激可损伤血管内皮细胞DNA ,并通过P5 3、P2
- 贾思远罗向东齐洁
- 关键词：热应激血管内皮细胞MRNA
- 小鼠烧伤早期巨噬细胞糖皮质激素受体及细胞因子蛋白表达的变化
- 2003年
- 目的 探讨小鼠烧伤后早期巨噬细胞糖皮质激素受体 (GR)、核转录因子 (NF kB)、肿瘤坏死因子 α(TNF α)和白介素 1β(IL 1β)蛋白表达的变化。 方法 将培养的巨噬细胞株ANA 1注入小鼠腹腔内 ,小鼠行 15 %TBSAⅢ度烧伤 ,收集腹腔巨噬细胞 ,应用免疫组化和Westernblot方法 ,观察烧伤后 2、6小时巨噬细胞GR、NF kB、TNF α和IL 1β蛋白表达的变化。 结果 烧伤后巨噬细胞免疫组化染色GR、NF kB阳性表达减弱 ,TNF α和IL 1β阳性反应增强。Westernblot分析表明烧伤后GR、NF kB蛋白含量降低。 结论 烧伤后巨噬细胞GR、NF kB蛋白减少 ,TNF α和IL 1β增加 。
- 刘晓宏李淑蓉粟永萍李军楼淑芬周燕虹程天民
- 关键词：巨噬细胞受体糖皮质激素细胞因子烧伤小鼠
