国家自然科学基金(81060299)
- 作品数：15 被引量：83H指数：6
- 相关作者：谢兴文李宁宋敏徐世红侯费祎更多>>
- 相关机构：甘肃中医药大学甘肃省中医药研究院甘肃省中医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- Brdu标记的rBMSCs在大鼠体内的迁移被引量：2
- 2015年
- 目的 5-溴-2-脱氧尿嘧啶核苷(5-bromo-2-deoxyuridine,Brdu)体外标记大鼠骨髓间充质干细胞(r BMSCs),通过尾静脉回植于大鼠体内,观察其是否在大鼠体内能向损伤部位迁移。方法采用贴壁筛选法培养r BMSCs,对r BMSCs进行鉴定,用Brdu标记细胞并计算标记率;大鼠颅骨骨缺损模型的建立;Brdu标记的r BMSCs体内回植;分别于7、14、21d后处死大鼠取出损伤部位的颅骨,并对其脱钙、制作切片;做荧光免疫组化染色;用荧光倒置相差显微镜来观察标本处是否有Brdu标记的r BMSCs。结果筛选纯化的骨髓间充质干细胞呈均一的成纤维细胞样,贴壁生长,以长梭形为主,漩涡状盘旋排列,CD45阴性表达,CD44、CD90表达阳性,r BMSCs经诱导后可向成脂、成骨分化。Brdu标记率为86.2%,在标本处检测到Brdu标记的r BMSCs,14d迁移效果最佳。结论 Brdu标记的r BMSCs可以进行大鼠体内的迁移研究。
- 许伟谢兴文赵永利李宁徐世红宋敏
- 关键词：免疫荧光迁移
- 麝香对颅骨骨缺损模型大鼠SDF-1表达的影响被引量：7
- 2013年
- 目的观察不同剂量麝香对颅骨骨缺损模型大鼠骨缺损处SDF-1表达的影响,探讨麝香促进外源性rBMSCs向骨缺损处迁移的机制。方法采用贴壁筛选法培养rBMSCs,大鼠颅骨骨缺损模型的建立后回植rBMSCs,将模型组大鼠完全随机分为四组,高、中、低剂量组及空白对照组,并向高、中、低剂量组灌服麝香,空白对照组灌服生理盐水。14天后处死大鼠取出缺损部位的颅骨,并对其脱钙、制作切片。免疫组化染色,光学显微镜下观察,每个切片随机选取3个视野,进行统计学分析。结果麝香能促进颅骨骨缺损模型大鼠骨缺损处SDF-1表达,给药各浓度组和空白组比较有显著统计学差异(P<0.01),以低浓度效果最佳(P<0.05)。结论麝香均促进外源性rBMSCs在大鼠体内向损伤部位迁移的机制与麝香促进颅骨骨缺损模型大鼠骨缺损处SDF-1表达有关。
- 赵永利谢兴文李宁徐世红姜徽李盛华宋敏
- 关键词：麝香SDF-1免疫组化迁移
- Hoechst33342对大鼠骨髓间充质干细胞的标记被引量：4
- 2012年
- 背景:hoechst33342可以用于对骨髓间充质干细胞的标记,但是其标记的最佳浓度的研究目前尚未见报道。目的:观察不同浓度的Hoechst33342对大骨髓间充质干细胞的增殖、标记率的影响,以及其荧光持续时间。方法:贴壁筛选提取大鼠骨髓间充质干细胞,培养至第3代,流式细胞仪检测其表面抗原,成骨、成脂诱导后染色,用不同浓度Hoechst33342标记大鼠骨髓间充质干细胞后,检测标记后的大鼠骨髓间充质干细胞增殖率、标记率,荧光显微镜下观察其持续时间。结果与结论:①hoechst33342可以用于骨髓间充质干细胞的标记,其最佳标记浓度为5mg/L,标记持续时间较长,30d未见猝灭。②其荧光激发后对细胞有损伤作用,标记浓度超过10mg/L时,可致细胞死亡。③标记浓度在7.5mg/L时,细胞增殖受到抑制;标记浓度在2.5mg/L时,标记时间较短,7d时荧光减弱,14d荧光消失。结果表明,hoechst33342可用于骨髓间充质干细胞的标记,其对骨髓间充质干细胞标记的最佳浓度为5mg/L;细胞表型鉴定CD45阴性,CD44,CD90均呈阳性表达。
- 谢兴文侯费祎李宁李盛华宋敏
- 关键词：细胞标记骨髓间充质干细胞HOECHST33342标记率干细胞
- 骨髓间充质干细胞治疗缺血性股骨头坏死研究现状被引量：3
- 2017年
- 查阅相关文献,从股骨头坏死的发病机制、发病率及其危害性以及骨髓间充质干细胞在治疗股骨头坏死方面的研究历程做一综述,旨在为临床治疗股骨头坏死提供一定的借鉴。
- 徐世红谢兴文李宁李建国
- 关键词：骨髓间充质干细胞生物特性股骨头坏死
- 不同浓度麝香酮对外源性骨髓间充质干细胞在体内迁移的影响被引量：13
- 2012年
- 目的研究不同浓度麝香酮对体外培养大鼠骨髓间充质干细胞(rat bone rnarrow mesenchymal stem cells,rBMSCs)在体内迁移的影响,以期筛选出最佳的治疗剂量。方法 SD大鼠40只,随机分为4组,每组10只,采用牙科钻营造颅骨缺损的大鼠模型;利用贴壁筛选法提取大鼠骨髓间充质干细胞,传至第3代,并加入含有终浓度为10μmol/LBrdU进行标记,待细胞融合至于80%时,利用胰酶消化,配置成细胞密度为1×109cells/L细胞混悬液,然后通过尾静脉注入颅骨缺损的大鼠体内,回植后分别采用高(16.8μL/100g)、中(8.4μL/100g)、低(4.2μL/100g)剂量的麝香酮灌服实验大鼠,空白组以灌服等体积生理盐水作为对照。14d后取出颅骨,固定,脱钙,做免疫组化后,荧光显微镜下,计数BrdU阳性细胞。结果利用免疫组化处理后,进行灰度分析,麝香酮低、中剂量组与空白组比较,差异有统计学意义(P<0.01),麝香酮高剂量组与空白组比较,差异无统计学意义(P>0.05)。结论麝香酮具有促进外源性干细胞在体内的迁移作用,以中、低浓度麝香酮效果较好。
- 谢兴文侯费祎李宁李盛华宋敏
- 关键词：骨髓间充质干细胞麝香酮BRDU迁移
- 麝香对颅骨骨缺损模型大鼠单核细胞趋化蛋白1表达的影响被引量：6
- 2013年
- 目的观察不同剂量麝香对颅骨骨缺损模型大鼠骨缺损处单核细胞趋化蛋白1(MCP-1)表达的影响,探讨麝香促进外源性骨髓间充质干细胞(rBMSCs)向骨缺损处迁移的机制。方法采用贴壁筛选法培养rBMSCs,用流式细胞仪鉴定。大鼠颅骨骨缺损模型建立后回植rBMSCs。将模型组大鼠完全随机分为中药高、中、低剂量组及空白组,中药高、中、低剂量组灌服不同剂量的麝香,空白组灌服生理盐水。14 d后处死大鼠,取出缺损部位的颅骨,并对其脱钙、制作切片,免疫组化染色,光学显微镜下观察,每个切片随机选取3个视野拍照,将所得照片用IPP6.0处理计算IOD值,再进行统计分析。结果筛选纯化的rBMSCs呈均一的成纤维细胞样,贴壁生长,以长梭形为主,漩涡状盘旋排列,表型鉴定结果为CD45阴性表达,CD44、CD90表达阳性,rBMSCs经诱导后可向成脂、成骨分化,麝香能促进颅骨骨缺损模型大鼠骨缺损处MCP-1表达,中药各组与空白组比较差异有统计学意义(P<0.01),以低浓度效果最佳(P<0.05)。结论麝香促进rBMSCs在大鼠体内向损伤部位迁移的机制与其促进骨缺损处MCP-1表达有关。
- 谢兴文赵永利李宁徐世红王永胜姜徽李盛华宋敏
- 关键词：骨髓间充质干细胞麝香单核细胞趋化蛋白1免疫组化迁移
- 不同标记方法对大鼠骨髓间充质干细胞标记的研究被引量：1
- 2013年
- 目的观察Hoechest33342、BrdU、DAPI对大鼠BMSCs标记情况,比较其标记效果的差异性;培养转基因绿色荧光小鼠的BMSCs,观察细胞生长情况和其荧光持续时间,比较其与荧光标记后的干细胞之间的优越性。方法贴壁筛选提取大鼠BMSCs,培养至第三代,流式细胞仪检测其表面抗原,成骨、成脂诱导后染色;Hoechest33342、BrdU、DAPI标记大鼠BMSCs,检测标记后的大鼠BMSCs增殖率,显微镜下观察其荧光持续时间;观察转基因绿色荧光小鼠BMSCs在培养的不同时间段的细胞形态、荧光持续时间以及同上边3种标记方法比较的优缺点。结果 Hoechest33342、BrdU、DAPI可用于对BMSCs的标记;BrdU标记过程较长,在前期不存在荧光猝灭缺点,标记后经过荧光免疫组化处理后可见阳性细胞,Hoechest33342、DAPI标记过程较短,荧光持续时间较长,但此过程中必须避光,对操作带来了一定的困难。3种方法标记后对细胞增殖率无影响;转基因小鼠BMSCs生长较大鼠干细胞生长较慢,其优点是不用标记且荧光持续时间较长,用于细胞追踪研究更为方便可行。结论干细胞有多向分化的潜能,因此有很好的研究价值和应用价值,对干细胞进行标记,为干细胞迁移、归巢机制的研究提供更好的研究平台。
- 谢兴文侯费祎李宁李盛华宋敏
- 关键词：绿色荧光BRDUDAPI细胞标记
- Wnt信号通路在骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化机制的研究进展被引量：2
- 2011年
- Wnt信号通路是目前骨骼系统相关疾病发病机制和骨代谢研究的新热点,笔者就其对骨髓间充质干细胞向成骨细胞分化的机制及研究现状作详细阐述,旨在为相关研究提供一定的理论依据及参考。
- 谢兴文李盛华赵永利李宁宋敏
- 关键词：WNT信号通路骨髓间充质干细胞成骨细胞
- 麝香酮含药血清对大鼠骨髓间充质干细胞的增殖、分化的影响被引量：12
- 2013年
- 目的研究麝香酮含药血清对骨髓间充质干细胞(BMSCs)的增殖及其向成骨细胞分化的影响,初步了解麝香酮单体对骨髓间充质干细胞的作用机制。方法贴壁筛选法提取大鼠BMSCs,培养至第3代,流式细胞仪检测细胞表面抗原,成骨成脂诱导,鉴定认为培养成功后,利用制备的不同浓度麝香酮含药血清干预。测定细胞增殖率、碱性磷酸酶(ALP)活性、钙盐沉积量、骨钙素分泌量等,研究麝香酮含药血清对大鼠干细胞增殖、分化的影响。结果筛选纯化的BMSCs呈均一的成纤维细胞样,贴壁生长,以长梭形为主;表型鉴定:CD45阴性,CD44、CD95均呈阳性表达;用含药血清干预后的增殖率、ALP活性、钙盐沉积量、骨钙素分泌量、钙化结节量均高于空白对照组。结论麝香酮含药血清可以促进BMSCs的增殖、成骨分化。
- 侯费祎谢兴文席芳琴徐世红李盛华宋敏
- 关键词：骨髓间充质干细胞增殖分化麝香酮含药血清
- 麝香酮对外源性骨髓间充质干细胞在颅骨缺损大鼠体内迁移的影响被引量：6
- 2017年
- 背景:骨髓间充质干细胞是多向分化干细胞,在骨折愈合和中有着重要作用。如何促进其在体内迁移,进而促进骨缺损的修复,有着重要研究意义。目的:研究不同浓度麝香酮对外源性骨髓间充质干细胞在体内迁移的影响,探讨其促进骨折愈合的机制及其引经理论初探。方法:建立大鼠颅骨缺损的大鼠模型;贴壁筛选法提取干细胞,取第3代细胞,利用DAPI进行标记,然后尾静脉回植入颅骨缺损的大鼠体内。分别以0,42,84,168μL/kg麝香酮灌胃1次。结果与结论:与高剂量麝香酮组和空白组相比,低、中剂量麝香酮组骨缺损部分的骨髓间充质干细胞数量增加,干细胞因子和Fractalkine的表达水平明显增加。提示中低剂量麝香酮具有促进外源性干细胞在体内的迁移作用。
- 侯费祎谢兴文李慎松邵宏斌张莲
- 关键词：干细胞骨髓间充质干细胞麝香酮颅骨缺损DAPI干细胞因子FRACTALKINE
