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三江自然保护区野生迁徙水禽携带禽流感病毒和新城疫病毒状况的监测被引量：11: 2008年; 【目的】为了对途经三江保护区的野生迁徙水禽携带禽流感病毒(AIV)和新城疫病毒(NDV)的状况进行有效监测。【方法】在2005年10月、2006年4月、2006年10月3个候鸟的迁徙季节从三江保护区采集了158只野鸟的咽拭子和肛拭子样本。应用SPF鸡胚盲传、血凝和血凝抑制试验和RT-PCR等方法进行了病毒的分离和鉴定。【结果】结果共分离到20株AIV和13株NDV。20株AIV均来自2006年10月采集的样品,经常规血清学分型鉴定分为12个亚型,11个亚型来源于绿头鸭,分别为H2N2(2/20),H2N6(2/20),H3N4(1/20),H3N6(2/20),H3N7(2/20),H3N8(2/20),H6N2(2/20),H11N2(1/20),H11N3(1/20),H11N5(2/20),H11N6(1/20),另外一株来源于白眉鸭,为H5N2(1/20)。13株NDV则来自3个迁徙季节的5种不同水禽采,其中包括绿头鸭(8/13),豆雁(1/13),白额雁(1/13),绿翅鸭(1/13)和鸳鸯(2/13)。【结论】这一结果表明,拥有极大种群数量、在世界范围内广泛分布的绿头鸭,被认为可能是AIV和NDV最重要的自然宿主之一,并在病毒的传播上比其他野生鸟类具有更为重要的生态学意义。; 曾祥伟华育平李晓冰张智明; 关键词：禽流感病毒新城疫病毒

水貂阿留申病毒VP2蛋白主要抗原表位基因原核表达及其检测应用被引量：13: 2007年; 将构建好的重组质粒pMD-VP2a、pMD-VP2b分别经双酶切获得基因片段VP2a、VP2b,分别将其定向插入到原核表达载体pMAL-c2中,构建原核表达载体pMAL-VPa和pMAL-VPb。阳性重组质粒转化宿主菌TB1,经IPTG诱导,两段基因均获得表达;Westernblot分析表明表达蛋白具有良好的抗原性。用KCI染色后,切胶回收的方法对表达蛋白进行纯化,以纯化的目的蛋白作为诊断抗原初步建立了水貂阿留申的VP2-CIEP诊断方法。结果表明该方法具有较高的灵敏性和特异性,与传统的CIEP方法的检出符合率达94.3%。; 曾祥伟华育平梁冬莹; 关键词：水貂阿留申病毒原核表达

狐貉源犬瘟热病毒融合蛋白基因的同源性分析被引量：3: 2008年; 2004—2006年,从黑龙江省和内蒙等地发病饲养狐、貉中分离获得6株犬瘟热病毒(CDV),分别命名为MS01、SC01、ZD01、GN01、HL01、NM01分离株。根据Genbank上发表的的CDV F基因序列设计了1对特异性引物,应用RT-PCR方法分别对6个分离株F基因进行克隆、测序,并推导其氨基酸序列,绘制出F基因的遗传进化树。结果表明:6个CDV分离株F基因的开放阅读框架(ORF)均为1 989 bp,编码663个氨基酸,蛋白结构中的13个Cys残基位点和4个潜在的糖基化位点均高度保守,其裂解位点的氨基酸序列为220R-R-Q-R-224R。遗传进化分析表明:6个分离株与CDV代表强毒株A75/17属于同一谱系,均为强毒株。其中,HL01株与海豹瘟热病毒2型(PDV-2)亲缘关系较近,与其它5个分离株关系相对较远。; 张莉华育平曾祥伟刘澜澜; 关键词：犬瘟热病毒 F基因基因克隆同源性分析

圈养狐貉源犬瘟热病毒地方分离株H基因的遗传变异分析被引量：7: 2008年; 本研究于2004～2006年从人工饲养的发病狐貉中分离到6个CDV分离株，用RT—PCR方法扩增了其H蛋白基因片段，并对其进行了克隆和测序。测序结果表明，6个CDV分离株H基因阅读框全长均为1824bp，编码607个氨基酸，未发现碱基的插入和缺失。与Genbank中的34株CDV参考毒株的H基因序列进行比较和分析，现有的CDV毒株可以分为Asia-1、Asia-2、America-1、America-2、Europe和Arctic6个基因型，本实验中的分离株HL为Arctic基因型，与来自意大利的194／97株、丹麦的Green株同分在一组，其余5株分离株与来自日本的HAMA、UENO、Tanu96等毒株以及来自中国的TN株、GP株（大熊猫株）分在一组同属Asia-1型，表现出一定的地理位置相关性；6个分离株均与Onderstepoor、Convac等疫苗株差异较大、关系较远，提示病毒变异可能是造成目前已免疫动物仍然发生犬瘟热流行的原因之一。; 曾祥伟刘澜澜华育平; 关键词：犬瘟热病毒

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黑龙江省博士后基金(LBH-Z06153)