国家自然科学基金(81101562)
- 作品数：8 被引量：55H指数：4
- 相关作者：朱伟李文学殷花李军涛吴锦银更多>>
- 相关机构：广州市疾病预防控制中心中山大学广东省职业病防治院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 玻连蛋白促进肝癌细胞株增殖及迁移的初步研究被引量：4
- 2014年
- 目的:了解玻连蛋白(VTN)对肝肿瘤细胞株SMMC 7 721增殖和迁移能力的影响。方法:采用不同浓度VTN包被培养皿后接种、培养细胞,采用激光共聚焦显微镜观察VTN包被后细胞骨架成分微管蛋白形态的变化,用细胞增殖试剂分析VTN对细胞增殖率的影响及分析VTN对凋亡诱导剂抑制增殖作用的影响,采用Transwell侵袭实验检测VTN对细胞迁移能力的影响。结果:激光共聚焦观察结果显示VTN包被有助于促进细胞贴壁及细胞骨架蛋白形态结构的维持;VTN可促进肿瘤细胞的生长且呈剂量效应,并可减弱凋亡诱导剂对细胞增殖的抑制;Transwell侵袭实验结果显示VTN包被可促进细胞迁移。结论:体外实验条件下,VTN有助于肝癌细胞株SMMC 7 721的增殖及迁移,提示VTN在肝癌发生过程中可能具有促进肿瘤细胞增殖和迁移的生物学作用。
- 梁晓芸李文学陈建玲李军涛吴锦银杨光宇朱伟
- 关键词：肝细胞癌细胞增殖肿瘤细胞迁移
- 镉暴露对人胚肾细胞TET酶表达及DNA甲基化水平的影响被引量：5
- 2015年
- 目的：观察人胚肾细胞（HEK293）短期暴露于高剂量氯化镉（CdCl2）时，TET酶表达及DNA甲基化水平的变化。方法 HEK293细胞经CdCl2染毒24、48和72 h后，用细胞增殖与活性检测试剂盒（CCK-8）检测细胞存活率并记录细胞形态，Real-time PCR法检测mRNA表达水平，Western blot法检测TET3酶蛋白表达水平，并采用焦磷酸测序法检测全基因组DNA甲基化水平。结果细胞增殖及细胞存活率监测结果显示，CdCl2对HKE293细胞有毒性作用，其半数抑制浓度（IC50）为1.78μmol/L；CdCl2处理HEK293细胞24、48和72 h后，细胞形态发生改变，2.0μmol/L染毒组细胞呈空泡样变化且形态模糊。染毒剂量分别为0.0、0.5、1.0和2.0μmol/L时，TET1 mRNA相对表达量分别为0.23±0.13、0.48±0.12、0.59±0.16和0.95±0.39（F=182.89，P=0.002）；TET2 mRNA相对表达量分别为0.23±0.12、0.32±0.02、0.31±0.10和0.34±0.07（F=18.91，P〈0.001）；TET3 mRNA相对表达量分别为0.26±0.10、0.27±0.11、0.25±0.11和0.28±0.09（F=1.76，P=0.036）。TET1 mRNA、TET2 mRNA和TET3 mRNA相对表达量在染毒时间和染毒剂量均有交互作用（F值分别为32.94、23.04和13.78，P值分别为〈0.001、0.041和〈0.001）。Western blot检测结果显示，TET酶蛋白表达量在不同时间梯度和浓度梯度的改变趋势与mRNA相对表达量一致。染毒时间分别为24、48和72 h时，全基因组DNA甲基化水平分别为（55.01±3.62）%、（48.31±8.99）%、（48.76±6.60）%（F=18.50，P〈0.001）；染毒剂量分别为0.0、0.5、1.0和2.0μmol/L时，全基因组DNA甲基化水平分别为（55.29±2.83）%、（55.35±3.11）%、（48.58±6.40）%和（43.56±7.89）%（F=7.03，P=0.048）。全基因组DNA甲基化水平在剂量组和时间点有交互作用（F=2.73， P=0.043）。结论在CdCl2短期暴露下，随着染毒剂量和染毒时间的增加，TET酶mRNA和蛋白表达水平呈逐渐升高的趋势，且全基因组DNA也表现出去甲
- 李金慧李文学殷花张波朱伟
- 关键词：镉DNA甲基化
- 皮肤光老化发生机制及预防被引量：38
- 2014年
- 皮肤老化是一个复杂、多因素所致的过程,其结果是皮肤弹性和功能发生改变。引起皮肤老化的原因包括内源性(如年龄等)和外源性(如紫外线等)因素,后者所致的皮肤老化即皮肤光老化。本文以国外文献为基础,着重介绍皮肤光老化的发生机制,描述与之相关的主要信号通路,总结皮肤光老化的预防措施,以指导进一步的研究。
- 殷花林忠宁朱伟
- 关键词：皮肤光老化外源性因素
- 3,3’-二吲哚甲烷对UVA所致皮肤光老化干预作用的研究
- ＜正＞目的明确3,3’-二吲哚甲烷（3,3’-Diindolylmethane,DIM）是否能通过抗氧化应激以及抗炎性反应来预防或者延缓UVA诱导的光老化。方法在本研究中,我们选择人角质形成细胞HaCaT和昆明小鼠建立皮...
- 殷花李梦承杨光宇李军涛梁晓芸吴锦银李文学朱伟
- 文献传递
- 3,3'-二吲哚甲烷对过氧化氢诱导人角质形成细胞氧化应激的预防作用及其机制被引量：1
- 2015年
- 目的：探究3，3＇-二吲哚甲烷（DIM）对过氧化氢（H2O2）诱导人角质形成细胞（HaCaT）氧化应激作用的预防效应及可能机制。方法：体外培养HacCaT细胞，用H2O2建立氧化应激模型。采用CCK-8法检测不同浓度（1～20μmol／L）DIM对HaCaT细胞生长的抑制作用；流式细胞术检测DIM作用前后细胞内活性氧自由基（ROS）含量的变化；Western blot检测不同浓度DIM（0、5、10μmol／L）对HaCaT氧化应激相关蛋白核因子（NF-kB）和丝裂原活化蛋白激酶（MAPKs）磷酸化表达水平的影响。结果：成功建立了HacaT氧化应激模型。CCK-8法研究结果显示1～10μmol／LDIM对HacaT细胞无明显毒性作用（P〉0．05）；流式细胞术检测结果表明10μmol／DIM预处理可有效预防由H2O2诱导的HacaT内ROS产生（P〈0．05）；Western blot检测结果显示，随着DIM浓度的增加，HaCaT中p38-MAPK、JNK和NF—kB磷酸化蛋白表达水平均逐渐降低（P均〈0．05）。结论：DIM预处理可减弱HaCaT中由H2O2引起的氧化应激，其机制可能是通过抑制ROS的产生及对NF—kB、MAPK家族等氧化应激相关蛋白表达的调控作用来实现的，提示DIM可作为预防或改善氧化应激型皮肤细胞损伤的一种有效药物。
- 殷花李文学李梦承邓宇婷李金慧李军涛吴锦银杨光宇林忠宁朱伟
- 关键词：HACAT细胞氧化应激
- PFOS通过抑制ERK途径诱导HepG2细胞凋亡
- ＜正＞目的研究全氟辛烷磺酸（perfluorooctane sulphonate,PFOS）诱导人肝癌细胞株HepG2凋亡效应及可能的机制。方法接种HepG2细胞24h后,用不同浓度PFOS处理48h,采用MTT法观察细...
- 马艳李文学杨光宇李梦承李军涛梁晓芸吴锦银张波朱伟
- 文献传递
- 镉亚急性暴露对小鼠肝肾功能及甲基化水平的影响被引量：6
- 2015年
- [目的]初步探讨氯化镉(cadmium chloride,Cd Cl2)亚急性暴露(4周染毒)对小鼠肝肾功能、全基因组甲基化水平及去甲基化酶Tet1表达的影响。[方法]将48只SPF级KM小鼠(昆明小鼠,雌雄各半)随机分为4组:对照组(dd H2O)、Cd Cl2 17.5 mg/kg组、25 mg/kg组、35 mg/kg组。经口灌胃染毒(每天1次、每周5 d),共染毒4周,CO2麻醉法处死动物。测定肝脏和肾脏的脏器系数、血液常规及血液生化检查、肝肾组织病理学检查、全基因组DNA甲基化水平及Tet1酶表达水平。[结果]35 mg/kg染毒组小鼠活动度及精神状态较差。小鼠体重在各染毒周期和染毒剂量组间差异均有统计学意义,且存在交互作用(P<0.05)。与对照组相比,雄性小鼠肝脏质量和肝脏脏器系数在25 mg/kg和35 mg/kg剂量组差异具有统计学意义(P<0.05);血液常规检查结果显示,雌、雄性小鼠35 mg/kg染毒组血液白细胞(WBC)、血小板(PLT)、淋巴细胞(LYM)计数,均高于对照组(P<0.05);雄性小鼠在各个染毒剂量组间,WBC、PLT、LYM、RBC计数差异有统计学意义(P<0.05)。此外,血生化实验结果显示,各剂量组雄性和雌性小鼠中肝功能的主要指标谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)差异有统计学意义(P<0.05),肾功能的主要指标尿酸(UA)、血尿素氮(BUN)、肌酐(CR)差异均有统计学意义(P<0.05)。组织病理学分析发现25 mg/kg和35 mg/kg组雄性小鼠肝脏及肾脏呈现明显的病理性改变。Tet1 m RNA及其蛋白表达水平仅在雄性小鼠的肝脏、肾脏中表达的差异有统计学意义(P<0.05)。焦磷酸测序结果显示,雄性小鼠肝脏、肾脏甲基化水平表达差异有统计学意义(P<0.05),且其与Tet1 m RNA表达呈负相关(r=-0.473,P<0.05;r=-0.134,P<0.05)。[结论]Cd Cl2亚急性染毒可以诱导小鼠肝肾功能损伤,且对全基因组甲基化水平和去甲基化酶Tet1表达呈现出性别差异影响,雄性小鼠的肝肾组织Tet1表达参与调控全基因组DNA甲基化水平改�
- 李金慧李文学李军涛马艳吴燕殷花苏艺伟张波朱伟
- 关键词：镉DNA甲基化肾功能小鼠
- 吡格列酮对KKAy小鼠胰岛素敏感性的影响及机制被引量：1
- 2014年
- 目的观察吡格列酮(Pio)对胰岛素抵抗状态KKAy小鼠胰岛素敏感性的影响,并探讨其可能的机制。方法将16只8周龄的雄性KKAy小鼠随机分成2组:胰岛素抵抗模型组和Pio干预组,每组8只,另以8只同周龄的雄性C57BL/6J小鼠为模型对照组,3组小鼠均饲喂AIN93G饲料,Pio组在饲料中添加Pio,干预12周,测定Pio对小鼠血糖、血清胰岛素水平、葡萄糖耐量、胰岛素耐量等方面的影响,通过ELISA实验测定Pio对小鼠血清脂联素和瘦素水平的影响,通过Real time PCR实验测定Pio对小鼠附睾脂肪组织的脂联素和瘦素mRNA水平的影响,通过Western blot实验测定Pio对小鼠肝脏和附睾脂肪组织中过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)蛋白、胰岛素受体底物1(IRS1)及蛋白激酶B(PKB/AKT)的磷酸化水平的影响。结果 Pio干预可降低KKAy小鼠血糖、血清胰岛素水平,改善胰岛素耐量和葡萄糖耐量,升高血清脂联素水平,降低瘦素水平,同时增加附睾脂肪组织脂联素的mRNA表达水平。Pio干预可使KKAy小鼠肝脏和附睾脂肪组织中PPARγ蛋白、IRS1和AKT磷酸化水平均升高。结论 Pio可改善KKAy小鼠胰岛素抵抗,增加小鼠胰岛素敏感性,这些作用可能与Pio增加肝脏及附睾脂肪组织的PPARγ蛋白表达,从而激活胰岛素信号转导通路的蛋白有关。
- 吴锦银陈思凡李文学陈建玲朱伟冯翔
- 关键词：吡格列酮胰岛素抵抗过氧化物酶增殖物激活受体Γ胰岛素受体底物1
- 吡格列酮对脂质代谢紊乱小鼠的影响被引量：1
- 2015年
- 目的研究吡格列酮(Pio)对脂质代谢紊乱的KKAy小鼠血脂、肝脂和抗氧化能力的影响及机制。方法24只KKAy小鼠(自发性肥胖动物模型)按体重水平随机分成2组:高脂模型组和吡格列酮组,12只C57BL/6J小鼠作为高脂模型阴性对照组;三组小鼠均饲喂AIN93G饲料,吡格列酮组喂饲添加吡格列酮的AIN93G饲料。试验12周时CO2麻醉法处死实验动物,测定血脂、肝脂和氧化应激相关指标,通过制作肝脏组织切片观察脂肪异位沉积,检测肝脏组织的过氧化物酶增殖物激活受体γ(PPARγ)和腺苷酸激活蛋白激酶(AMPK)的蛋白质表达及磷酸化水平。结果吡格列酮干预后,可显著降低脂质代谢紊乱小鼠的血清和肝脏TG、升高血清HDL-C、增加血清和肝脏SOD活性并降低血清MDA含量(P<0.05或P<0.01);吡格列酮改善小鼠的肝细胞脂肪变性;吡格列酮干预后,小鼠肝脏的PPARγ蛋白质表达和AMPKα磷酸化水平升高。结论吡格列酮具有调节血脂、减轻肝脏脂质沉积、提高机体抗氧化能力的生物活性,这可能与其增加AMPK磷酸化有关。
- 杨光宇陈思凡李文学朱伟冯翔
- 关键词：吡格列酮氧化应激
- 玻连蛋白对肝癌细胞株凋亡的抑制效应及可能的机制被引量：2
- 2014年
- 目的了解玻连蛋白(Vitronectin,VTN)对肝肿瘤细胞株SMMC 7721生长的影响及其对抗3,3'-二吲哚甲烷(3,3'-diindolylmethane,DIM)诱导SMMC 7721凋亡的作用,并初步探讨该过程中所涉及的信号分子。方法采用细胞增殖试剂观察VTN对细胞增殖率的影响,采用激光共聚焦显微镜观察VTN微管蛋白形态的影响,采用流式细胞术和Western Blotting观察VTN对抗植物化学物诱导SMMC 7721细胞凋亡及所涉及的信号分子表达变化。结果 VTN可以剂量依赖的方式促进肿瘤细胞的生长,并可抑制细胞凋亡诱导剂对细胞诱导凋亡的作用。结论体外实验条件下,VTN有助于肝癌细胞株SMMC 7721生长并可保护SMMC7721细胞,使其免予受到凋亡诱导剂的作用,提示VTN在肝癌发生过程中可能具有促进肿瘤细胞生长、抑制化学物诱导凋亡的生物学作用。
- 朱伟刘颖芝李文学陈建玲李军涛杨光宇吴锦银梁晓芸
- 关键词：肝细胞癌细胞凋亡半胱天冬酶
