国家杰出青年科学基金(30800465)
- 作品数：6 被引量：11H指数：2
- 相关作者：韩雅玲闫承慧彭程飞邓捷汪洁更多>>
- 相关机构：沈阳军区总医院第四军医大学西京医院辽宁中医药大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家杰出青年科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 人参皂苷Rg1通过缺氧诱导因子1α促进血管内皮生长因子旁分泌被引量：7
- 2014年
- 目的:研究人参中提取的小分子活性物质皂苷Rg1能否促进大鼠骨髓间充质干细胞(marrow-derived mesenchymal stem cells,MSCs)分泌血管内皮生长因子,并进一步探究其作用机制与缺氧诱导因子1α(Hypoxia-inducible factor,HIF-1)的相关性。方法:用酶联免疫吸附剂测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)观察细胞培养上清中的血管内皮生长因子(vascular endothelial growth factor,VEGF)以及蛋白印迹法(western blot)观察细胞中缺氧诱导因子相关蛋白的变化。结果:①通过对照组与人参皂苷Rg1处理组比较发现,1小时前血管内皮生长因子的分泌在两组之间没有明显差异,而在1小时后人参皂苷Rg1处理组相比较于对照组的血管内皮生长因子分泌显著性增加;②进一步实验发现人参皂苷Rg1处理的骨髓间充质干细胞中的HIF-1α在1小时后明显增加,而HIF-1β没有随时间有明显变化。结论:人参皂苷Rg1具有促进骨髓间充质干细胞分泌VEGF的功能,并且发现HIF-1α在这一过程中发挥关键作用,为将来人参皂苷Rg1在临床中的广泛应用提供了重要的理论依据。
- 彭程飞王艳春汪洁邓捷田孝祥闫承慧韩雅玲
- 关键词：骨髓间充质干细胞人参皂苷RG1缺氧诱导因子1Α血管内皮生长因子
- TNF-α刺激大鼠骨髓间充质干细胞的机制研究
- 2011年
- 目的:研究肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)刺激大鼠骨髓间充质干细胞(marrow-derived mesenchymalstem cells,MSCs)的作用机制。方法:采取大鼠骨髓,以密度梯度离心分离出单个核细胞(MNCs),于体外培养并由牛垂体提取物(PEX)诱导扩增传代培养出骨髓间充质干细胞(MSCs)。经形态学和流式细胞仪检测MSCs表面标志物鉴定后,用TNF-α刺激骨髓间充质干细胞(MSCs),通过酶联免疫吸附剂测定法(enzyme linked immunosorbent assay,ELISA)观察比较不同组别细胞的生长因子分泌和蛋白印迹法(western blot)来观察细胞中蛋白的变化。结果:①经形态学观察和流式细胞仪检测MSCs表面标志物鉴定,提示骨髓间充质干细胞的培养成功。②无TNF-α刺激组与TNF-α刺激组比较,TNF-α刺激组的生长因子分泌显著性增加,而通过磷酸化IκB的表达量显著性增加提示NF-κB被激活(P<0.05);同时TNF-α刺激组与TNF-α+NF-κB抑制剂组比较,TNF-α+NF-κB抑制剂组的生长因子分泌显著降低,而通过磷酸化IκB的表达量显著减少提示NF-κB的活性被抑制(P<0.05)。结论:NF-κB对TNF-α刺激下的骨髓间充质干细胞分泌生长因子有关键性作用。
- 彭程飞韩雅玲邓捷闫承慧康建李洋李杰王艳春
- 关键词：骨髓间充质干细胞肿瘤坏死因子-Α核转录因子-ΚB
- TNF-α刺激下大鼠骨髓间充质干细胞凋亡的机制研究
- 2012年
- 目的:研究肿瘤坏死因子-α(Tumor necrosis factor-α,TNF-α)诱导大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow-derived mesenchymalstem cells,BMSCs)凋亡是通过激活核转录因子-κB(Nuclear translocation of the transcription factor nuclear factor-κB,NF-κB)。方法:采取大鼠骨髓,以密度梯度离心分离出单个核细胞(MNCs),于体外培养并由牛垂体提取物(PEX)诱导扩增传代培养出骨髓间充质干细胞(BMSCs)。用TNF-α刺激骨髓间充质干细胞(BMSCs),通过FITC-Annexin V/PI双染色法观察比较不同组别细胞的凋亡和蛋白印迹法(western blot)来观察细胞中蛋白的变化。结果:①无TNF-α刺激组与TNF-α刺激组比较,TNF-α刺激组的凋亡细胞显著性增加,而通过核内NF-κB的表达量显著性增加提示其被激活(P<0.05);②同时TNF-α刺激组与TNF-α+NF-κB抑制剂组比较,TNF-α+NF-κB抑制剂组的凋亡细胞显著减少,而通过核内NF-κB的表达量显著减少提示其活性被抑制(P<0.05)。结论:NF-κB对TNF-α刺激下的骨髓间充质干细胞存活有关键性作用。
- 彭程飞汪洁闫承慧李洋陶杰韩雅玲
- 关键词：骨髓间充质干细胞肿瘤坏死因子-Α核转录因子-ΚB凋亡
- E1A激活基因细胞阻遏子蛋白在人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用被引量：2
- 2009年
- 背景:研究内皮细胞凋亡的机制及其与动脉硬化形成的关系将为动脉粥样硬化的防治提供新的思路。而E1A激活基因的细胞阻遏子蛋白在内皮细胞凋亡中的作用,目前尚未见报道。目的:探讨E1A激活基因的细胞阻遏子蛋白在去血清诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用及其调控机制。时间及地点:实验于2007-10/2008-12在解放军沈阳军区总医院全军心血管病研究所实验室完成。材料:人脐静脉内皮细胞,Phoenixamphotropic293细胞,pLNCX-CREG和pLNCX-GFP反转录病毒真核表达载体。方法:采用持续去血清培养的方法诱导内皮细胞凋亡,用TUNEL染色和Westernblot检测去血清饥饿24,48,72h后各实验组细胞中cleave-caspase3表达;用pLNCX-CREG和pLNCX-GFP反转录病毒真核表达载体转染人脐静脉内皮细胞,并筛选稳定表达的细胞克隆;应用Westernblot检测E1A激活基因的细胞阻遏子蛋白的表达,并进一步应用流式双荧光染色分析E1A激活基因的细胞阻遏子蛋白过表达在去血清诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡中的作用。主要观察指标:cleave-caspase3表达量,人脐静脉内皮细胞凋亡率。结果:成功构建了E1A激活基因细胞阻遏子过表达的人脐静脉内皮细胞模型,证实内皮细胞E1A激活基因细胞阻遏子的表达随凋亡的增加而增加,E1A激活基因细胞阻遏子过表达的人脐静脉内皮细胞去血清饥饿后凋亡较对照组明显减少。结论:E1A激活基因细胞阻遏子过表达抑制了去血清诱导的人脐静脉内皮细胞凋亡,机制可能与调控PI3K蛋白表达有关。
- 陶杰闫承慧郭鹏吴光哲王占胜韩雅玲
- 关键词：凋亡人脐静脉内皮细胞PI3K
- 体外缺血缺氧条件下大鼠骨髓间充质干细胞凋亡发生的机制研究
- 2011年
- 目的:研究体外大鼠骨髓间充质干细胞(Bone marrow-derived mesenchymal stem cells,BMSCs)在缺血缺氧条件下发生凋亡的作用机制。方法:采取大鼠骨髓,以密度梯度离心分离出单个核细胞(MNCs),于体外培养并由牛垂体提取物(PEX)诱导扩增传代培养出骨髓间充质干细胞(MSCs)。经形态学和流式细胞仪检测MSCs表面标志物鉴定后,骨髓间充质干细胞(BMSCs)在缺血缺氧条件下培养,通过Annexin V/PI双染细胞凋亡检测比较不同组别细胞的凋亡率和蛋白印迹法(western blot)来观察细胞中蛋白的变化。结果:①经形态学观察和流式细胞仪检测MSCs表面标志物鉴定,提示骨髓间充质干细胞培养成功。②对照组(无缺血缺氧)与缺血缺氧组比较,缺血缺氧组的凋亡率显著性增加,而通过磷酸化Akt的表达量显著性增加提示PI3K(Phosphoinosi-tide-3kinase)/Akt(ProteinkinaseB,PKB)信号通路被激活(P<0.05);同时缺血缺氧组与缺血缺氧+PI3K/Akt抑制剂(LY294002)组比较,缺血缺氧+PI3K/Akt抑制剂(LY294002)组的凋亡率显著降低,而通过磷酸化Akt的表达量显著减少提示PI3K/Akt信号通路被抑制(P<0.05)。结论:PI3K/Akt信号通路对体外缺血缺氧条件下培养的骨髓间充质干细胞凋亡发生有关键性作用。
- 邓捷韩雅玲彭程飞闫承慧田孝祥康建
- 关键词：骨髓间充质干细胞缺血缺氧PI3K/AKT凋亡
- 骨髓间充质干细胞移植治疗心肌梗死机制的研究进展被引量：2
- 2011年
- 心肌梗死（myocardial infarction，MD是由于冠状动脉循环改变引起冠状血流和心肌需求之间不平衡而导致的心肌损害，是临床上一种严重的缺血性心脏病（ischemic heart isease，IHD）。梗死的心肌细胞逐渐被瘢痕组织取代，由于瘢痕组织缺乏弹性，难以满足心脏收舒功能的要求，
- 栾波李杰韩雅玲
- 关键词：骨髓间充质干细胞心肌梗死细胞移植
