国家重点基础研究发展计划(2013CB530803)
- 作品数：26 被引量：131H指数：7
- 相关作者：张旭马鑫李新涛高宇王保军更多>>
- 相关机构：中国人民解放军总医院南京医科大学华中科技大学更多>>
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- 人微管蛋白辅助因子A基因真核表达载体的构建鉴定及对肾癌细胞株786—0增殖的影响
- 2014年
- 目的构建含有人微管蛋白辅助因子A（TBCA）的真核表达载体并观察其对。肾癌细胞株786-0增殖的影响。方法构建真核表达载体pcDNA3．0．Flag-TBCA和pCMV-TBCA—IRES—EGFP，并进行酶切、测序检验、脂质体转染细胞后利用Western blot法检测蛋白表达。以四唑氮化合物（MTS）法绘制细胞生长曲线。结果成功构建了真核表达载体pcDNA3．0-Flag—TBCA和pCMV—TBCA—IRES-EGFP。转染后TBCA在细胞中表达明显升高（P〈0．05）。但在转染后第3、4、5、6天，重组质粒组吸光度值分别为0．52±0．04、0．85±0．04、1．20±0．08、1．61±0．11；与对照组比较无统计学意义（P〉0．05）。结论TBCA的过表达载体构建成功，但在786-0细胞中过表达TBCA后对并不能对细胞增殖产生明显影响。
- 逄海港张鹏宋尔霖李新涛马鑫张旭
- 关键词：肾癌增殖
- TD—IκBα病毒包装及其对肾癌细胞株ACHN增殖和侵袭的影响被引量：3
- 2014年
- 目的构建pLVX-TD—IκBα—IRES—ZsGreenl慢病毒表达载体及包装病毒，观察稳定转染TD-IκBα对肾癌细胞株ACHN增殖和侵袭的影响。方法从pCFG5-IEGZ—TD—IκBα质粒上获得的目的基因片段克隆入pLVX-IRES—ZsGreenl载体，并进行测序。将慢病毒载体与包装质粒delta8．91和p-VSVG以4：3：2比例共转染293T细胞，收集病毒上清并感染肾癌细胞株ACHN，5d后采用Western blot检测TD-IκBα蛋白的表达，使用四唑氮化合物（MTS）和Transwell侵袭实验方法检测细胞增殖、迁移和侵袭能力的变化。结果成功构建pLVX—TD—IκBα—IRES—ZsGreenl慢病毒表达载体，包装病毒后成功感染ACHN细胞株，感染组细胞株中的TD—IκBα蛋白显著表达增高。感染组细胞在490nm处吸光度值明显下降（P〈0．05）。细胞迁移和侵袭实验中，相对于阴性对照组穿膜细胞数[（361．400±42．379）个和（328．500±27．031）个]，感染组穿膜细胞数[（252．200±26．142）个和（127．300±35．572）个]显著减少（P〈0．05）。结论成功构建pLVX—TD—IκBα-IRES—ZsGreenl重组慢病毒表达载体并包装病毒，过表达TD—IκBα蛋白可显著降低ACHN细胞株的增殖、迁移和侵袭能力。
- 李新涛马鑫逄海港高宇范阳张旭
- 关键词：IΚBΑ肾透明细胞癌增殖
- 糖尿病肾脏疾病预后标志物的研究进展被引量：1
- 2015年
- 糖尿病是当前最具挑战性的公共健康问题之一,全世界的患病人数高达3.47亿。其中糖尿病肾脏疾病（diabetic kidney disease,DKD）的发生率为25%～40%。DKD患者有较高的终末期肾脏病（end-stage renal disease,ESRD）的风险,是慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）患者透析的主要原因，早期识别可能进展至ESRD的高危人群非常重要。
- 董哲毅陈香美
- 关键词：肾脏保护肾脏疾病微量白蛋白尿疾病预后炎症标志物
- 甲基丁香酚保护胰岛细胞免受缺氧/复氧损伤的作用机制研究
- 2023年
- 目的探讨甲基丁香酚对胰岛缺血/再灌注损伤的保护作用及其可能机制。方法选取6~8周雄性BALB/c小鼠分离纯化胰岛,将其分为正常对照(Normal)组(普通培养,不予任何处理)、缺氧/复氧(H/R)组(予H/R处理)、H/R+二甲基亚砜(DMSO)组[予二甲基亚砜(dimethyl sulfoxide,DMSO)和H/R处理];H/R+甲基丁香酚(Me)组(予以甲基丁香酚和H/R处理)。使用吖啶橙/碘化丙啶双染,对每组胰岛细胞进行活力检测,酶联免疫吸附法(ELISA)测定胰岛细胞功能,即胰岛素分泌情况。选取小鼠的胰岛β细胞系Min6细胞,通过CCK8检测甲基丁香酚在不同的浓度梯度下对正常培养和经H/R处理后的胰岛细胞的增殖活性影响。再将Min6细胞按照处理方式不同分为正常对照(Normal)组、缺氧/复氧(H/R)组、H/R+二甲基亚砜(DMSO)组和H/R+甲基丁香酚(Me)组,分组定义同小鼠原代胰岛。通过流式细胞术和Hoechst 33342核染色检测各组Min6细胞凋亡率,Western blot检测各组p-JNK、p-p38、JNK、p38、Bcl-2、Bax等蛋白的表达情况。所得数据用单因素ANOVA或t检验进行统计学分析。结果H/R组原代胰岛细胞死亡细胞占比为(29.47±2.65)%,较Normal组的(7.63±1.53)%明显上升,组间差异有统计学意义(P<0.001)。H/R+Me组胰岛死亡细胞占比为(20.63±3.07)%,较H/R组和H/R+DMSO组的(29.47±2.65)%和(30.13±1.50)%下降,组间比较,差异均有统计学意义(P<0.05和P<0.01)。在高糖刺激下,H/R+Me组胰岛的胰岛素分泌水平为(1.76±0.08)mg/L,较H/R组和H/R+DMSO组的(1.24±0.14)mg/L和(1.27±0.05)mg/L上升,差异均有统计学意义(P<0.01)。正常的Min6细胞经甲基丁香酚处理后,在一定浓度范围(0~40μmol/L)内,对细胞的活性无明显影响。经H/R处理的Min6细胞,予甲基丁香酚(5μmol/L)后,细胞活性较未添加甲基丁香酚组增加(1.19±0.03和1.00±0),差异有统计学意义(P<0.01)。与H/R组和H/R+DMSO组相比,H/R+Me组细胞的总凋亡率下降(Hoechst 33342染色:14.50%±1.0
- 李晴雯杨慧芳张季王梦琴张佳思孙凯伦王志恒宫念樵
- 关键词：胰岛甲基丁香酚
- 肝静脉交通支在肝移植治疗布加综合征中的作用被引量：4
- 2017年
- 目的布加综合征容易误诊，探讨布加综合征的诊断和肝移植治疗方式。方法回顾分析2例布加综合征患者行肝移植的临床资料，术前误诊和诊断正确各1例。结果均为肝硬化失代偿期、Child分级C级患者。病例1诊断为肝癌复发，肝硬化病因未明，后检测血吸虫抗体阳性。行背驮式肝移植后患者出现下半身肿胀，详细回顾术前影像学资料发现肝内存在肝静脉交通支，确诊术前实际为布加综合征肝静脉和肝上段下腔静脉病变型，经保守治疗后好转，长期效果不佳。吸取病例1的教训，病例2经影像学检查也发现了肝静脉交通支，诊断为布加综合征肝静脉和肝段下腔静脉病变型。行原位肝移植切除全肝和肝段下腔静脉，无并发症顺利出院，随访7个月正常。结论不明原因的终末期肝病患者，需考虑布加综合征的可能；薄层多层螺旋CT或磁共振检查显示的肝静脉之间的交通支是确诊布加综合征的特征性征象，同时显示的肝静脉或下腔静脉病变决定了不同的肝移植手术方案。
- 王少发陈知水陈栋魏来蒋继贫罗鸿昌李开艳陈根汤浩李震夏黎明胡道予董汉华张万广张必翔陈孝平
- 关键词：布加综合征肝静脉侧枝循环肝移植
- 肾黏液样小管状和梭形细胞癌2例病例报告并文献复习被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨肾癌的罕见类型肾黏液样小管和梭形细胞癌(MTSCC)的临床病理特点、治疗和预后。方法:回顾性分析2009年11月、2013年10月收治的2例MTSCC患者的临床资料,并结合文献进行讨论。结果:2例患者均为女性,发病年龄分别为47、57岁,均由体检时发现,无临床表现。均为单侧单发,直径均在4 cm左右,影像学资料提示乏血供肿瘤,均采用后腹腔镜肾根治术,病理报告显示免疫组化CK7、CK19均为阳性,CD10阳性、阴性各1例。1例随访6年,1例随访1年,术后均无复发转移。结论:MTSCC是一类罕见的肾细胞癌,恶性程度较低,预后较好。影像学资料显示乏血供的肾占位病变在MTSCC的诊断中占有重要地位,需要与乳头状肾细胞癌、肾梭形细胞癌、间叶型梭形细胞肉瘤鉴别。治疗方法可选择根治性切除术和保留肾单位手术,根据肿瘤大小、位置、肾功能进行选择,微创手术优于开放手术。尽管预后相对好,仍有伴或不伴肉瘤样改变的MTSCC发生远处转移的报道,因此应重视术后的随访。
- 刘侃赵超飞罗国雄孟庆禹姚远新马明辉王雷武翀张旭
- 关键词：肾肿瘤黏液样小管状和梭形细胞癌
- KCNJ5基因148dupT突变对H295R细胞醛固酮分泌的影响
- 2014年
- 目的:研究KCNJ5基因148dupT突变对H295R细胞醛固酮分泌的影响及相关机制。方法:构建KCNJ5基因148dupT突变和非突变型质粒,选取H295R肾上腺腺瘤细胞系和293T人胚肾细胞系,应用jetPRIME转染试剂将突变和非突变以及对照质粒转染H295R细胞系以及293T细胞系,使用DiSBAC2染料检测293T细胞膜电位的变化、放射免疫分析法检测H295R细胞醛固酮的合成以及实时定量PCR检测CYP11B1和CYP11B2基因的表达。结果:148dupT突变型KCNJ5基因转入293T细胞可以导致膜电位去极化;转入H295R细胞可以导致醛固酮分泌增加,和CYP11B1和CYP11B2基因的表达增加。结论:148dupT突变型KCNJ5基因可能通过细胞膜电位去极化使得醛固酮合酶基因表达增加,进而导致H295R细胞醛固酮分泌增多和醛固酮瘤的发生发展。
- 李新涛王保军马鑫吕香君逄海港范阳高宇艾青张旭
- 关键词：醛固酮瘤基因突变
- 肾原发性神经内分泌癌诊治分析(附10例报告)被引量：2
- 2016年
- 目的:探讨肾原发性神经内分泌癌(NECK)的临床病理特点,提高对该疾病的诊治水平。方法:回顾分析2000年1月~2015年11月期间诊治的10例病理诊断为NECK患者的临床病理资料。归纳总结该类肿瘤的临床特点、病理学特点、诊疗手段及临床预后。结果:10例患者病理诊断均为NECK,其中男2例,女8例,平均年龄40.1(22~70)岁。左肾2例,右肾8例。肿瘤最大径平均7.35(2.5~21.0)cm。TNM分期:T1N0M02例,T2N0M03例,T3N0M04例,T3N1M01例。10例患者均行手术治疗。平均随访21.2(1~75)个月,1例失访,2例患者术后发生远处转移,2例死亡。结论:NECK临床罕见,诊断依赖病理组织学及免疫组化检查,治疗以手术为主,辅以化疗,其中类癌恶性度较低,预后相对较好,其余类型恶性度高,发展迅速,预后较差。
- 武翀马明辉赵超飞王雷刘侃孟庆禹姚远新罗国雄郭爱桃张旭
- 关键词：肾肿瘤
- 中国肝移植发展概况被引量：16
- 2018年
- 肝移植起源于欧美国家，我国肝移植的发展离不开国际器官移植和肝移植发展的大背景。
一、国际器官移植和肝移植发展的里程碑事件
1905年，carre首创血管缝合法突破血管吻合技术的瓶颈，从此真正开展了血管吻合的各种器官移植实验研究，并因对器官移植的贡献于1912年获得诺贝尔奖。
- 王少发陈孝平
- 关键词：肝移植血管吻合技术器官移植诺贝尔奖
- 多房囊性肾细胞癌26例临床诊治分析被引量：2
- 2015年
- 目的:探讨多房囊性肾细胞癌的诊断与治疗。方法:回顾性分析2008年1月~2014年2月收治26例多房囊性肾细胞癌患者的临床表现、诊断方法、手术方式、病理结果及预后情况。结果:26例患者中,行开放手术4例,其中因术中粘连严重中转开放手术2例,微创手术22例,其中腹腔镜手术4例,后腹腔镜手术17例,机器人辅助腹腔镜手术1例;保留肾单位手术14例,根治性肾切除术12例。26例患者术后病理报告均为多房囊性肾细胞癌,26例均获随访,随访12~82个月,平均43.8个月,均未见肿瘤复发和转移。结论:多房囊性肾细胞癌是一种恶性程度低的肾肿瘤,预后良好。影像学检查对其早期诊断有重要价值,手术治疗为多房囊性肾癌的首选治疗方式。
- 赵超飞陈路遥罗国雄李世超王雷孟庆禹姚远新高宇张瑜马鑫
- 关键词：肾肿瘤多房囊性肾细胞癌
