安徽省科技攻关计划(06013136B)
- 作品数：5 被引量：10H指数：2
- 相关作者：沈际佳潘丽红任翠平赵志荣王晓楠更多>>
- 相关机构：安徽医科大学安徽省血吸虫病防治研究所安庆医药高等专科学校更多>>
- 发文基金：安徽省科技攻关计划安徽省人才开发基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 日本血吸虫重组表膜蛋白Tetraspanin 2免疫诊断价值初探被引量：1
- 2010年
- 目的 探讨日本血吸虫重组表膜蛋白Tetraspanin 2（rSjTsp2）作为免疫诊断抗原的潜能.方法 利用表达纯化的rSjTsp2建立间接ELISA法（rSjTsp2-ELISA）检测不同感染时期的感染日本血吸虫家兔血清特异性IgG抗体,并与成虫粗抗原（AWA）-ELISA法进行比较.结果 rSjTsp2-ELISA对感染日本血吸虫2、4、6周家兔血清特异性IgG抗体检测的敏感性分别为75.4%（46/61）、77.6%（45/58）和81.5%（44/54）,AWA-ELISA法敏感性分别为68.9%（42/61）、86.2%（50/58）和88.9%（48/54）,同一时期两种方法检测抗体的效果比较,差异无统计学意义（x2值分别为0.652、1.454、1.174,P均＞0.05）.结论体外成功表达了日本血吸虫表膜蛋白rSjTsp2,其原核表达重组蛋白具有一定的诊断应用潜能.
- 张云霞赵志荣
- 关键词：血吸虫膜蛋白质类免疫学试验酶联免疫吸附测定
- 日本血吸虫Sj-Ts4样蛋白基因的克隆、表达和初步鉴定被引量：4
- 2007年
- 目的为了寻找血吸虫病新的免疫学诊断候选分子,在大肠杆菌中高效表达日本血吸虫Sj-Ts4样融合蛋白。方法提取日本血吸虫成虫RNA,设计引物,用RT-PCR法扩增出日本血吸虫Sj-Ts4样蛋白基因编码序列,T载体连接,将其亚克隆入PGEX-5X-1载体中,经酶切、测序证实正确后,转化入大肠杆菌DH5α并用IPTG对该重组菌诱导表达,SDS-PAGE和Western blot方法观察表达结果。结果RT-PCR法扩增出一条大小约为870bp的片段,表达质粒PGEX-5X-1-SjTs4经双酶切和以该重组质粒为模板进行PCR扩增,均可获得一条与PCR产物一致的DNA片段,诱导表达后,经SDS-PAGE可见一条约58ku大小的GST融合蛋白条带,并可与抗GST特异性抗体反应。结论本实验成功地克隆了日本血吸虫Sj-Ts4样抗原的编码基因,并在原核细胞中进行表达,为进一步验证其免疫诊断价值奠定了基础。
- 潘丽红朱绍春任翠平王晓楠赵志荣刘淼汪学龙沈际佳
- 日本血吸虫童虫cDNA文库的免疫筛选及其生物信息学分析被引量：1
- 2008年
- 目的筛选新的可能具有诊断意义的血吸虫蛋白分子,并对其进行生物信息学分析。方法以血吸虫病人血清筛选日本血吸虫15d肝期童虫cDNA文库,对阳性克隆插入片段的核苷酸进行序列分析,将结果通过Internet送入NCBI GenBank进行同源性比较并利用蛋白质分析软件进行生物信息学分析。结果经3轮筛选,共获15个阳性克隆,对其进行测序,获得11个基因,其中5个为编码日本血吸虫线粒体的基因,1个为编码日本血吸虫肌球蛋白的基因,其他5个分别为编码SjCHGC05315、SjCHGC01371、SjCHGC04782、SjCHGC05166、SjCHGC09769的基因。结论从日本血吸虫肝期童虫cDNA文库中筛选到一批日本血吸虫基因,为血吸虫病新的诊断候选分子的研究提供了材料。
- 张云霞王晓楠张薇娜沈际佳
- 关键词：日本血吸虫童虫CDNA文库免疫筛选生物信息学
- 日本血吸虫重组膜外蛋白rSj29免疫诊断的初步应用被引量：2
- 2010年
- 目的用重组日本血吸虫相对分子质量(Mr)29000膜外蛋白(rSj29)作为诊断抗原,探讨其在血吸虫病流行区免疫诊断的价值。方法在血吸虫病低度流行区芜湖南陵县弋江镇蒲桥和竞河村现场采血394份,同时采集粪样,用改良加藤法(三送九检)或集卵孵化法检查。制备rSj29和成虫粗抗原(AWA),分别用2种抗原进行间接ELISA(单盲法)和间接红细胞凝集试验(IHA)检测血样。结果粪检、IHA、rSj29-ELISA和AWA-ELISA检测结果显示,阳性率分别为4.8%(19/394)、62.2%(245/394)、68.3%(269/394)和89.9%(354/394)。rSj29-ELISA和IHA检测结果差异无统计学意义(χ2=3.2,P>0.05),一致率为80.7%(318/394)。IHA、rSj29-ELISA和AWA-ELISA与粪检符合率分别为42.6%(168/394)、36.0%(142/394)和15.0%(59/394)。结论 rSj29间接ELISA法对日本血吸虫病有一定诊断价值。
- 王萍任翠平汪天平沈际佳
- 关键词：日本血吸虫免疫诊断ELISA间接血凝试验
- 重组Sj-Ts4样蛋白在日本血吸虫病免疫诊断中的初步应用被引量：2
- 2009年
- 目的评价重组sj—Ts4样蛋白对日本血吸虫病的诊断价值。方法取血吸虫病患者（急性、慢性、晚期）血清74份、华支睾吸虫病患者血清24份、钩虫病患者血清8份和健康人血清30份，利用纯化、重组rSi—Ts4样蛋白和日本血吸虫成虫抗原（SjAWA），采用EUSA法分别检测血清中抗rSi—Ts4样蛋白特异性抗体和SjAWA抗体，比较两种检测方法的敏感性和特异性。结果rSj—Ts4-ELISA和SjAWA—ELISA法检测急性、慢性和晚期血吸虫病患者血清的阳性率分别为97．1％（33／34）、100．0％（16／16）、87．5％（21／24）和100．0％（34／34）、100．O％（16／16）、75．0％（18／24），经校正x2检验，两种检查方法比较差异无统计学意义（X2=1．23，P〉0．05）；健康人血清两种检测方法的假阳性率分别为6．7％（2／30）和3．3％（1／30），经校正x。检验，差异无统计学意义（x2=0．35，P〉0．05）；华支睾吸虫患者和钩虫病患者血清阳性率分别为12．5％（3／24）、20．8％（5／24）和12．5％（1／8）、37．5％（3／8），经校正x。检验，两种检查方法比较差异无统计学意义（x2值分别为0．60、1．33，P〉0．05）。结论rSj—Ts4样蛋白作为抗原，对免疫检测日本血吸虫病患者血清中的抗体具有较好的敏感性和特异性．对日本血吸虫病患者的诊断有较大的应用价值。
- 潘丽红张胜权沈际佳
- 关键词：重组蛋白质类血吸虫免疫学
