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凝结芽孢杆菌TL-4菌株固定化高温生产L-乳酸的研究固定化L-乳酸发酵: 本文研究了不同固定化材料固定凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)TL-4产L-乳酸实验,重点考察了海藻酸钠浓度、固定化颗粒直径、细菌添加量、温度与培养基pH对产酸的影响。固定化最优条件为:海藻酸钠3%、黄...; 高强刘发保王德培张健朱燕郑秀高年发; 关键词：凝结芽孢杆菌固定化海藻酸钠 L-乳酸; 文献传递

肉葡萄球菌tat-gfp融合基因的构建与表达被引量：1: 2011年; 将PCR扩增的肉葡萄球菌铁离子过氧化物酶基因(fepB)的双精氨酸转运(Tat)信号肽DNA序列与绿色荧光蛋白基因(gfp)亚克隆到pCX9质粒中构建可表达的tat-gfp融合基因,再将形成的pCX19-Tat-GFP质粒电转化转入肉葡萄球菌宿主中。提取阳性克隆子质粒进行酶切验证,表明表达载体pCX19-Tat-GFP成功地构建并转化。用木糖诱导重组菌株后,分别使用荧光显微镜和SDS-PAGE检测外源GFP蛋白的表达分泌情况。结果显示,菌体能够发出绿色的荧光,且蛋白电泳能够在细胞质与细胞壁组分中检测到GFP蛋白条带,表明肉葡萄球菌宿主可以将表达载体pCX19-Tat-GFP表达的GFP在细胞质中正确折叠,并以活性形式转运到细胞壁部分。; 于长燕郑秀朱燕孟庆艳王梦晓高强; 关键词：信号肽融合基因

构建运动发酵单胞菌代谢工程菌株生产L-乳酸: 乳酸是一种重要的工业有机酸,广泛应用于食品、医药、化妆品、纺织以及皮革等行业,聚乳酸则是一种可替代石油衍生塑料的可降解生物塑料,具有十分广阔的应用前景。在微生物发酵生产L-乳酸的过程中,L-乳酸最终通过L-乳酸脱氢酶将丙...; 姜坤妤朱燕潘超强张健刘浩高强; 关键词：L-乳酸 L-乳酸脱氢酶电转化; 文献传递

脲对棒状链霉菌棒酸合成的影响: 2012年; 【目的】棒酸(Clavulanic acid)是棒状链霉菌(Streptomyces clavuligerus)产生的β-内酰胺酶抑制剂,其合成过程中产生副产物脲,旨在探讨脲对棒酸合成的影响。【方法】通过发酵过程中脲和铵盐添加实验、阻断脲酶活性以及pH梯度实验研究脲对棒酸合成影响。【结果】脲添加实验结果表明:低浓度脲降低棒酸产量,当添加脲浓度达到20 mmol/L时,完全抑制棒酸合成。由于脲酶可以把脲水解为铵离子,导致铵离子浓度及pH提高,因此,通过阻断棒状链霉菌脲酶活性,可以更准确地反映脲对棒酸合成的影响。结果发现,脲酶敲除株发酵液中脲大量积累,浓度高达10 mmol/L,但棒酸产量没有明显降低,说明在该浓度下脲自身并不能抑制棒酸合成。添加脲降低野生菌棒酸产量,可能是脲被水解为铵离子或其引起的pH变化所致。而棒酸发酵液添加铵盐的结果显示铵离子对棒酸产量没有抑制作用;另外,pH梯度实验证实不同pH对棒酸产量影响较大。【结论】排除了脲和铵离子对棒酸合成的抑制作用,证实了脲酶水解脲导致pH提高是脲添加导致野生菌棒酸产量降低的真正原因,为进一步阐明棒酸合成调控机制提供了根据。; 戴西达向四海赵友宝高强杨克迁; 关键词：脲酶棒状链霉菌

凝结芽孢杆菌TL-4菌株固定化高温生产L-乳酸的研究固定化L-乳酸发酵: 本文研究了不同固定化材料固定凝结芽孢杆菌(Bacillus coagulans)TL-4产L-乳酸实验,重点考察了海藻酸钠浓度、固定化颗粒直径、细菌添加量、温度与培养基pH对产酸的影响。固定化最优条件为:海藻酸钠3%、黄...; 高强刘发保王德培张健朱燕郑秀高年发; 关键词：凝结芽孢杆菌固定化海藻酸钠 L-乳酸

产L-乳酸的运动发酵单胞菌代谢工程菌株的构建被引量：1: 2011年; 以运动发酵单胞菌(Zymomonas mobilis)CP4基因组DNA为模板,采用PCR技术克隆得到其丙酮酸脱氢酶基因(pdc)同源下游p3片段,并连接到广谱宿主载体pBBR1MCS3-Ppdc-ldhL中构建了重组质粒pBBR1MCS3-Ppdc-ldhL-p3,将此重组质粒转化到受体菌Z mobilis CP4中,分别以Ppdc和p3片段作为同源上游和下游片段,利用同源双交换重组技术将重组质粒中的ldhL基因置换了Z.mobilis染色体中的pdc基因,得到重组菌株Z.mobilis CP4(△pdc::ldhL)。测得重组菌株乳酸产量为10.8g/L,明显高于出发菌株,说明初步成功构建了产L-乳酸的运动发酵单胞菌代谢工程菌株。; 姜坤妤苏喆王勇潘超强朱燕郑秀高强; 关键词：运动发酵单胞菌丙酮酸脱氢酶

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