中国博士后科学基金(2004036440)
- 作品数:3 被引量:9H指数:2
- 相关作者:刘文励周剑锋付劲蓉冉丹孙汉英更多>>
- 相关机构:华中科技大学重庆医科大学更多>>
- 发文基金:中国博士后科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- 急性髓系白血病细胞多药耐药相关基因的筛选被引量:3
- 2005年
- 目的筛选急性髓系白血病细胞多药耐药相关基因。方法在建立HL-60/DNR多药耐药(MDR)细胞系的基础上,采用抑制消减杂交的方法结合基因芯片技术建立HL-60/DNR抑制消减杂交文库,并挑选其中部分克隆进行序列测定和同源性分析。结果HL-60/DNR对多种化疗药物均产生了不同程度的耐受。在所构建的HL-60/DNR抑制消减杂交文库中,经过基因芯片筛选出明显差异表达克隆共有14个;进一步分析发现这些基因在白血病细胞多药耐药中的作用大多未见报道。结论多种基因(已知的或未知的)均参与了急性髓系白血病细胞多药耐药的调节,大规模筛选与克隆这些基因为进一步研究急性髓系白血病细胞多药耐药产生的机制奠定了必要的理论基础。
- 付劲蓉刘文励周剑锋孙汉英罗莉冉丹张恒
- 关键词:白血病急性髓性多药耐药抑制消减杂交基因芯片
- AGM区基质细胞促进小鼠胚胎干细胞向成血-血管干细胞分化的实验研究
- 2006年
- 目的探讨主动脉-性腺-中肾(AGM)区来源的基质细胞诱导胚胎干细胞(ESC)向成血-血管干细胞分化的促进作用。方法从孕11 d的小鼠胚胎AGM区分离、培养基质细胞,鉴定后用作支持细胞,与小鼠胚胎干细胞共同培养,通过原始细胞集落(BL-CFC)的形成情况及流式细胞仪检测CD34+/Flt-1+细胞比例,评价AGM区基质细胞对小鼠ESC-D3细胞系向成血-血管干细胞的定向诱导作用。结果在AGM区基质细胞的支持下,由ESC来源的CD34+细胞由(12.71±1.76)%增加到(39.71±3.76)%,并且CD34+/Flt-1+细胞比例明显提高,达到(26.59±1.77)%;同时由ESC来源的代表成血-血管干细胞的BL-CFC集落增加了3倍。结论AGM区基质细胞可促进胚胎干细胞向成血-血管干细胞分化,探明其机制对研究造血及血管发育机制有积极意义。
- 付劲蓉刘文励周剑锋孙汉英冉丹郑邈
- 关键词:胚胎干细胞造血发育血管发育
- 多药耐药相关基因HV126的电子克隆及在化疗前后白血病细胞中的表达被引量:8
- 2005年
- 目的 探讨白血病细胞多药耐药发生的分子机理,寻找新的多药耐药相关基因。方法 以HL- 6 0细胞为“驱动方”,以多药耐药细胞系HL- 6 0 / VCR为“实验方”,建立人白血病多药耐药细胞系HL-6 0 / VCR抑制消减杂交文库,利用基因芯片技术从中筛选出一条在野生型HL - 6 0细胞中基本不表达,而在HL - 6 0 / VCR耐药细胞中呈低丰度差异表达的新表达序列标记序列。用表达序列标记拼接的同源基因克隆法得到人类新基因HV12 6序列,再利用生物信息学数据库和软件对其进行功能的预测和分析。最后针对推导序列开放阅读框设计引物,逆转录-聚合酶链反应检测推导HV12 6基因序列在临床白血病患者化疗前后白血病细胞中的表达。结果 HV12 6的c DNA序列长1991bp,编码36 5个氨基酸,其编码蛋白序列局部与新近发现的在细胞凋亡与炎症反应中起重要作用的蛋白基序“PYRIN”存在约4 3%的相似性。逆转录-聚合酶链反应结果提示该基因与白血病细胞受化疗药物的作用和耐药存在联系。结论 HV12 6可能是与白血病细胞耐药相关的一条新基因,有必要对该基因进行进一步的实验室克隆与功能研究。
- 付劲蓉刘文励周剑锋周玉峰徐酉华金先庆
- 关键词:多药耐药相关基因化疗前后HL-60/VCR电子克隆白血病细胞多药耐药白血病细胞耐药