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一株植物乳杆菌所产细菌素的性质及诱变筛选被引量：4: 2014年; 以从自制乳酪中分离获得的1株植物乳杆菌为研究对象,其能大量分泌对单核细胞增多性李斯特菌有极强烈抑制作用的细菌素。对其细菌素性质及效价进一步研究发现：所产细菌素具有热稳定性,pH稳定性,在pH2~12之间仍具有一定的抑菌活性。经过细菌素效价实验,确定该菌所产细菌素活力大大高于文献报道的其他同类细菌素,相对Nisin效价为4199 IU/mL,并可与抗生素比较效价,相对利福平效价为458μg/mL。进一步将该植物乳杆菌进行甲基磺酸乙酯（EMS）诱变,以抗生素利福平为标准曲线,最终得到细菌素上清液对单核细胞增多性李斯特菌效价由458μg/mL提高到682μg/mL,比诱变前提高了48%。; 郑雯孙琳宋诙; 关键词：植物乳杆菌细菌素诱变甲基磺酸乙酯

植物乳杆菌CGMCC.5297产细菌素条件的优化及应用: 2014年; 用响应面法对植物乳杆菌CGMCC.5297生产细菌素的培养基进行了优化。通过Plackett-Burman设计和中心组合试验设计,植物乳杆菌CGMCC.5297代谢产细菌素的最佳培养条件为酵母粉5.09g/L,牛肉膏10.85g/L,葡萄糖55.34g/L。此时的细菌素上清与指示菌单核细胞增多性李斯特菌CVCC1595共培养4h后,指示菌OD600nm为0.001 73,效价为4499 IU/mL,提高了1.4倍。在最优发酵条件下获得的试验结果与模型预测值吻合,说明所建立的模型是切实可行的。将优化后的植物乳杆菌上清加入到自制酸奶中,发现此细菌素对酸奶具有良好的保鲜效果。; 郑雯孙琳宋诙; 关键词：植物乳杆菌细菌素

一个新型耐热普鲁兰酶的结构与功能被引量：17: 2014年; 新型普鲁兰酶的研究对于普鲁兰酶制剂的国产化、打破国外垄断具有非常重要的意义。从我国云南腾冲地区轮马热泉的淤泥中分离获得了一株耐热普鲁兰酶产生菌LM 18-11,经16S rDNA序列系统进化树分析,确定该菌为厌氧芽胞杆菌Anoxybacillus属种,并从中克隆获得了耐热普鲁兰酶的编码基因,该酶在55℃-60℃、pH 5.6-6.4的范围内具有最大的反应活性。此外,该酶具有较好的热稳定性,在60℃下处理48 h,仍可保持50%以上的活力;动力学分析该酶的Vmax和Km分别为750 U/mg和1.47 mg/mL,是目前文献报道中比活力最高的耐热普鲁兰酶。同时还对该酶进行了晶体结构分析,结果显示该酶具有?-淀粉酶家族中典型的结构,在N端具有一个特殊的底物结合域,该结构域的缺失导致比活力和底物结合力都有相应降低,Vmax和Km分别为324 U/mg和1.95 mg/mL。同时,将该普鲁兰酶编码基因导入枯草芽胞杆菌中,在P43启动子的控制下,普鲁兰酶基因获得了高效表达,胞外酶活可达42 U/mL,相比初始菌种,表达活力提高40倍以上。研究表明该普鲁兰酶具有很好的应用前景。; 甄杰胡政李树芳徐健勇宋诙; 关键词：普鲁兰酶酶促动力学晶体结构异源表达

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天津市科技计划(12ZCZDSY15000)