山东省自然科学基金(2000C03)
- 作品数：2 被引量：4H指数：2
- 相关作者：张军唐胜建梁晓琴陈建华周晓燕更多>>
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- pcDNA3.1/RPs15载体构建及对皮肤成纤维细胞作用的实验研究被引量：2
- 2005年
- 目的 构建核糖体蛋白s15 (RPs15 )基因真核表达载体 ,研究其对小鼠皮肤成纤维细胞的体外作用。方法 将RT PCR法获得的鼠胚皮肤RPs15cDNA克隆入真核表达载体pcDNA3 1(- ) ,在FuGENE6介导下转染体外培养的小鼠皮肤成纤维细胞 ,观察RPs15基因的表达情况及其对成纤维细胞生物学特性的影响。结果 构建的重组表达载体pcDNA3 1 RPs15经DNA测序证实序列正确。RT PCR法检测RPs15基因在转染的成纤维细胞中获得表达 ,细胞生长密度下降 ,形态发生变化。结论 成功构建了真核表达载体pcDNA3 1 RPs15 ,并可在体外培养的小鼠皮肤成纤维细胞中表达 ,为深入研究RPs15基因对皮肤成纤维细胞的作用奠定了基础。
- 唐胜建王小柯吕晓杰刘霞张鹏张军周晓燕
- 关键词：成纤维细胞真核表达载体基因表达
- RPs29,RPs15,EndoA及septin2基因表达产物对小鼠皮肤培养细胞的作用被引量：2
- 2010年
- 目的构建RPs29,RPs15,EndoA及septin2基因短剪接本真核表达载体,研究其对体外小鼠皮肤培养细胞的作用。方法PCR扩增鼠胚皮肤mRNA逆转录产物,分别获得RPs29,RPs15,EndoA及septin2基因短剪接本septin2s。构建其真核表达载体pcDNA3.1(-)/RPs29,pcDNA3.1(-)/RPs15,pcDNA3.1(-)/EndoA及pcDNA3.1(-)/septin2s,转染体外培养的小鼠表皮细胞及成纤维细胞。观察基因的表达情况及其对小鼠皮肤培养细胞生物学特性的影响。结果RT-PCR法检测RPs29,RPs15,EndoA及septin2s在转染的表皮细胞及成纤维细胞中均获得表达,pcDNA3.1(-)/RPs29和pcDNA3.1(-)/RPs15转染组成纤维细胞生长密度下降,其中pcDNA3.1(-)/RPs29转染组成纤维细胞发生凋亡,pcDNA3.1(-)/EndoA和pcDNA3.1(-)/septin2s转染组表皮细胞明显增殖。结论RPs29,RPs15,EndoA及Sep-tin2基因短剪接本能够影响小鼠表皮细胞及成纤维细胞的增殖。
- 张军王小珂牟少春梁晓琴陈建华唐胜建
- 关键词：转基因表皮细胞成纤维细胞
