广东省医学科学技术研究基金(A2003275)
- 作品数：3 被引量：5H指数：1
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- 硅转化BALB/c-3T3细胞基因组DNA异常甲基化的研究
- 2003年
- 目的 对硅转化细胞基因组DNA异常甲基化进行研究 ,探讨硅的表遗传致癌机制。方法 从结晶型硅 (Si)转化BALB/c 3T3细胞中提取基因组DNA ,经Mse1(甲基化非敏感性酶 )单独消化或Mse1和BstU1(甲基化敏感性酶 )联合消化 ,消化产物用甲基化敏感性内切酶指纹法 (MSRF)进行分析 ,差异显示出异常甲基化基因片段 ,进一步将异常甲基化DNA片段亚克隆和序列测定 ,再与基因文库中的基因进行类比分析。结果 发现硅转化细胞存在 6条异常甲基化DNA(其中 1条为高甲基化 ,5条有低甲基化现象 ) ,序列测定显示这些异常甲基化基因片段似乎来源于一些RNA转录和蛋白质翻译等基因家族。结论 DNA异常甲基化会导致基因表达激活或抑制 ,因此硅转化细胞基因组某些功能基因DNA异常甲基化导致的异常表达 。
- 雷毅雄Pius Joseph2Tong man Ong
- 关键词：硅转化细胞DNA甲基化基因
- 氯化镉诱发16HBE细胞恶性转化不同阶段P16基因甲基化研究被引量：5
- 2008年
- 目的对氯化镉(CdCl2)诱发16HBE细胞系恶性转化不同阶段P16基因启动子区甲基化状况进行研究,探讨镉的表遗传致癌机制。方法从各组CdCl2恶性转化不同阶段及接种裸鼠成瘤的16HBE细胞中提取全基因组DNA,采取甲基化特异性PCR法(Methylation-specific PCR,MSP)检测该基因组P16基因启动子区的甲基化状况,与非转化的16HBE对照细胞进行比较,并用去甲基化因子5-Azac(5-Aza-2’deoxycytidine)处理有异常甲基化的细胞。结果CdCl2恶性转化及接种裸鼠成瘤的16HBE细胞P16抑癌基因启动子区CpG岛存在异常高甲基化现象,且随着细胞恶性程度的增加,甲基化现象有明显升高的趋势,同时发现有异常高甲基化的细胞经去甲基化处理后甲基化现象消失。结论P16基因启动子区的高甲基化导致抑癌基因表达关闭,无法正常发挥细胞增殖周期对细胞分裂和生长的负调控,造成细胞周期失控而导致无限制地细胞增殖,这可能是氯化镉诱导16HBE细胞恶性转化及接种裸鼠成瘤的一种表遗传致癌作用。研究结果可部分解释镉化合物的细胞转化作用及其可能的表遗传致癌机制,以及进一步对甲基化的表型逆转和药物治疗研究提供了重要依据。
- 邹晓妮雷毅雄魏莲
- 关键词：人支气管上皮细胞甲基化抑癌基因
- 肺癌组织基因组DNA异常甲基化的检测与分析
- 2006年
- 背景与目的对肺癌组织基因组DNA异常甲基化进行筛选与分析,探索肺癌发病的表遗传致癌机制。材料与方法从肺癌和癌旁组织中分别提取基因组DNA,经Mse1(甲基化非敏感性酶)单独消化或Mse1和BstU1(甲基化敏感性酶)联合消化,消化产物用甲基化敏感性内切酶指纹法(PCR-basedtechnique-Methylation-sensitiveRestrictionFingerprinting,MSRF)进行分析,肺癌组织出现异常甲基化基因片段,进一步将异常甲基化DNA片段进行亚克隆和序列测定,再与基因文库中的基因进行类比分析,同时按年龄、性别及吸烟状况分组并分析其与肺癌DNA异常甲基化的关系。结果84.5%(49/58)的肺癌样本出现异常甲基化现象,但肺鳞癌(82.1%)与肺腺癌(88.5%)的异常甲基化率差异无统计学意义(χ2=0.073,P>0.05);在异常甲基化DNA片段中,高甲基化现象占83%,低甲基化为17%,发现2条重要的高甲基化基因片段,它们分别与抑癌基因WT-1(Wilm'stumorsuppressorgene)和细胞周期调控基因CCNC(humancyclinCgene)匹配;经统计学分析,吸烟、年龄和性别与肺癌DNA异常甲基化无关。结论基因组DNA的异常甲基化,特别是高甲基化现象,可能在肺癌发生发展中起重要作用,这可能是肺癌发病的表遗传机制。
- 雷毅雄易菲陈家吴中亮
- 关键词：肺癌基因组DNA甲基化
