国家科技支撑计划(006BAD6A03)
- 作品数：3 被引量：19H指数：3
- 相关作者：韩宗玺邵昱昊刘胜旺孔宪刚金鑫更多>>
- 相关机构：中国农业科学院哈尔滨兽医研究所延边大学更多>>
- 发文基金：国家科技支撑计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 禽传染性支气管炎病毒单克隆抗体的制备及其B细胞抗原表位的鉴定被引量：7
- 2012年
- 为鉴定传染性支气管炎病毒(IBV)的抗原表位,本研究将IBV ck/CH/LDL/091022株免疫6周龄～8周龄BALB/c小鼠,将小鼠脾脏细胞与骨髓瘤细胞SP2/0融合,经过有限稀释法克隆筛选,得到一株针对IBV核衣壳(N)蛋白的单克隆抗体(MAb)2F2,经鉴定其染色体数目为101条,MAb亚类鉴定其重链属于IgG1,轻链属于к链。用肽扫描方法将IBV ck/CH/LDL/091022株N基因截短为具有相互部分重叠的23段,表达带GST标签的重组蛋白,与MAb 2F2进行western blot和ELISA反应后,鉴定其表位为397INWGDSAL404。将表位序列进行Blast结果表明,本研究鉴定的表位在大部分IBV株中均为保守抗原表位,为进一步建立IBV的检测方法奠定了基础。
- 王芳刘晓丽赵飞韩宗玺邵昱昊孔宪刚刘胜旺
- 关键词：传染性支气管炎病毒单克隆抗体表位
- 鸡传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体的制备及其B细胞表位的鉴定被引量：6
- 2010年
- 为鉴定传染性支气管炎病毒(IBV)B细胞抗原表位,本研究将IBV致弱株CK/CH/LDL97Ⅰ病毒与重组N蛋白作为免疫原,交叉免疫BALB/c小鼠,制备了1株抗IBV N蛋白的单克隆抗体(MAb)6D10。Westernblot结果表明该MAb可特异性的识别IBV CK/CH/LDL97Ⅰ株和重组N蛋白。同时利用噬菌体展示技术对IBV N蛋白抗原表位进行筛选,获得11个阳性噬菌体克隆。序列分析表明,这11个克隆均展示有"FGPRTK"6个氨基酸的序列,对应于IBV CK/CH/LDL97Ⅰ株N蛋白242位～247位氨基酸残基。同时,通过人工合成其编码序列并进行原核表达,利用MAb6D10对表达产物进行western blot分析,反应性良好。由此表明"FGPRTK"6肽为IBV CK/CH/LDL97Ⅰ株的一个线性B细胞抗原表位。表位的保守性分析结果表明,本研究鉴定的表位在各种血清型IBV毒株中均高度保守。本研究结果为进一步研究IBV N蛋白抗原的结构和功能及诊断试剂的研发奠定了基础。
- 宋扬韩宗玺邵昱昊孔宪刚刘胜旺
- 关键词：传染性支气管炎病毒N蛋白噬菌体展示抗原表位
- 抗鸡传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体制备与鉴定被引量：8
- 2009年
- 为建立抗鸡传染性支气管炎病毒(IBV)的单克隆抗体(MAb),利用浓缩的IBV致弱株CK/CH/LDL97ⅠF115病毒免疫BALB/c小鼠,采用杂交瘤技术,经间接ELISA和有限稀释法,经筛选和克隆后获得了一株抗IBV N蛋白MAb的杂交瘤细胞系(2D2)。经鉴定,其MAb的重链为IgG1亚型,轻链为κ链。ELISA和western blot试验结果表明,所获得的这株2D2 MAb可特异性识别IBV N蛋白。2D2 MAb可与多种血清型IBV发生反应,表明该MAb识别的表位可能位于N蛋白的保守区域。为进一步鉴定IBV的表位及诊断试剂的研究奠定了基础。
- 于丹韩宗玺邵昱昊李慧昕金鑫孔宪刚刘胜旺
- 关键词：传染性支气管炎病毒N蛋白单克隆抗体
