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北京油鸡MSAP毛细管电泳荧光检测技术的建立被引量：4: 2014年; 采用毛细管电泳荧光检测技术,对北京油鸡肌肉组织基因组进行甲基化敏感扩增片段多态性(Methylation sensitive amplified polymorphism,MSAP)检测。通过对基因组DNA用量、预扩产物稀释倍数、选择性引物浓度、Mg2+浓度、dNTPs浓度和电泳内标量等6个主要参数进行分析和优化,建立了适合北京油鸡基因组DNA甲基化分析的MSAP毛细管电泳荧光检测技术。重复实验表明,建立的毛细管电泳荧光标记的MSAP检测技术能够自动地、高通量地分析北京油鸡基因组的DNA甲基化状态,也适用于其他动植物基因组的DNA甲基化研究。; 李金龙唐韶青邹智元王海潮徐青; 关键词：MSAP 毛细管电泳荧光标记北京油鸡

北京油鸡肌肉和卵巢组织基因组DNA甲基化状态检测与分析被引量：9: 2014年; 以17周龄北京油鸡为试验材料,应用甲基化敏感扩增多态性(Methylation sensitive amplified polymorphism,MSAP)方法检测肌肉和卵巢组织的基因组DNA甲基化模式和程度,进而分析肌肉和卵巢组织基因组DNA甲基化的差异。结果表明,应用12对选择性扩增引物共产生4 297条清晰可辨的扩增条带,平均每个个体每对引物组合可获得10~20个条带。在检测的个体中,肌肉组织的甲基化水平为35.86%,卵巢组织为31.50%,2种组织的甲基化水平差异显著(P<0.01)。北京油鸡体重与肌肉组织的甲基化水平存在极显著负相关(P<0.01),与卵巢组织的甲基化水平的相关性未达到显著水平(P>0.05)。分离鉴定了5个组织特异性的甲基化片段。结果显示,北京油鸡肌肉和卵巢组织的基因组DNA的甲基化状态存在差异,而肌肉组织的甲基化状态对北京油鸡的体重具有重要作用。; 李金龙唐韶青赵萌王海潮徐青; 关键词：甲基化北京油鸡 MSAP

一种拮抗HIV-1并靶向DC的融合基因的设计及表达鉴定被引量：1: 2011年; 艾滋病病毒(Human immunodeficiency virus,HIV)通过与靶细胞膜的融合感染宿主细胞,研究表明阻断HIV与受体靶分子的结合可以阻止HIV进入宿主细胞,抑制HIV病毒的感染。设计合成了一个包含CD4和CCR5与HIV-1结合的主要功能结构区,及Flt3-L和Mip-3α分子的融合基因,构建了2个融合基因的真核表达载体pABK-CKR5-CD4/Flt3L-Mip3α(pABK-HIV-MF)和pABK-CKR5-CD4(pABK-HIV-MT),在人胚肾293细胞中进行了表达。RT-PCR、细胞免疫荧光技术、ELISA和Western blotting检测结果表明融合基因在真核细胞中获得了正确的表达,这为进一步研究其对于HIV-1的拮抗并靶向树突状细胞(DC)清除研究奠定了基础。; 赵萌徐青于继云余云舟; 关键词：融合基因真核表达树突状细胞靶向

DNA甲基化在动植物遗传育种中的研究进展被引量：17: 2011年; DNA甲基化是真核生物表观遗传学重要的机制之一,对基因转录水平的表达具有重要的调控作用。近年来,DNA甲基化在动植物遗传育种领域的研究引起了人们广泛的关注。我们从DNA甲基化与基因的表达调控、动植物基因组的甲基化状态、甲基敏感扩增片段多态性方法、DNA甲基化与杂种优势,以及DNA甲基化与分子标记等方面,简要综述了国内外有关DNA甲基化在动植物遗传育种研究中的进展,着重于全基因组DNA甲基化模式在动植物遗传育种中的相关研究和应用。; 徐青余云舟赵萌孙东晓; 关键词：DNA甲基化杂种优势分子标记基因组

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北京市自然科学基金(6112018)