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促黄体素受体LHR的一种剪接体在牛黄体不同发育时期表达量差异的研究: 2012年; 利用TaqMan-MGB探针实时荧光RT PCR检测方法,对牛黄体中促黄体素受体(luteinizing hotmone recep-tor,LHR)的一种剪接体(F类)在黄体4个不同发育时期(前,中,后,末)的相对表达差异进行了分析。同时将Re-al-time PCR中获得的数据用Realplex软件进行相对基因表达差异分析,应用SPSS软件对结果进行统计学分析。结果表明,LHR的F类剪接体在牛黄体发育的4个时期中,中期表达量是前期的0.535倍,后期表达量达到最高,是前期的5.65倍,末期显著下降是前期的0.011 6倍,各个时期LHR的F类剪接体表达量间存在极显著差异(P<0.01)。; 徐靖博任久生柳思源李付娟张阳阳王帅孙广杰朱亚楠高研张嘉保; 关键词：TAQMAN-MGB探针

miRNA-181b在牛腺垂体中的表达规律及其调控作用研究被引量：2: 2011年; [目的]探索m iRNA-181b在成熟（18月龄）和未成熟（1月龄）牛腺垂体中差异表达量及其调控功能。[方法]通过构建成熟（18月龄）和未成熟（1月龄）的延边黄牛腺垂体组织m iRNA cDNA文库,对文库中的m iRNA进行Solexa高通量深度测序,并对公牛腺垂体中的m iRNA进行鉴别。从测序结果中挑选出具有差异表达的m iRNA-181b,经实时荧光定量PCR验证其在不同发育期延边黄牛腺垂体中的表达规律,并通过TargetScanS预测m iRNA-181b的靶基因。[结果]m iRNA-181b在不同发育期牛腺垂体表达量存在显著差异,1月龄公牛腺垂体中m iRNA-181b表达量是18月龄的4.05倍。m iRNA-181b与FSHβ基因3＇非编码区838~844碱基可能是特异结合,其结合碱基为UGAAUGUA。[结论]该试验为FSHβ的转录后调控研究提供了理论依据。; 许橙薛文志赵茂鑫陈信刘颖于汪洋许艳丽马腾壑高妍张嘉保袁宝; 关键词：MIRNA 实时荧光定量PCR

牛bta-miR-26b靶基因EphA2的鉴定: 2012年; 利用miRNA靶基因预测数据库TargetScan,RNA22对bta-miR-26b的靶基因进行预测,并鉴定bta-miR-26b的靶基因。生物信息学分析结果显示,在EphA2基因3′非编码区域(3′-UTR)有bta-miR-26b的保守结合种子序列。扩增含有bta-miR-26b结合位点的靶基因的3′-UTR区,插入双荧光素酶报告载体pmirGLo Dual-LuciferasemiRNA Target Expression vector,与bta-miR-26bmimics共转染Hela细胞后检测荧光素酶的活性变化。通过荧光素酶活性检测证明在体外bta-miR-26b可以与EphA2基因结合,证明EphA2可能为bta-miR-26b的一个靶基因。; 于汪洋李凤霞孙喆袁宝高妍马腾壑戴立胜徐靖博孙广杰许橙张嘉保; 关键词：EPHA2

快速检测与种公牛精液品质相关的FSHβ基因连锁突变方法的建立: 2011年; 通过PCR克隆测序方法和TaqMan-MGB探针基因分型方法分别对86例样本中FSHβ第三外显子(4 338T→C、4 341C→T、4 350G→A)3个位点的连锁突变进行检测。结果表明:2种方法所得结果完全一致,AA型基因频率显著高于AB型(P<0.05)。本试验建立的TaqMan-MGB探针快速检测与种公牛精液品质相关的FSHβ基因连锁突变的方法,为种公牛的早期选种选育提供了技术支撑。; 于汪洋许艳丽戴立胜袁宝高妍马腾壑姜昊熊秋宏邓琼赵锐锋张嘉保; 关键词：TAQMAN-MGB探针

牛黄体中促黄体素受体剪接异构体的表达研究: 利用RT-PCR结合测序技术,对牛黄体中促黄体素受体(Luteinizing hormone receptor,LHR)在转录后通过选择性剪接而形成的剪接异构体进行鉴定,并比较不同剪接异构体编码蛋白质氨基酸序列的差异,利...; 熊秋宏邓琼于汪洋高妍马腾壑姜昊戴立胜许艳丽崔香顺赵玉民赵志辉张嘉保; 关键词：剪接; 文献传递

营养性抗热应激剂对热应激肉种公牛的影响被引量：5: 2012年; 选用12头延边黄牛、延黄牛和西门塔尔牛肉种公牛作为研究对象,在夏季热应激时在日粮中添加一定比例的含锌、硒、维生素E等微量营养素的抗热应激剂,试验期30 d。统计干物质采食量、精液产量,检测精液品质和血液中相关离子、酶和激素的含量。结果发现,与对照组比较,添加营养性抗热应激剂的试验组显著提高了种公牛的干物质采食量、精液产量与精液品质。说明所添加的营养性抗热应激剂能在一定程度上减缓热应激对肉种公牛的不利影响。; 陈健张嘉保吕伟东袁宝吕爱辉李付娟陈承祯; 关键词：硒维生素E 热应激

非营养性抗热应激剂对热应激种公牛生产性能及血液生化指标的影响被引量：3: 2012年; 选用12头延边黄牛、延黄牛和西门塔尔牛肉种公牛作为研究对象,在夏季热应激时往日粮中添加一定比例的含小苏打、瘤胃素、乙酸钠等非营养素性抗热应激剂,试验期为30 d。观察并统计它们的干物质采食量、精液产量,检测精液品质;在试验开始和结束时采集血液样品并检测其相关离子、酶和激素的含量。结果发现,与对照组相比较,添加非营养性抗热应激剂的试验组显著提高了种公牛的干物质采食量、精液产量与精液品质。说明所添加的非营养性抗热应激剂能在一定程度上减缓热应激对肉种公牛的不利影响。; 李付娟李玉林陈健张嘉保袁宝陈承祯; 关键词：抗热应激剂热应激

种公牛COX基因的单核苷酸多态性与精液品质的相关性分析: 2011年; 用长春优质肉种公牛繁育中心的33头种公牛,通过PCR-SSCP技术,检测细胞色素氧化酶(Cytochrome c ox-idase,COX)中存在的突变点,并对多态片段进行了测序,以确定突变的碱基类型和突变点的位置。根据PCR-SS-CP检测及测序结果得知:在细胞色素氧化酶基因的外显子中,第2外显子的92bp位处存在T→C的突变,该碱基位于密码子第2位,氨基酸由异亮氨酸突变为苏氨酸。同时结合精液品质测定记录,对长春优质肉种公牛繁育中心的33头种公牛的精液品质进行了相关分析,结果显示:细胞色素氧化酶基因的第二外显子CC型的活精子比率与CD型相比存在极显著差异(P<0.01),冻精活力存在显著差异(P<0.05)。; 徐靖博柳思源任久生于汪洋邓琼马腾壑姜昊高妍赵锐峰赵志辉张嘉保; 关键词：SNP 精液品质公牛

miRNA-181b在牛腺垂体中的表达规律及其调控作用研究(英文): 2011年; [目的]探索miRNA-181b在成熟（18月龄）和未成熟（1月龄）牛腺垂体中差异表达量及其调控功能。[方法]通过构建成熟（18月龄）和未成熟（1月龄）的延边黄牛腺垂体组织miRNAcDNA文库,对文库中的miRNA进行Solexa高通量深度测序,并对公牛腺垂体中的miRNA进行鉴别。从测序结果中挑选出具有差异表达的miRNA-181b,经实时荧光定量PCR验证其在不同发育期延边黄牛腺垂体中的表达规律,并通过TargetScanS预测miRNA-181b的靶基因。[结果]miRNA-181b在不同发育期牛腺垂体表达量存在显著差异,1月龄公牛腺垂体中miRNA-181b表达量是18月龄的4.05倍。miRNA181b与FSHβ基因3 非编码区838 ~844碱基可能是特异结合,其结合碱基为UGAAUGUA。[结论]该研究为FSHβ的转录后调控研究提供了理论依据。; 许橙薛文志赵茂鑫陈信刘颖于汪洋许艳丽马腾壑高妍张嘉保袁宝; 关键词：MIRNA 实时荧光定量PCR

牛FSHR基因第4外显子多态性检测及序列分析被引量：3: 2011年; 以西门塔尔和夏洛莱种公牛为对象,采用PCR-SSCP技术检测了促卵泡素受体(FSHR)基因第4外显子在西门塔尔、夏洛莱种公牛45个个体中的遗传多态性,结果发现多态性,旨在为研究该基因多态性与西门塔尔和夏洛莱种公牛繁殖性状的相关性提供理论依据,为筛选繁殖性状分子标记奠定基础。结果表明,牛FSHR基因第4外显子存在2个等位基因A和B,3种基因型分别为AA型、AB型和BB型。对多态片段的测序分析表明,FSHR基因第4外显子第38位碱基处发生碱基C→G的颠换,使得FSHR基因编码的受体胞外域部分出现一个脯氨酸到丙氨酸的变化,结合FSHR蛋白空间结构分析发现该氨基酸变化不直接影响FSHR与FSH的结合及FSHR转导信号能力。此外,据牛、绵羊、猪、马、人和大鼠FSHR基因第4外显子序列同源性比较表明:牛与绵羊该部分序列的同源最高为100%,与大鼠同源性最低为83%。; 许艳丽于汪洋邓琼柳思源徐靖博任久生戴立胜刘慧玉马腾壑姜昊高妍熊秋宏赵锐锋赵志辉张嘉保; 关键词：遗传多态性 PCR-SSCP

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