国家自然科学基金(31230072)
- 作品数:2 被引量:4H指数:1
- 相关作者:周继勇金玉兰邢刚宋万杰吕朋更多>>
- 相关机构:浙江大学南京农业大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金浙江省重大科技专项基金浙江省重点科技创新团队项目更多>>
- 相关领域:农业科学更多>>
- 猪圆环病毒2型ORF4蛋白诱导凋亡机制研究
- 猪圆环病毒2型(Porcine Circovirus2,PCV2)是最小的哺乳动物病毒,也是仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)的主要病原。已有研究认为PCV2的致病性与多方面因素相关,其中病毒诱导凋亡是致病机制之一。ORF...
- 林翠
- 关键词:猪圆环病毒2型感染线粒体凋亡生物学特性
- GST pull-down结合质谱筛选猪圆环病毒2型ORF4潜在互作蛋白
- 2019年
- 猪圆环病毒2型编码的ORF4蛋白是近年来发现的新蛋白。迄今为止,人们对ORF4所参与的细胞生物学过程知之甚少。本研究首先构建了带双标签的真核表达载体pCMV-N-Flag-GST,再将ORF4基因插入该载体中,形成pCMV-N-Flag-GST-ORF4。将质粒转染293T细胞表达ORF4后,通过GSTPull-down试验捕获细胞内潜在与ORF4互作的蛋白库。经SDS-PAGE分离及银染后,对所得的特异性条带进行质谱鉴定,筛选出5个与ORF4潜在互作的蛋白,包括丝氨酸/苏氨酸蛋白磷酸酶6催化亚基、α心肌蛋白、β肌动蛋白、SEC-14样蛋白5和肌球蛋白myosin 9。上述研究结果为深入揭示ORF4在病毒感染细胞过程中发挥的作用提供新的思路与方向。
- 林翠唐雯顾金燕顾金燕金玉兰廖敏廖敏
- 关键词:猪圆环病毒2型
- 猪圆环病毒2型Cap基因单核苷酸缺失突变体的构建与生物学特性被引量:4
- 2014年
- 猪2型圆环病毒(PCV2)是新出现的猪传染病—断乳仔猪多系统衰竭综合征病原.为了分析PCV2基因组核苷酸缺失突变对病毒复制的影响,以PCV2-HZ0201毒株基因组为模板,采用DpnⅠ定点突变技术,构建4个位于ORF2内的单核苷酸缺失突变体感染性克隆△1376PCV2,△1377PCV2,△1378PCV2和△1379PCV2.缺失突变体转染PK-15细胞后用间接免疫荧光检测病毒的拯救效果.结果显示,△1376PCV2感染性克隆能拯救出感染性病毒粒子,△1377PCV2,△1378PCV2和△1379PCV2感染性克隆不能拯救感染性病毒粒子,说明ORF2内1376位核苷酸的缺失不影响PCV2的复制.复制能力测定结果显示,△1376PCV2的复制能力比亲本病毒高10倍左右.促炎因子IL-6的转录本与血清浓度测定结果显示,△1376PCV2感染小鼠后的IL-6转录本与蛋白表达显著高于健康小鼠,且高于亲本病毒.这些数据首次揭示,ORF2内1376位核苷酸缺失的PCV2病毒粒子被提高了复制能力,同时促进了促炎因子IL-6的转录与表达.
- 金玉兰邢刚田朋飞吕朋宋万杰代丹周继勇
- 关键词:PCV2病毒拯救生物学特性
- 中国东部PCV2分子流行病学调查2009-2013
- 本研究从中国东部37个猪场分离到20株PCV2病毒。利用邻接法对其构建系统进化树,分析其基因型归属。结果显示,PCV2-HYan09和NBiao10毒株具有PCV2b标签序列,但在构建的系统进化树中却属于PCV2a,表明...
- 邱小伙吕朋邢刚金玉兰廖敏周继勇
- 关键词:PCV2基因型系统进化分析
- 文献传递
- 猪圆环病毒抗原快速检测试纸卡的制备
- 为了实现PCV2抗原的快速检测,本研究利用免疫胶体金技术,通过金标记抗猪PCV2的IgG,同时喷印猪IgG为检测线、猪PCV2-dCap蛋白为对照线,制备了一种检测PCV2抗原的试纸条。试纸条的检测灵敏度可达104TCI...
- 金玉兰宋万杰邱小伙邢刚周继勇
- 关键词:试纸条
- 文献传递
- 猪圆环病毒的入核机制研究
- 猪圆环病毒(PCV)是猪圆环病毒病(PCVAD)的主要病原,是目前发现能在哺乳动物体内复制的最小DNA病毒,主要引起断奶仔猪多系统衰竭综合征(PMWS)、猪皮炎与肾病综合征(PDNS)、猪增生性坏死性肺炎(PNP)。已有...
- 周建卫
- 关键词:猪圆环病毒