中央高校基本科研业务费专项资金(2011D10512)
- 作品数：5 被引量：26H指数：4
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- 相关领域：生物学轻工技术与工程更多>>
- 一种简单高效的酵母单菌落PCR方法被引量：7
- 2013年
- 目的:为快速简便地挑选出酿酒酵母重组克隆,探索建立一种经济、直接、高效的酵母单菌落PCR方法。方法:以Leu2MX6基因同源重组或重组质粒转化得到的酵母突变菌为材料,分别采用传统的提取基因组或质粒的方法、煮沸法及化学试剂处理法等制备PCR模板进行重组克隆鉴定,并对6种PCR模板制备方法的效果进行比较与分析;对加热提取法进行优化并进行重组子的提取和验证。结果与结论:直接以1 mm2单克隆菌株95℃处理5 min后的酵母菌落水悬浮液为模板进行单菌落PCR,是一种简单高效的酵母重组克隆鉴定方法。该方法能弥补传统方法的不足,且简便快速、结果稳定,可作为筛选和鉴定阳性克隆的有效手段。同时,这种单菌落PCR法也可应用于重组毕赤酵母的阳性克隆筛选。
- 陈忠翔房志家陈婷赵敏黄志伟
- 关键词：酵母菌落PCR重组克隆
- 酿酒酵母转化方法的新探索被引量：7
- 2012年
- 在现有电转化和聚乙二醇/醋酸锂(PEG/LiAc)诱导的化学转化的基础上,进一步研究和探索了酿酒酵母感受态细胞不同预处理及相应的转化条件对转化效率的影响。结果表明:处于对数生长早期(OD600=0.6)的酵母细胞的转化效果最佳;电转化中分别以120 mmol/L的DTT和300 mmol/L的LiAc预处理感受态酵母菌10 min,可以得到较高的转化效果;联合使用120 mmol/L DTT和300 mmol/L LiAc能大幅提升酵母转化效率,达到7.15×105cfu/μg,PEG/LiAc诱导的化学转化中使用300 mmol/L LiAc能大幅提升酵母转化效率,达到2.75×105cfu/μg,远高于文献报道的水平。同时证明了改进后的转化方法同样能够提高外源DNA同源重组转化效率。
- 房志家陈婷郝贺龙张兴群黄志伟
- 关键词：酿酒酵母电转化DTT
- 四种药用植物提取物抑菌保鲜活性的研究被引量：6
- 2012年
- 应用滤纸片扩散法、微量稀释法等方法研究银杏叶、当归、党参(野生)、藏茵陈4种药用植物水和乙醇提取物抑菌效果以及在食品保鲜方面的应用。结果表明水提取物均无明显的抑菌活性;银杏叶、藏茵陈醇提取物对金黄色葡萄球菌有抑菌活性,对大肠杆菌、酿酒酵母无明显抑菌效果,对金黄色葡萄球菌的最低抑菌浓度分别为450、160μg/mL。发现随着基质pH的改变,2种提取物的最低抑菌浓度随pH的增加而升高,但变化趋势较常用防腐剂山梨酸钾和苯甲酸弱,在pH5～8的范围,2种提取物的最低抑菌浓度均低于山梨酸钾。在模式食品中将提取物与山梨酸钾、苯甲酸进行联合添加具有协同增效抑菌活性,可降低化学防腐剂的用量,尤其是与苯甲酸联合添加,可在一周内完全抑制金黄色葡萄球菌的生长。
- 陈丽凤陈婷房志家赵敏黄志伟
- 关键词：天然防腐剂抑菌效果最低抑菌浓度山梨酸钾
- 磷脂酸磷酸酶与中性脂肪代谢调控被引量：4
- 2013年
- 中性脂肪主要指三酰甘油(triacylglycerol,TAG),是动植物细胞贮脂的主要形式。TAG约占人体脂类的95%,它的合成与动员是能量平衡调节的主要环节,而这一调节的失衡是诱发肥胖,产生高血压、心脏病及皮下脂肪丢失等疾病的主要原因。油脂代谢受到油脂基因所编码的脂肪相关调节酶的直接调控,中性脂肪代谢过程有高度的真核系统保守性。磷脂酸磷酸酶(phosphatidate phosphatase,PAP)也称脂素,相关基因PAH1(酿酒酵母)、LPIN1、LPIN2、LPIN3(哺乳动物)是研究人员近年确定的一类中性脂肪代谢调控的关键基因。相关的研究为进一步了解脂肪代谢有关疾病提供了一个重要线索,并且可能为研发控制脂肪代谢的新药提供新靶点。就近年PAP的相关研究主要成果进行概述。
- 房志家陈婷赵敏黄志伟
- 关键词：脂肪代谢分子调控
- 乙醇提取酵母泥谷胱甘肽工艺优化被引量：3
- 2013年
- 酵母泥是啤酒发酵过程中的主要副产物之一,约占啤酒产量的1.5%,啤酒废酵母中谷胱甘肽(GSH)含量较高。为提高酵母泥中GSH提取效率,采用乙醇提取法,并通过响应面法对乙醇提取新鲜酵母泥GSH工艺条件进行优化,在单因素实验的基础上,根据Box-Behnken实验设计原理,运用Design-Expert 8.0.6数据统计分析软件,采用三因素三水平的响应面分析法,研究乙醇体积分数、提取温度和提取时间3个因素及其交互作用对提取工艺的影响。确定最优工艺参数是:乙醇体积分数30.98%,提取温度35.81℃,提取时间59.39 min,GSH理论得率0.258%。与优化后的实际得率非常接近,与传统热水提法(0.168%)相比有明显优势,得到的GSH提取条件具有实际应用价值。
- 赵敏房志家陈婷黄志伟
- 关键词：酵母泥乙醇提取热水提取谷胱甘肽
