浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目([2012]241)
- 作品数：22 被引量：92H指数：6
- 相关作者：周铁丽张亚培李梅梅李斌陈华乐更多>>
- 相关机构：温州医科大学杭州医学院浙江大学更多>>
- 发文基金：浙江省卫生高层次创新人才培养工程项目国家自然科学基金浙江省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 产NDM-1泛耐药大肠埃希菌耐药机制及流行特性研究
- 目的 研究6株分离自温州医科大学附属第一医院的产NDM-1泛耐药(extensively drug-resistant,XDR)大肠埃希菌的耐药机制和分子流行病学特性.方法 采用琼脂稀释法测定6株泛耐药大肠埃希菌对临床常...
- 杜佳周翠李梅梅李斌陈华乐侯渊博周铁丽
- 关键词：大肠埃希菌XDRNDM-1
- 单宁酸对临床菌株的抗菌活性及其对生物膜的影响被引量：7
- 2015年
- 目的:分析单宁酸对临床常见分离菌株的抗菌活性及其对生物膜的影响。方法:收集9种临床常见分离菌株:金黄色葡萄球菌、表皮葡萄球菌、溶血葡萄球菌、粪肠球菌、屎肠球菌、大肠埃希菌、肺炎克雷伯菌、铜绿假单胞菌、鲍曼不动杆菌。采用琼脂稀释法测定各种抗菌药物对上述临床菌株的最低抑菌浓度(MIC),根据药敏试验结果,将每种临床菌株分为多重耐药(MDR)组和非多重耐药(n MDR)组,分别从各组随机抽取30株共540株菌作为实验菌株。采用琼脂稀释法检测单宁酸对上述菌株的MIC值,比较2组的差异。将单宁酸加入到生物膜培养基里以检测其对各组细菌生物膜形成的影响。结果:单宁酸对9种临床菌株均表现出较强的抗菌活性,其中对葡萄球菌属细菌的抗菌活性明显大于对其他菌的活性(P<0.05)。单宁酸对细菌生物膜形成有一定的抑制作用。结论:单宁酸对临床常见分离菌株有抗菌作用且可以影响生物膜的形成。
- 尉骁侯渊博周铁丽陈华乐李斌杜佳曹建明
- 关键词：单宁酸多重耐药抗菌活性生物膜
- 肺炎克雷伯菌生物膜形成能力及其与多黏菌素B耐药相关性研究被引量：4
- 2016年
- 目的 探究肺炎克雷伯菌生物膜形成能力及其与多黏菌素B耐药相关性.方法 收集温州医科大学附属第一医院临床分离的耐碳青霉烯类肺炎克雷伯菌（carbapenem-resistant Klebsiella pneumonia,CRKPs）共37株,琼脂稀释法检测亚胺培南（imipenem,IMP）、美罗培南（meropenem,MEP）、厄他培南（ertapenen,ETP）和多黏菌素B（polymyxin B,PB）对37株试验菌株的最低抑菌浓度（minimum inhibition concentrations,MICs）;96孔板结晶紫染色法检测37株试验菌株的生物膜A590值;检测37株试验菌株对PB的生物膜最低消除浓度（minimal biofilm elimination concentrations,MBECs）.结果 37株CRKPs对3种碳青霉烯类药物的敏感性都表现出不同程度的下降,对PB保持敏感,MIC为0.25～1 μg/mL,而MBEC为3～＞12μg/mL,相对于MIC值都表现为耐药;但是生物膜形成能力的强弱与MBEC值之间不存在线性相关性.结论 本次37株耐碳青霉烯肺炎克雷伯菌形成生物膜后可以增加对PB的耐药,但是生物膜形成能力的强弱与耐药程度无关.
- 侯渊博张亚培吴庆陈华乐李斌周铁丽曹建明
- 关键词：细菌生物膜肺炎克雷伯菌耐药
- 问号钩端螺旋体MazF蛋白对巨噬细胞的毒性作用分析被引量：1
- 2013年
- 目的了解问号钩端螺旋体（简称钩体）MazEF毒素-抗毒素系统中MazF蛋白对巨噬细胞的细胞毒性及其机制。方法采用原核表达系统表达问号钩体赖型赖株MazEF毒素-抗毒素系统中的MazE和MazF蛋白（rMazE和rMazF）。采用DNA和RNA降解试验确定rMazF的DNA或RNA酶活性以及rMazE抑制rMazF酶活性的作用。采用实时荧光定量RT-PCT、Westernblot和激光共聚焦显微镜法，分别检测问号钩体赖株感染THP-1单核细胞时mazE和mazF基因转录、表达及分泌情况。采用CCK-8法和流式细胞术检测mazF基因产物对THP-1细胞的细胞毒性及死亡方式。结果rMazF能水解问号钩体赖株和THP-1细胞的RNA，但无DNA酶活性，rMazE能抑制rMazF的RNA酶活性。感染THP-1细胞后，mazE-mRNA和mazF-mRNA及MazE和MazF蛋白表达水平显著升高，但仅有MazF蛋白外分泌。mazF基因产物对THP-1细胞有细胞毒性并引起细胞坏死。结论MazEF毒素-抗毒素系统中具有RNA酶活性的MazF蛋白是问号钩体的毒力因子，可引起感染的巨噬细胞坏死。
- 张金良Komi-Koukoura Komi楼宏强林旭瑷严杰孙爱华
- 关键词：问号钩端螺旋体毒素-抗毒素系统细胞毒性
- 不育症患者精液中金黄色葡萄球菌的精子制动活性及毒力基因研究
- 目的 研究不育症患者精液中金黄色葡萄球菌对精子活力的影响,并探讨金黄色葡萄球菌毒力基因与其精子制动活性之间的关系.方法 收集2014年1月至12月温州医科大学附属第一医院收治的589例男性不育症患者精液中分离的非重复金黄...
- 李斌杨旭叶建中陈华乐侯渊博杜佳周铁丽
- 关键词：金黄色葡萄球菌男性不育毒力基因
- 广泛耐药肺炎克雷伯菌生物膜形成能力及毒力基因相关分析被引量：6
- 2016年
- 目的了解广泛耐药(extensively drug-resistant,XDR)肺炎克雷伯菌生物膜形成能力及毒力基因分布特征。方法收集温州医科大学附属第一医院2013年5月至7月暴发流行的XDR肺炎克雷伯菌15株和同时期分离的敏感肺炎克雷伯菌30株。采用结晶紫染色法检测肺炎克雷伯菌体外生物膜形成能力,PCR方法筛查菌株毒力相关基因携带情况,并比较分析2组菌株生物膜形成能力和毒力基因的分布情况。结果 XDR肺炎克雷伯菌株与敏感菌株形成生物膜A590 nm值分别为0.505 3±0.291 2和0.429 8±0.235 6,二者差异无统计学意义(t=0.87,P=0.38)。15株XDR肺炎克雷伯菌中未检出荚膜多糖基因,而敏感菌株中荚膜多糖基因wzy-K2、wzy-K3和wzy-K57的检出率分别为10.0%、3.3%和6.7%。其他毒力相关基因ure A、wab G、mrk D、fim H和uge在XDR耐药菌株和敏感菌株的检出率均为100.0%,除上述5种毒力基因外,仅1株XDR肺炎克雷伯菌检出kfu BC毒力基因(6.7%)。而敏感菌株中kfu BC、rmp A、wca G、all S、iuc B、iro NB和mag A中检出率分别为20.0%、20.0%、10.0%、16.7%、40.0%、10.0%和10.0%,毒力基因iuc B检出率与XDR菌株相比,差异具有统计学意义(χ2=6.264,P=0.012)。结论 XDR肺炎克雷伯菌的生物膜形成能力与敏感菌株间无明显差异,其毒力谱较为单一,携带的毒力因子种类亦较敏感菌株少。
- 卢鸿张亚培毕文姿刘海洋张肖肖周铁丽
- 关键词：肺炎克雷伯菌广泛耐药生物膜毒力基因
- 氨苄西林分别联合庆大霉素和头孢哌酮对磷霉素耐药肠球菌的体外抗菌作用
- 2018年
- 肠球菌是引起患者尿路感染、腹腔脓肿、盆腔感染等常见院内感染的重要机会性致病菌。近年来，随着肠球菌感染率的不断升高和抗菌药物耐药性的不断增加．急需寻求应对肠球菌感染的策略。磷霉素作为近年来重新应用于临床的抗菌药物，在临床上发挥了较好的抗菌作用。但随着应用的增加，磷霉素耐药肠球菌也随即出现，为临床抗感染治疗带来极大困扰。
- 张晓亚毕文姿周翠张艺之董郭枫林婕张思琴郑相阔周铁丽
- 关键词：肠球菌感染磷霉素头孢哌酮庆大霉素氨苄西林临床抗感染治疗
- 男性泌尿生殖道感染患者分离的金黄色葡萄球菌耐药性及耐消毒剂基因流行特性研究被引量：9
- 2014年
- 目的：研究男性泌尿生殖道感染患者尿道分泌物中分离的金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物和消毒剂的耐药情况及消毒剂耐药基因携带情况。方法：收集男性泌尿生殖道感染患者尿道分泌物标本中分离的金黄色葡萄球菌152株，琼脂稀释法检测临床常用抗菌药物以及消毒剂氯已定对其最低抑菌浓度（MIC），同时采用头孢西丁纸片扩散法和mecA基因扩增法确定其中的耐甲氧西林金黄色葡萄球菌（MRSA）；多重PCR对MRSA菌株进行SCCmec耐药基因盒（SCCmec）分型，PCR扩增耐消毒剂基因qac；脉冲场凝胶电泳（PFGE）分析qacA／B基因阳性MRSA菌株间的同源性。结果：152株金黄色葡萄球菌中，MRSA占59．9％（91／152）；SCCmec分型结果显示以SCCmecV型为主，占63．7％（58／91），I型8株（8．8％），Ⅱ型2株（2．2％），Ⅲ型19株（20．9％），Ⅳ型4株（d．4％）。临床分离的金黄色葡萄球菌对青霉素、红霉素、环丙沙星、左氧氟沙星非敏感率较高，依次是：95．4％、72．4％、42．8％、44．7％，对呋喃妥因、替考拉宁、利奈唑胺以及万古霉素具有较高的敏感性。琼脂稀释法测得氯已定对152株菌的MIC值范围为0．25～16μg／ml；对MRSA菌株的MIC50＝2．0μg／ml，MIC90=4．0μg／ml，对MSSA菌株的MIC50和MIC50均为1．0μg／ml；152株金黄色葡萄球菌中，有72株（47．4％）携带qacA／B基因，6株（3．9％）携带smr（qacC＋qacD）基因，9株（5．9％）携带qacEal基因，2株（1．3％）携带qacH基因，未检出qacG、qacJ基因。PFGE结果显示qacA／B基因阳性MRSA菌株呈多克隆分布。结论：临床分离的金黄色葡萄球菌对常用抗菌药物表现出不同程度耐药，部分菌株对消毒剂氯已定耐受力较强，耐消毒剂基因以qacA／B为主，临床医生应该合理使用抗菌药物和体外消毒剂。
- 叶建中尉骁李小四孙瑶李梅梅张威樊昊曹建明周铁丽
- 关键词：泌尿生殖道感染金黄色葡萄球菌耐药耐消毒剂基因脉冲场凝胶电泳
- 临床分离肠球菌生物膜的形成能力及毒力基因的相关性研究被引量：12
- 2016年
- 目的了解本院临床分离肠球菌的生物膜形成能力以及其与毒力基因的相关性。方法收集温州医科大学附属第一医院2013年6月至2014年9月临床分离的肠球菌348株,其中粪肠球菌156株,屎肠球菌192株。采用结晶紫染色法测定肠球菌的生物膜形成能力,PCR方法筛查4种常见的肠球菌毒力基因esp、gel E、agg和ace的存在情况,统计分析肠球菌生物膜形成能力与毒力基因的关系。结果 348株肠球菌毒力基因esp、gel E、agg和ace的检出率分别为80.5%、46.0%、46.6%和44.3%,除esp基因外(P=0.078),粪肠球菌中的其他3种毒力基因的携带率均显著高于屎肠球菌(P<0.01);肠球菌的生物膜形成阳性率为54.6%(190/348),其中粪肠球菌的生物膜形成阳性率为75.6%(118/156),屎肠球菌的生物膜形成阳性率为37.5%(72/192);粪肠球菌esp、gel E和agg基因的携带与其生物膜形成阳性率密切相关,而屎肠球菌中,只有esp基因的携带与其生物膜形成阳性率密切相关(P<0.01)。结论本院分离的肠球菌具有较高的毒力基因携带率和生物膜形成能力,肠球菌毒力基因esp、gel E和agg的携带与其生物膜形成密切相关。
- 张肖肖马传玲刘海洋毕文姿卢鸿周铁丽
- 关键词：肠球菌毒力基因生物膜
- 粘质沙雷菌碳青霉烯类耐药机制研究被引量：8
- 2014年
- 目的：了解临床分离的粘质沙雷菌碳青霉烯类药物耐药机制及流行特点。方法收集温州医科大学附属第一医院2006-2012年临床分离的147株粘质沙雷菌，用Vitek2 Compact及配套革兰阴性细菌药敏卡检测其药敏情况；筛选出的11株碳青霉烯类耐药的粘质沙雷菌，用琼脂稀释法测定其对10种常见抗菌药物的MIC值；改良Hodge试验进行碳青霉烯酶表型检测；PCR检测碳青霉烯酶、AmpC酶、外排泵及外膜蛋白基因的携带情况；琼脂稀释法测定加入外排泵抑制剂CCCP前后碳青霉烯类药物MIC值的变化；SDS-PAGE分析菌株外膜蛋白有无缺失；对碳青霉烯耐药菌株进行接合转移试验，PCR扩增并测定接合子的MIC，PFGE分析菌株之间的同源性。结果11株粘质沙雷菌对青霉素类、头孢菌素类抗生素和厄他培南全部耐药，其中10株菌同时对亚胺培南和美罗培南耐药，但对氟喹诺酮类和氨基糖苷类药物有较好的敏感性；11株菌中10株携带blaKPC-2，1株携带blaIMP-1，8株菌同时携带blaEBC和blaMOX ，1株同时携带blaEBC和blaDHA ，1株菌同时携带blaEBC、blaMOX和blaDHA基因，其他基因未检出；加入CCCP后有7株菌对亚胺培南的MIC值降低4～64倍，有3株菌对厄他培南的MIC值降低8～256倍，而对美罗培南的MIC值没有变化；11株菌均未检出外膜蛋白缺失；有7株菌的blaKPC-2基因成功转移到受体菌，接合子与受体菌相比MIC值有不同程度提高；PFGE结果显示11株菌中有8株菌属于一个克隆型。结论产KPC-2碳青霉烯酶是本院粘质沙雷菌对碳青霉烯类耐药的主要原因，本研究表明KPC-2在温州地区存在克隆播散并且可以水平传播，故应引起高度重视。
- 孙瑶张环刘俊张晓蕾张亚培李梅梅周铁丽
- 关键词：粘质沙雷菌碳青霉烯类耐药性
