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羊驼细胞色素C氧化酶VIc亚基基因序列的测定与分析被引量：1: 2011年; 本研究通过克隆分析羊驼细胞色素c氧化酶VIc亚基基因的序列，对羊驼细胞色素c氧化酶的VIc亚基基因的结构和功能进行了初步探索。实验利用免疫印迹技术（Southern blotting）对已有羊驼皮肤cDNA文库进行筛选并测序，结果表明该基因大小为424bp，含一个完整的ORF，位于36～266bp，编码77个氨基酸。对该基因序列分析表明：该基因编码的蛋白质含有疏水性区域、一个跨膜区并具有信号肽。同源性分析表明，核苷酸序列同源性为76％～100％。; 耿建军穆晓丽张杰范瑞文董常生; 关键词：免疫印迹 CDNA文库羊驼

羊驼催乳素受体基因(PRLR)exon10的克隆与序列分析被引量：2: 2006年; 通过氰仿／异戊醇法从羊驼血液和组织中提取羊驼基因组DNA，首次扩增出羊驼PRLR基因（Prolactin Receptor，PRLR）exon10序列（GenBank登录号为DQ206831），并与其它动物相应区域作了同源性比较，结果表明：羊驼PRLR基因exon10的开放阅读框为1133bp，包括1046bp的编码区和87bp的拖尾区；同源性比较显示，羊驼PRLR基因exon10的核苷酸序列与哺乳动物（牛、绵羊、猪、狗、兔、大鼠等）的同源性较高，达80％，氨基酸序列的同源性则≥66％，而与鱼类的同源性则较低，仅为40％～45％。; 张巧灵董常生贺俊平姜俊兵; 关键词：羊驼催乳素受体基因克隆

内皮素受体在不同毛色绵羊皮肤中的表达和定位分析被引量：3: 2010年; 【目的】研究内皮素受体A和B(endothelin receptor A and B,EDNR A and B)在绵羊皮肤中的表达与定位,以及在不同毛色中的差异比较,探讨其在绵羊毛色形成中的作用及其相关机制。【方法】以不同毛色的成年绵羊为研究对象(设黑色毛和白色毛两组),用RT-PCR法检测EDNR基因在不同毛色皮肤中的表达,并使用实时荧光定量PCR技术分析不同毛色绵羊皮肤EDNR基因的相对表达量,采用免疫组织化学法和Western blot法对EDNR在绵羊皮肤中的表达进行定位和定量分析。【结果】荧光定量PCR结果显示黑色绵羊中EDNRA的相对表达量是白色绵羊的1.2648倍,EDNRB的则是1.8248倍;Western blot结果显示,皮肤组织粗蛋白提取物中含有EDNR蛋白,且受体A在黑白两组皮肤中表达不显著(P>0.05),受体B在黑色组的表达显著高于白毛组(P<0.05);免疫组化实验结果显示,EDNR蛋白在两组皮肤的表皮和毛囊中均有表达,通过光密度分析,受体A在黑毛皮肤各处细胞中的表达显著高于白毛皮肤,受体B则在除毛根鞘之外的其它两处细胞中表达显著高于白毛皮肤(P<0.05)。【结论】实验结果提示,EDNR参与绵羊皮肤黑素细胞的生成,且两受体作用效应存在差异。; 耿建军孙乐天穆晓丽张杰姜俊兵张映李宏全董常生; 关键词：内皮素受体绵羊 WESTERN BLOT 实时荧光定量PCR

Nitric Oxide Enhances the Sensitivity of Alpaca Melanocytes to Respond to a-melanocyte stimulating hormone by Up-regulating Melanocortin-1 Receptor: Nitric oxide(NO) and a-melanocyte stimulating hormone(a-MSH) have been correlated with the synthesis of melani...; DONG Yan-jun,CAO Jing,WANG Hai-dong,ZHANG Jie,ZHU Zhi-wei,BAI Rui,HAO Huan-qing,HE Xiao-yan,Fan Rui wen,DONG Chang-sheng~(**) College of Animal Science and Technology,Shanxi Agricultural University,030801,Taigu,Shanxi,China.; 关键词：ALPACA MELANOCYTE; 文献传递

催乳素受体基因与羊驼繁殖性能关系的初探被引量：6: 2007年; 通过氯仿/异戊醇法制备羊驼血液基因组DNA,采用PCR方法首次扩增出羊驼催乳素受体基因(prolactin receptor gene,PRLR)exon8-exon9序列(GenBank登录号为DQ198164),该片段长度为622bp。通过NCBI blast(http://www.ncbi.nlm.nih.gov/BLAST/)比较,结果表明:该序列包括exon8的82bp、intron8全序列472bp和exon9的68bp。同源性比较发现,羊驼PRLR基因exon8和exon9核苷酸序列与其它哺乳动物的相应区域的同源性特高,均≥92%;同时还发现羊驼exon8引物后第19个碱基为G,而其它哺乳动物(猪除外)均为A,猪则是在羊驼exon8引物后的第34个碱基处由G变为A,通过推导氨基酸序列分析发现,这种单碱基的突变使得羊驼与其它哺乳动物相比,该处的氨基酸由亮氨酸取代了异亮氨酸;在羊驼exon9引物前第22个碱基处也发生了A-G碱基替换现象,但这个碱基的突变发生在密码子的第3个碱基上,编码的氨基酸均为脯氨酸。在这些动物中只有羊驼为单胎动物,羊驼exon8核苷酸序列中A-G的碱基替换并引起编码氨基酸序列发生改变是否与羊驼繁殖性能有关还有待进一步研究。; 张巧灵姜俊兵贺俊平赫晓燕耿建军董常生; 关键词：羊驼催乳素受体基因繁殖性能单碱基突变

PAX3转录因子在羊驼皮肤组织中的表达和定位分析: 本研究旨在研究PAX3在羊驼皮肤组织中的表达和分布,试验利用免疫组织化学和Westernblot技术研究PAX3转录因子在不同被毛颜色羊驼皮肤组织中的表达与分布,结果表明PAX3在毛球基底层细胞之间,毛乳头周围和毛根部都...; 朱芷葳贺俊平于秀菊李鹏飞程志学董常生; 关键词：PAX3 黑色素细胞羊驼; 文献传递

内皮素-1(ET-1)对羊驼皮肤黑素细胞增殖和黑素生成的影响被引量：7: 2011年; 旨在研究内皮素-1(Endothelin-1,ET-1)对羊驼皮肤黑素细胞(Melanocyte,MC)增殖和黑素合成的影响。本研究中,体外培养正常羊驼皮肤黑素细胞,观察不同浓度ET-1(0、0.1、1、10、100nmol.L-1)对羊驼皮肤黑素细胞增殖、黑素含量、内皮素受体B(Endothelin recepter B,EDNRB)基因、酪氨酸酶(Tyrosinase,TYR)基因、酪氨酸相关蛋白-1(Tyrosinase related protein 1,TRP-1)基因和表皮黑皮素-1受体(Melanocortin 1receptor,MC1R)基因表达量的影响。结果表明,ET-1处理羊驼皮肤黑素细胞3d后,羊驼皮肤黑素细胞增多,黑素含量、EDNRB、TRP-1和TYR基因表达量都明显增加(P<0.05),以10nmol.L-1组最为显著。ET-1能诱导羊驼皮肤黑素细胞增殖、树突增长,诱导EDNRB、TYR和TRP-1基因表达量增高,使黑素合成增加;同时诱导MC1R基因表达量增高,从而通过α-MSH信号通路对羊驼黑色素的生成产生影响。; 耿建军张杰穆晓丽白瑞董彦君白俊明董常生; 关键词：ET-1 羊驼黑素细胞 EDNRB MC1R

羊驼AIF部分cDNA序列分析及其在不同毛色的表达定位被引量：1: 2009年; 通过对已构建的羊驼皮肤cDNA文库进行筛选和ESTs分析,发现与其它动物AIF基因相应cD-NA序列高度同源的序列,经序列分析证明命名为羊驼AIF基因序列,已经向Genbank提交。与其他动物(褐鼠、小鼠、人等)的AIF基因相应序列进行相似性比较,相似性分别为100%、91%、71.6%。运用免疫组化技术进一步研究该基因在羊驼皮肤中的表达和定位,结果显示AIF在羊驼毛囊的毛根、根鞘、毛球、毛乳头位置均呈阳性表达,且棕色皮肤比灰色皮肤表达量高,提示该基因可能和羊驼毛色形成或毛的生长相关。; 刘国敏董常生; 关键词：羊驼免疫组化

小鼠自然毛囊生长周期及β连环蛋白的表达被引量：4: 2010年; 目的观察昆明系小鼠自然毛囊生长周期的组织学特点,探讨β连环蛋白(β-catenin)在小鼠自然毛囊生长周期中的表达规律及其与毛囊生长更替的关系。方法采用石蜡切片HE染色、Western blotting以及免疫组织化学方法,研究小鼠(90只)毛囊的周期性变化,检测β-catenin在小鼠毛囊生长不同时期皮肤组织中的蛋白表达水平,并对其进行组织定位。结果处于不同生长时期的毛囊具有各期的特殊结构;Western blotting结果显示,在小鼠皮肤组织粗蛋白提取物中存在分子量约为85kD且与兔抗β-catenin多克隆抗体发生免疫阳性反应的蛋白条带;免疫组织化学结果显示,β-catenin在不同毛囊生长时期的表皮、皮脂腺、根鞘和真皮乳头均有不同程度的表达。结论昆明系小鼠毛囊生长呈周期性变化,β-catenin在毛囊生长周期中的阳性反应与毛囊的周期性变化存在相关性,表明β-catenin在昆明系小鼠自然毛囊生长周期中起维持、促进毛囊生长的作用。; 于秀菊范阔海贺俊平姜俊兵董常生; 关键词：毛囊 Β连环蛋白免疫印迹法免疫组织化学小鼠

白色青年羊驼皮肤cDNA文库的构建及毛色相关基因的表达分析: 从白色青年羊驼皮肤提取总RNA,并分离mRNA,利用SMART技术,构建了羊驼皮肤全长cDNA 文库。库容量达109,重组率达80％以上。同时通过T7和5’端特异引物对文库重组体进行了PCR鉴定,证明了该cDNA文库的高...; 范瑞文董常生张俊珍赫晓燕程志学李鹏飞白瑞; 关键词：CDNA文库黑色素细胞毛色毛囊羊驼; 文献传递

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