国家高技术研究发展计划(2001AA215131)
- 作品数：25 被引量：107H指数：6
- 相关作者：李校堃肖春苟郭国庆沈伟哉付小兵更多>>
- 相关机构：暨南大学内蒙古医学院韶关学院更多>>
- 发文基金：国家高技术研究发展计划国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学农业科学理学更多>>
- 改构型和野生型酸性成纤维细胞生长因子对肠缺血-再灌注损伤的保护作用及剂量-效应关系研究被引量：5
- 2005年
- 目的 评价改构型和野生型酸性成纤维细胞生长因子 (a FGF)对肠缺血再灌注损伤后肠道保护作用的机制及剂量效应关系。方法 以夹闭大鼠肠系膜上动脉 (SMA)制备肠缺血再灌注损伤模型 ,并将动物随机分为假手术组、生理盐水对照组、不同剂量 (2、4和 8μg)改构型 a FGF治疗组和 4 μg野生型 a FGF治疗组。除假手术组外 ,其余各组动物均于缺血 4 5 m in后再灌注 2、6、12和 2 4 h活杀 ,取血及小肠组织标本 ,检测血浆中 D乳酸含量及组织中增殖细胞核抗原 (PCNA )的表达特性 ,并检测肝、肾功能指标 ,观察不同剂量a FGF对肠缺血再灌注损伤的影响。结果 血浆 D乳酸变化及病理组织学观察显示 ,再灌注后 12 h肠屏障功能及肝、肾组织损伤最严重 ,而改构型 a FGF 4μg治疗组在伤后 2 4 h损伤较生理盐水对照组和野生型 a FGF治疗组有所减轻。PCNA的表达趋势与 D 乳酸类似。结论 改构型 a FGF对肠缺血再灌注损伤具有一定保护与促修复作用 ,其抗损伤修复作用呈剂量依赖性。
- 翁立新付小兵李秀霞孙同柱郑曙云陈伟黎君友
- 关键词：酸性成纤维细胞生长因子肠缺血-再灌注损伤剂量-效应AFGF器官功能D-乳酸
- 一种缺失核定位信号区的hbFGF的表达及纯化(英文)
- 2005年
- 目的:为了研究缺失核定位信号区的人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)独特的转运机制,在大肠杆菌BL21(DE3)中高效表达和纯化了缺失核定位信号区的hbFGF。方法:将PCR扩增得到的hbFGFcDNA片断克隆到表达载体pET3c中,重组质粒转化大肠杆菌BL21(DE3),IPTG诱导表达,通过离子交换和肝素亲和层析从菌体上清中纯化目标蛋白,MTT法检测促分裂活性。结果:hbFGF的表达量约为全菌体蛋白的20%,纯化的缺失核定位信号区的hbFGF的促分裂活性与缺失核定位信号区的hbFGF标准品相当。结论:BL21(DE3)/pET3c表达系统能高效表达缺失核定位信号区的hbFGF,纯化得到的hbFGF可用于进一步的研究。
- 吴晓萍苏志坚郑青吴思娴冯雅曲红艳许华李校堃
- 关键词：人碱性成纤维细胞生长因子核定位信号纯化
- 非促分裂型haFGF对小鼠脑缺血/再灌注损伤的保护作用被引量：5
- 2007年
- 目的研究非促分裂型人类aFGF(nm-haFGF)对脑缺血/再灌注损伤的保护作用及初步机制。方法采用跳台法和Y型电迷宫法,观察nm-haFGF对脑缺血/再灌注损伤小鼠学习记忆的影响;测定进入脑组织的依文思蓝的多少,观察nm-haFGF对脑缺血/再灌注损伤小鼠血脑屏障损伤修复程度的影响;测定实验小鼠脑组织中NO含量,观察nm-haF-GF对脑缺血/再灌注损伤小鼠脑组织生化指标的影响。结果nm-haFGF能提高脑缺血/再灌注损伤小鼠的学习记忆功能,降低其脑组织依文思蓝和NO的含量。结论nm-haFGF可改善脑缺血/再灌注损伤小鼠的学习记忆功能,改善和减轻血脑屏障损伤程度,降低脑缺血/再灌注损伤引起的NO增高,对脑血管、脑神经组织具有保护效应。
- 谭毓治蔡飒李校堃刘峰胡华良
- 关键词：脑缺血保护作用学习记忆NO
- Mrh-aFGF对帕金森病大鼠黑质神经元的保护
- 2010年
- 目的探讨重组人改构体酸性成纤维细胞生长因子(Mrh-aFGF)对帕金森病(PD)大鼠黑质神经元病变的影响。方法 SD大鼠72只,随机分为4组:对照组、PD组、生理盐水(NS)处理组、Mrh-aFGF处理组,每组18只。6-OHDA分别注入左侧黑质和腹侧被盖区后建立PD大鼠模型,侧脑室内注射Mrh-aFGF,用阿扑吗啡诱导旋转行为;Nissl染色法观察大鼠黑质神经元病理学改变;电子显微镜观察黑质神经元超微结构的变化。结果对照组均未出现旋转行为;PD组术后旋转速度逐渐加快;NS处理组旋转行为未见明显改善;Mrh-aFGF处理组旋转速度明显减慢(P<0.05);PD组及NS处理组大鼠损毁侧黑质神经元数目较健侧显著减少(P<0.05);Mrh-aFGF处理组术后1周、2周、4周损毁侧神经元数目均较PD组及NS处理组明显增加(P<0.05);PD组大鼠黑质神经元超微结构明显受损,出现核固缩,线粒体肿胀、嵴消失,粗面内质网扩张、脱颗粒,以及突触前后膜肿胀,突触间隙消失,Mrh-aFGF处理组黑质神经元超微结构有明显改善。结论 Mrh-aFGF能改善PD大鼠的旋转行为,减少PD大鼠黑质神经元的丢失,并改善其黑质神经元的超微结构。
- 肖春苟沈伟哉郭国庆李校堃
- 关键词：帕金森病黑质超微结构
- 减少寡聚体形成的重组人碱性成纤维细胞生长因子的改造被引量：1
- 2005年
- 采用PCR突变技术改造人碱性成纤维细胞生长因子(hbFGF)cDNA,将扩增的cDNA片断插入表达载体pET3c的表达框架中,构建了表达菌株BL21(DE3)/pET3c-[Ser69,87]hbFGF,用IPTG诱导表达,其[Ser69,87]hbFGF的表达量占菌体总蛋白30％。通过离子交换、肝素亲和两步层析的方法获得了纯度达98％的[Ser69,87]hbFGF样品。用MTT法测得纯化的[Ser69,87]hbFGF样品与野生型hbFGF促Balb／c 3T3细胞增殖的比活性相当。以野生型hbFGF作对照,分析反复冻融对突变体[Ser69,87]hbFGF形成寡聚体的影响,并在25℃和37℃的条件下分析其寡聚体的形成情况。结果表明,不管是反复冻融还是在25℃和37℃的条件下,突变体[Ser69,87]hbFGF形成的寡聚体都较野生型hbFGF明显减少。
- 冯辉李校堃吴晓萍苏志坚郑青黄亚东
- 关键词：寡聚体重组人碱性成纤维细胞生长因子PCR突变体蛋白质家族
- 重组人改构体酸性成纤维细胞生长因子对帕金森病大鼠中脑腹侧被盖区酪氨酸羟化酶神经元的保护被引量：2
- 2010年
- 目的：探讨重组人改构体酸性成纤维细胞生长因子（Mrh-aFGF）对帕金森病（PD）大鼠旋转行为和中脑腹侧被盖区酪氨酸羟化酶（TH）免疫阳性神经元的影响.方法：6-羟基多巴胺（6-OHDA）分别注入黑质和腹侧被盖区后建立PD大鼠模型,侧脑室内注射Mrh-aFGF,用阿扑吗啡诱导旋转行为,免疫组织化学显色观察TH免疫阳性神经元和纤维,并进行定量分析.结果：PD组术后旋转启动时间缩短,持续时间延长,速度加快;Mrh-aFGF处理组旋转行为有改善.各组大鼠组内健侧和损毁侧阳性神经元比较,对照组损毁侧无明显改变;PD组、NS处理组和Mrh-aFGF处理组损毁侧阳性神经元与健侧比较均减少.Mrh-aFGF处理组损毁侧中脑腹侧被盖区阳性神经元数量较PD组及对照组增加.结论：Mrh-aFGF能减少PD大鼠中脑腹侧被盖区TH免疫阳性神经元的丢失,并改善其旋转行为.
- 肖春苟沈伟哉郭国庆李校堃
- 关键词：帕金森病酪氨酸羟化酶中脑腹侧被盖区免疫组织化学
- 神经营养因子对帕金森病的治疗作用被引量：2
- 2005年
- 肖春苟沈琦郭国庆龙大宏
- 关键词：帕金森病神经营养因子中枢神经系统变性疾病能神经元递质系统神经环路
- 改构型和野生型aFGF对肠缺血-再灌注损伤后肝肾功能的影响被引量：21
- 2004年
- 目的 观察肠缺血再灌注损伤后的肝、肾功能的变化 ,并探讨不同类型酸性成纤维细胞生长因子 (a FGF)对肠缺血再灌注损伤后的肝、肾功能的保护作用。方法 将 78只 Wistar大鼠分成假手术组 (C)、生理盐水治疗组 (R)、改构型 a FGF治疗组 (rh F)和野生型 a FGF治疗组 (wt F) ,后 3组根据再灌注时间又分为 2、6、12和 2 4 h4个时间点。阻断肠系膜上动脉 4 5 m in后松夹制备肠缺血再灌注模型。于不同时间点腹主动脉抽血 5 ml,检测肝、肾功能的变化。结果 与 C组比较 ,R组、rh F组和 wt F组肝、肾功能都有明显下降 ,以 R组下降更明显 ,rh F组次之 ,wt F组肝、肾功能恢复得最好。组织病理学检查发现 ,3组动物均有小肠绒毛脱落、黏膜下层炎细胞浸润等改变 ,其严重程度与肝、肾功能指标水平一致。结论 肠缺血再灌注损伤导致多脏器功能损伤 ,野生型、改构型 a FGF对脏器功能有明显的保护作用。
- 翁立新付小兵李秀霞孙同柱郑曙云陈伟
- 关键词：缺血-再灌注损伤肾功能酸性成纤维细胞生长因子
- 重组人改构体酸性成纤维细胞生长因子减少帕金森病大鼠黑质酪氨酸羟化酶免疫阳性神经元丢失被引量：1
- 2007年
- 目的探讨重组人改构体酸性成纤维细胞生长因子(Mrh-aFGF)对帕金森病(PD)大鼠旋转行为和酪氨酸羟化酶(TH)免疫阳性神经元的影响。方法6-OHDA分别注入黑质和腹侧被盖区后建立PD大鼠模型,侧脑室内注射Mrh-aFGF,用阿扑吗啡诱导旋转行为,免疫细胞化学染色观察TH免疫阳性神经元和纤维,并进行定量分析。结果对照组均未引出旋转行为;PD组术后旋转启动时间缩短,持续时间延长,速度加快;生理盐水(NS)处理组旋转行为未见明显改善;Mrh-aFGF处理组旋转启动时间延长,持续时间缩短,速度减慢(P<0.01)。各组大鼠健侧黑质TH阳性神经元的数量维持在相近的水平。同组内健侧和损毁侧阳性神经元比较,对照组损毁侧无明显改变;PD组、NS处理组和Mrh-aFGF处理组损毁侧阳性神经元与健侧比较均明显减少(P<0.01)。其中PD组损毁侧黑质TH免疫阳性神经元数量随时间延长逐渐减少(P<0.01)。NS处理组损毁侧黑质TH免疫阳性神经元的变化与PD组相似;Mrh-aFGF处理组损毁侧黑质阳性神经元较PD组及NS处理组有明显改善,阳性神经元的数量明显增加(P<0.01)。结论Mrh-aFGF能减少PD大鼠黑质TH免疫阳性神经元的丢失,并改善其旋转行为。
- 郭国庆肖春苟王辉沈伟哉原林钟世镇
- 关键词：帕金森病酪氨酸羟化酶黑质免疫细胞化学
- 非促有丝分裂型人酸性成纤维细胞生长因子对细胞增殖活性的影响被引量：3
- 2005年
- 目的研究观察人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)和N端缺失27个氨基酸残基的非促分裂人酸性成纤维细胞生长因子(non-mitogenetichumanacidicfibroblastgrowthfactor,nm-haFGF)对鼻咽癌细胞及血管内皮细胞增殖活性的影响。方法用不同浓度(0.01～100ng/ml)的人酸性成纤维细胞生长因子(haFGF)及nm-haFGF分别刺激鼻咽癌细胞及血管内皮细胞,作用48h后采用MTT法测定haFGF和nm-haFGF对两种细胞的增殖活性。结果在各浓度(>0.01ng/ml)下,nm-haFGF组对鼻咽癌细胞(除浓度为50ng/ml外)和血管内皮细胞的促增殖作用都显著低于haFGF组。结论nm-haFGF对鼻咽癌细胞及血管内皮细胞的促分裂活性下降。
- 郭钦丽汪小凤孟娟郑青
- 关键词：人酸性成纤维细胞生长因子有丝分裂鼻咽癌细胞促增殖作用MTT法
