广东省科技计划工业攻关项目(2009B0130801363)
- 作品数：1 被引量：2H指数：1
- 相关作者：谭丽华高庆春高聪袁芳梁兵更多>>
- 相关机构：广州医学院第二附属医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目博士科研启动基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：生物学更多>>
- 真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL,pIRES2-EGFP/CD的构建和鉴定被引量：2
- 2011年
- 目的构建真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD,为研究其联合表达对恶性胶质瘤的联合治疗作用提供基础。方法将pCMV/CD质粒和pcDNA3.1(+)/TRAIL质粒行琼脂糖凝胶电泳检测,确定其完整性,并进行序列测定确定有无基因突变。pCMV/CD质粒用SacⅡ/XhoⅠ双酶切,pcDNA3.1(+)TRAIL质粒用BamHⅠ/XhoⅠ双酶切,将目的基因定向克隆到真核细胞表达载体pIRES2-EGFP中,转化E.coli DH5α感受态细胞,通过限制性内切酶双酶切、PCR及核酸序列分析等筛选、鉴定重组质粒。结果所构建的真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL经SacⅡ/XhoⅠ双酶切回收片段分别为1.0、5.2 kb;pIRES2-EGFP/CD经BamHⅠ/XhoⅠ双酶切回收片段分别为1.3、5.2 kb。PCR及测序证实,pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD质粒基因组中分别包含TRAIL和CD基因。结论成功构建了真核表达载体pIRES2-EGFP/TRAIL和pIRES2-EGFP/CD,为研究其联合表达对恶性胶质瘤的联合治疗作用奠定了基础。
- 梁兵袁芳殷建瑞谭丽华高庆春高聪
- 关键词：真核表达载体
