国家自然科学基金(30972079)
- 作品数：5 被引量：12H指数：2
- 相关作者：金梅孙丹郝晓敏张莉陆健更多>>
- 相关机构：辽宁师范大学中国农业科学院北京畜牧兽医研究所扬州大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家科技支撑计划辽宁省自然科学基金更多>>
- 相关领域：农业科学生物学理学更多>>
- 基因转运载体的原子力显微镜研究
- 2010年
- 通过原子力显微镜观测阳离子脂质体及其与DNA复合物的结构。将一定量的阳离子脂质体以及阳离子脂质体/DAN复合物滴加到新解理的云母片上,干燥后用原子力显微镜观测。结果表明,阳离子脂质体在云母片上形成的颗粒为球形或椭圆形,粒径分布较为均匀;阳离子脂质体/DNA复合物在云母片上的颗粒形状不规则,粒径分布不均且比空白脂质体的粒径大。通过原子力显微镜可以快速有效地观测脂质体以及脂质体/DNA复合物的粒径、表面形态等,为分析脂质体的物理化学性质与基因转运效率的关系提供了一种研究方法。
- 郝晓敏张树彪王冰崔韶晖赵轶男杨宝灵金梅
- 关键词：阳离子脂质体原子力显微镜
- 绵羊Myostatin基因敲除载体的构建被引量：2
- 2011年
- 根据Myostatin基因突变可导致肌肉量激增而产生"双肌"表型的特点,构建绵羊Myostatin基因置换型敲除载体。利用LA-PCR技术成功地扩增得到绵羊Myostatin基因同源臂序列,其中同源长臂4.9 kb,包括全部的exon1,intron1,exon2及部分启动子和大部分intron2;同源短臂1.1 kb,包括部分exon3和3′非翻译区序列,将二者连入PloxpII正负筛选敲除骨架载体,利用骨架载体上Neo基因替代Myostatin基因的exon3,从而成功构建专门针对Myostatin第3外显子区域缺失的置换型敲除载体PloxpⅡ-OVIS-MSTN。酶切和测序鉴定证明载体构建正确,为后续获得绵羊Myostatin基因缺失型体细胞株奠定试验基础。
- 孙丹金梅杜立新魏彩虹张莉路国彬陆健吕延飞
- 关键词：绵羊MYOSTATIN基因基因敲除
- 辽宁绒山羊UMP/CMP激酶基因的表达及分析
- 2013年
- 在前期构建辽宁绒山羊皮肤cDNA文库的基础上,测通得到了新基因UMP/CMP激酶的全长序列,并对UMP/CMP激酶基因进行生物信息学分析。然后,通过RT-PCR检测该基因在心、肝、脾、肺及肾中的表达。生物信息学分析显示,UMP/CMP激酶基因全长1 081 bp,能够编码含有228个氨基酸的蛋白质,亮氨酸、甘氨酸、赖氨酸含量较高。UMP/CMP激酶含有较高比例的无规卷曲结构(51.75%),并发现其含有UMP/CMP激酶蛋白结构域。蛋白三级结构、进化树分析显示,辽宁绒山羊和牛的UMP/CMP激酶基因的同源性最高。UMP/CMP激酶基因存在跨膜结构域,并且存在信号肽剪切位点。该基因中有8个Ser,2个Thr,2个Tyr可能成为蛋白激酶磷酸化位点。RT-PCR检测显示,UMP/CMP激酶基因特异地表达于皮肤。这些研究结果为深入研究辽宁绒山羊的种质遗传特性奠定了基础。
- 金梅张亭亭王艳杰曲杨乐徐明李秀娜
- 关键词：辽宁绒山羊生物信息学分析
- Texel和乌珠穆沁绵羊妊娠中后期胎儿背最长肌中AKT基因的发育表达模式被引量：1
- 2012年
- 选择绵羊胎儿期骨骼肌中表达稳定性高的内参基因,探讨AKT基因在绵羊妊娠中后期背最长肌中的发育性表达模式。以Texel和乌珠穆沁绵羊为研究对象,采用荧光定量PCR技术检测SDHC、YWHAB、RPLPO、RPS18、B2M 5个内参基因的mR-NA表达水平,同时检测AKT基因mRNA丰度在其胎儿期70、85、100、120和135 d间的表达变化,并分析其在品种间和不同生长阶段间的表达差异及其对肌肉生长发育的影响。5个内参基因的定量结果经GeNorm程序统计学分析处理,表达稳定性由高到低排序为RPS18>RPLPO>SDHC>B2M>YWHAB,确定用RPLPO、RPS18和SDHC 3个基因校正绵羊胎儿期不同生长阶段的目的基因表达量。在5个发育阶段中,两个品种绵羊胎儿AKT基因表达模式有一定差异,AKT表达量在Texel绵羊85和120 d时均有明显的增加,而在乌珠穆沁绵羊的100 d时出现1个表达峰,这与试验对两品种绵羊组织学分析的结果是一致的,进一步印证了Texel绵羊在85和120 d以及乌珠穆沁绵羊在100 d时存在肌发生波的推测。以上结果初步揭示绵羊妊娠中后期生长发育过程中AKT基因表达的发育性变化模式和品种差异,为深入研究AKT基因的作用机制提供了理论基础。
- 张小宁陆健任航行魏彩虹张莉赵福平杜立新
- 关键词：AKT基因内参基因
- 绒山羊KAP基因与遗传育种关系的研究进展被引量：9
- 2010年
- 角蛋白关联蛋白(Keratin-assoc iated prote in,KAP)是绒毛的主要结构蛋白之一,它和角蛋白(Keratin)决定了绒毛的基本特性。近年来,许多研究发现KAP遗传多样性与绒山羊经济性状(绒细度、体重)等具有显著相关性。介绍了绒山羊毛囊KAP组成以及基因遗传多态性与绒山羊产绒性状的关系及研究进展。
- 汪玲袁嵩雪邢梦欣郝晓敏孙丹张旭金梅
- 关键词：KAP遗传育种绒山羊
