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骨髓间充质干细胞复合Ⅱ型胶原修复关节软骨缺损的组织学观察被引量：2: 2008年; 目的观察向软骨方向诱导分化的自体骨髓间充质干细胞（BMSCs）复合Ⅱ型胶原修复兔关节软骨缺损的质量。方法扫描电镜观察Ⅱ型胶原结构。24只新西兰大白兔体外分离BMSCs，进行原代、传代培养，倒置显微镜观察。取第3代BMSCs，软骨诱导培养液培养14d，调整细胞浓度为5×10^6／ml，与Ⅱ型胶原复合培养1周备用，并观察细胞在支架材料中的生长情况。于膝关节股骨滑车处制作一个直径为4mm的圆柱形软骨缺损区，右侧植入复合培养1周的自体BMSCs和Ⅱ型胶原组织（实验组）；左侧单纯植入Ⅱ型胶原（胶原对照组）；另取12只，左右侧均不植入任何材料（空白对照组）。术后2，4，8，12周取材，大体和组织学观察检测修复软骨的质量。结果Ⅱ型胶原呈网架状结构，孔隙大小在40～300μm之间，BMSCs在其中生长良好，软骨基质大量形成。实验组修复的关节面光亮、平整，镜下表现为透明样软骨，软骨细胞排列规律，与宿主软骨整合好；胶原对照组以纤维组织修复为主，与宿主软骨整合差；空白对照组未能修复软骨缺损。组织学评分实验组明显优于两对照组（P〈0．05）。结论自体BMSCs复合Ⅱ型胶原修复软骨缺损质量好，长期疗效需要进一步的观察。; 王健张伟孙占胜李涛; 关键词：骨髓间充质干细胞胶原

胶原支架复合兔骨髓间充质干细胞体外模拟的微重力培养被引量：6: 2010年; 背景:骨髓间充质干细胞向软骨细胞诱导的方法包括体外高密度微团培养、体外单层细胞培养、体外三维支架环境诱导、与软骨细胞体外共培养诱导和基因转染诱导培养等。目的:验证模拟微重力条件下诱导后的兔骨髓间充质干细胞在Ⅰ、Ⅱ型胶原支架上黏附、伸展和增殖情况。方法:对兔骨髓间充质干细胞体外进行原代和传代培养,按加入诱导条件不同分为2组:实验组(转化生长因子β1+胰岛素样生长因子1诱导)组、空白对照组。3周后分别作MTT比色试验、糖胺聚糖检测和免疫组织化学染色。将诱导后的实验组细胞分别种植于Ⅰ、Ⅱ型胶原支架,分为4组培养:复合Ⅱ型胶原支架静置培养、复合Ⅱ型胶原支架模拟微重力培养组、复合Ⅰ型胶原支架静置培养、复合Ⅰ型胶原支架模拟微重力培养组,1周后作苏木精-伊红、甲苯胺蓝染色。结果与结论:实验组MTT吸光度值和糖胺聚糖水平检测结果均大于空白对照组,且Ⅱ型胶原免疫组织化学检测阳性。苏木精-伊红、甲苯胺蓝染色显示,Ⅱ型胶原支架复合细胞的数量明显高于Ⅰ型胶原支架;模拟微重力培养条件下胶原支架复合细胞的数量明显高于静置培养组。结果说明微重力培养环境有利于高密度细胞的黏附、增殖,有利于细胞之间的信号传递,为维系细胞的生长和代谢提供适宜的微环境;作为诱导后骨髓间充质干细胞的支架材料Ⅱ型胶原支架优于Ⅰ型胶原。; 陈辉李斌王健李涛张伟林涛杨光满振涛; 关键词：骨髓间充质干细胞胰岛素样生长因子1 模拟微重力

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山东省科技攻关计划(2006GG2302049)

文献类型

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机构

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