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角膜基质细胞诱导分化的脂肪间充质干细胞羊膜片移植治疗兔角膜碱烧伤的疗效及其机制被引量：13: 2015年; 背景角膜化学烧伤是致盲眼病之一，先前的各种疗法在临床上的应用均受到一定的限制，而脂肪间充质干细胞（ADSCs）移植疗法受到密切关注。目的观察诱导分化的ADSCs羊膜片移植治疗兔角膜碱烧伤的疗效及其机制。方法无菌条件下剪取兔角膜，用悬浮基质片法分离并培养兔角膜基质细胞（CSCs）。取兔腹股沟脂肪组织，以酶消化法（质量分数0．25％胰蛋白酶）分离及培养兔ADSCs，并用流式细胞术鉴定ADSCs表面抗原的表达。将CSCs与ADSCs共培养，采用免疫荧光技术和逆转录PCR（RT-PCR）鉴定CSCs诱导后ADSCs向角膜基质样细胞分化的表达，分别将诱导或未诱导的ADSCs种植于羊膜上制备成细胞羊膜片。选择60只新西兰白兔，右眼用浸有质量分数1％NaOH的滤纸贴敷于角膜中央50S制备兔角膜碱烧伤模型，按随机数字表法将模型眼随机分为诱导ADSCs＋羊膜移植组、未诱导ADSCs＋羊膜移植组、单纯羊膜移植组及模型组。分别于术后1周、2周和1个月在裂隙灯显微镜下观察各组兔模型眼角膜的混浊程度和新生血管形成情况，并对角膜炎症进行评分，采用ELISA法检测术后1个月角膜组织匀浆中CD45、叮干扰素（IFN-γ）、白细胞介素．10（IL-10）蛋白及房水中血管内皮生长因子（VEGF）蛋白的质量浓度。结果从脂肪组织分离培养的ADSCs表面抗原CDl05、CD29、CD44的阳性表达率分别为90．23％、88．56％、98．88％；分离培养的CSCs波形蛋白呈阳性表达；CSCs与ADSCs共培养后多数细胞双标记染色阳性。苏木精一伊红染色显示，ADSCs种植于羊膜后生长良好。术后1个月，模型组角膜混浊呈瓷白色，新生血管面积最大，而诱导ADSCs＋羊膜移植组角膜透明，新生血管最少。术后1个月，诱导ADSCs＋羊膜移植组、未诱导ADSCs＋羊膜移植组、单纯羊膜移植组和模型组兔角膜混浊程度评分分别为1．65±; 李颖杨磊宋艳萍丁琴陈中山陈晓; 关键词：脂肪间充质干细胞羊膜眼碱烧伤分化角膜基质细胞

兔脂肪间充质干细胞移植治疗眼表损伤的疗效观察被引量：1: 2014年; 目的观察兔脂肪间充质干细胞移植治疗眼表损伤的疗效。方法体外培养获得兔脂肪间充质干细胞,以羊膜为载体将其移植于兔角膜碱烧伤模型,以单纯羊膜移植为对照。术后1、2、4、8周进行角膜混浊程度、荧光素染色、新生血管形成情况的评分,计算新生血管面积。结果除术后1周、2周角膜混浊程度评分及术后1周荧光素染色评分两组之间无差异外,其它各检测时点实验组角膜混浊程度、新生血管形成及荧光素染色评分在治疗前后的变化量均大于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。实验组角膜新生血管面积在各检测时点均小于对照组,差异均有统计学意义(均P<0.05)。结论兔脂肪间充质干细胞移植治疗碱烧伤模型的眼表损伤有较好疗效。; 李颖王柏川杨磊; 关键词：脂肪间充质干细胞眼表损伤羊膜

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湖北省自然科学基金(2011CDB025)

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