“十一五”国家科技支撑计划(2006BAD05A17)
- 作品数：10 被引量：69H指数：5
- 相关作者：马美湖刘丽莉孙宝忠周艳华李涛更多>>
- 相关机构：华中农业大学河南科技大学中国农业科学院北京畜牧兽医研究所更多>>
- 发文基金：“十一五”国家科技支撑计划引进国际先进农业科技计划江苏省普通高校研究生科研创新计划项目更多>>
- 相关领域：轻工技术与工程农业科学化学工程更多>>
- Bacillus cereus胞外胶原蛋白酶水解牛骨胶原蛋白的动力学被引量：1
- 2012年
- 针对从细菌蜡样芽孢杆菌(Bacillus cereus)MBL13中提取得到的胶原蛋白酶酶解牛骨胶原蛋白的动力学性质进行研究。考察底物质量浓度、时间、温度、酶质量浓度、pH值5个因素对酶解水解度的影响,优化酶解的条件;并对酶解过程的动力学进行分析。结果表明:最佳的酶解工艺参数为底物质量浓度30g/L、时间6h、温度45℃、初始酶液质量浓度为0.35g/100mL、pH8.0。在此基础上推导出酶解动力学方程为:V=9.3633[S]/(114.785+[S])。并在波长230nm和570nm处对酶解过程动态变化进行测定,表明胶原多肽含量不断增加的动态变化。
- 刘丽莉杨协力任广跃段续
- 关键词：胶原蛋白酶胶原多肽动力学
- 胶原蛋白酶产生菌的筛选及酶的分离纯化被引量：16
- 2010年
- 从堆积骨骼的土样中筛选出高产胶原蛋白酶的MBL13菌株,经鉴定为蜡样芽孢杆菌Bacillus cereus。对其所产的胶原蛋白酶BCC进行分离纯化,并进行酶学性质的研究。从菌株的发酵液中纯化出分子量约为38.0kDaBCC酶。酶反应的最适温度为40℃,最适pH为8.0。在50℃以下稳定,60℃保温1h酶活仅保留10%;在pH7.0～8.5活性较稳定;金属离子Ca2+、Zn2+、Mg2+对酶有激活作用,金属离子Cu2+对酶有显著的抑制作用。EDTA和EGTA能抑制该酶,表明BCC酶为一种金属蛋白酶。酶的底物特异性表明该酶为骨胶原蛋白酶,且对Ⅰ型骨胶原蛋白水解能力极显著高于Ⅱ型胶原蛋白和Ⅲ型胶原蛋白。将纯化的BCC酶应用于骨胶原蛋白的水解可以得到不同链长的多肽,其水解能力高于标准品胶原酶Ⅰ型。本研究为工业酶提供了新的菌株和新型胶原蛋白酶,为胶原蛋白酶的开发提供了重要的理论依据。
- 刘丽莉马美湖余秀芳王文涛
- 关键词：胶原蛋白酶纯化
- 4种常用蛋白酶对牛骨蛋白的酶解动力学研究被引量：20
- 2010年
- 对碱性蛋白酶、中性蛋白酶、胃蛋白酶、胰蛋白酶水解牛骨蛋白的动力学特征进行较为系统的研究。以酶解初速度为评价指标,得到了4种酶的最佳反应温度与pH值,其中碱性蛋白酶最佳温度为55℃,pH11.7;中性蛋白酶最佳温度为45℃,pH7.3;胃蛋白酶最佳温度为30℃,pH1.5;胰蛋白酶最佳温度为55℃,pH9.3。4种蛋白酶按Km值排序从小到大依次是:胃蛋白酶<胰蛋白酶<碱性蛋白酶<中性蛋白酶;Vmax从大到小依次是:胃蛋白酶>碱性蛋白酶>胰蛋白酶>中性蛋白酶。
- 蔡丽华马美湖
- 关键词：骨蛋白蛋白酶动力学
- 利用鸡蛋壳中碳酸钙制备高纯度乙酸钙的工艺条件优化被引量：4
- 2010年
- 利用鸡蛋壳粉与乙酸溶液直接反应,制取产品乙酸钙。采用四因素二次通用旋转组合试验设计得出乙酸与蛋壳粉反应的回归方程,探讨各因素间的相互作用,并对有交互作用的乙酸浓度和反应温度、乙酸浓度和反应时间与乙酸钙产率的关系进行响应面分析,得出蛋壳粉与乙酸反应的最佳条件为乙酸浓度6mol/L、反应温度79.38℃、反应时间5.98h、料液比1:5,实际产率98.48%。通过正交试验优化除镁工艺,最佳工艺参数为温度65℃、时间15min、CaO添加量0.5g,除杂后纯度达99.79%,X-射线衍射对产品进行鉴定,确定为乙酸钙。
- 李彦坡马美湖李逢振陈亚泉
- 关键词：综合利用蛋品加工
- 复合酶解可溶性蛋膜蛋白制备多肽的工艺优化被引量：5
- 2010年
- 为研究蛋膜蛋白的利用,采用碱性蛋白酶、木瓜蛋白酶、胰蛋白酶、中性蛋白酶及胃蛋白酶进行单一酶解筛选实验,然后进行复合酶解实验。采用二次正交旋转组合设计,以水解度、氮收率为指标,研究酶制剂种类、加酶方式、复合酶比例、总加酶量、酶解时间、pH值及温度对制备多肽工艺的影响。综合考虑水解度和氮收率因素,最终确定复合酶解可溶性蛋膜蛋白制备多肽的最佳工艺条件为:总加酶量16000U/g,并以碱性蛋白酶与木瓜蛋白酶的酶活力配比为8:2先后加入;酶解时间为碱性蛋白酶2h、木瓜蛋白酶1h;pH值为碱性蛋白酶9.0、木瓜蛋白酶5.5;酶解温度为50℃。该条件下制备的蛋膜蛋白酶解产物水解度和氮收率分别为46.12%、85.56%。
- 周艳华马美湖蔡朝霞李涛李凤玲
- 关键词：复合酶解多肽二次回归正交旋转组合设计
- 微生物发酵牛骨粗胶原蛋白制备胶原多肽被引量：3
- 2013年
- 将筛选的安全无毒高产胶原蛋白酶的蜡状芽孢杆菌用于牛骨粗胶原蛋白发酵制备牛骨胶原多肽,结果表明该菌株发酵能显著提高牛骨粗胶原蛋白溶液中游离氨基酸的含量,以水解度和胶原多肽的含量为指标,针对影响发酵的五因素(接种量、pH、牛骨粗胶原蛋白的添加量、发酵温度和发酵时间),在单因素实验确定了较优化的参数范围的基础上,经响应面分析法确定了最佳发酵条件为:接种量1%,pH值6.0,牛骨粗胶原蛋白添加量30.0 g/L,发酵温度27℃,发酵时间42 h,同时获得最大胶原多肽含量的实验值为5.54±0.09 mg/mL。
- 刘丽莉康怀彬任广跃段续
- 关键词：蜡状芽孢杆菌胶原多肽
- 液全蛋与杀菌液全蛋中微生物预测模型的建立被引量：10
- 2009年
- 采用预测微生物学的方法研究液全蛋和杀菌液全蛋分别在4、15、20、30、37℃贮存时微生物的生长规律,拟合S型曲线,建立微生物活菌总数随时间变化的一级模型。同时针对杀菌液全蛋建立最大生长速率(简称生长速率)与温度关系的二级模型,并对该模型进行实验验证。结果表明:除4℃不能拟合S型曲线外,其余温度条件下,液全蛋中微生物的生长能与Richards模型很好的拟合,杀菌液全蛋中微生物的生长能与Gompertz模型拟合。杀菌液全蛋的二级模型为U=0.00329[T-(-7.14)]该模型能很好的预测不同15～37℃温度下杀菌液全蛋微生物的生长速率。
- 孙波迟玉杰徐宁孙宝忠董世建李昱妲
- 关键词：预测微生物学数学模型
- 高压脉冲电场对蛋清单增李斯特菌的杀灭效果被引量：6
- 2009年
- 研究了高压脉冲电场(PEF)与温和热协同处理对蛋清中嗜冷菌——单增李斯特菌的杀灭效果。结果表明,当处理温度为15℃时,20、25、30和35 kV/cm电场强度作用400μs,每1 mL蛋清所含李斯特菌数分别降低了0.8、1.4、2.3和3.8个数量级。当处理温度升至55℃时,每1 mL蛋清总菌数分别降低了1.3、2.5、4.9和6.4个数量级。当处理温度为15℃,35 kV/cm作用100、200、300和400μs时,每1 mL蛋清总菌数分别下降了1.8、2.7、3.5和3.8个数量级,当处理温度升至55℃时,每1 mL蛋清总菌数分别降低了2.7、3.8、5.4和6.4个数量级,表明温和热处理与PEF具有协同杀菌作用。PEF施加能量与杀菌效果呈一定的正相关性,PEF施加能量越大,杀菌效果越好。
- 赵伟杨瑞金崔倩
- 关键词：高压脉冲电场蛋清李斯特菌杀菌
- 臭氧水清洗蛋壳对液态蛋微生物指标的影响被引量：3
- 2008年
- 将臭氧杀菌技术应用于液态蛋加工中蛋壳的清洗工序,以替代传统的次氯酸钠对蛋壳进行清洗消毒,研究臭氧水对微生物的杀灭效果以及在液态蛋加工中使用不同浓度的臭氧水处理蛋壳对贮藏期内液态蛋微生物指标的影响。试验结果发现,当臭氧水浓度达到6mg/L时,对李斯特菌、金黄色葡萄球菌和沙门菌的杀菌率分别为99.56%、97.20%、98.76%;臭氧水能有效地降低液态蛋在贮藏期(4℃条件下密封)内微生物的数量,减小了由于沙门菌污染液态蛋的风险;随着臭氧水浓度的增加,对液态蛋中微生物的杀菌效果越好,且臭氧水的杀菌效力明显高于传统的次氯酸钠杀菌。
- 刘彭孙宝忠张佳程张松山李海鹏种京华
- 关键词：臭氧水
- 蛋膜蛋白光谱分析及其酶解液抗氧化性研究被引量：2
- 2009年
- 对实验制得的可溶性蛋膜蛋白进行光谱分析。由紫外扫描及FI-IR红外光谱分析可初步断定,蛋膜蛋白中主要成分为Ⅰ型胶原,且较大程度地保留了其三股螺旋结构。采用不同的酶制剂对蛋膜蛋白溶液进行酶解并得相应的酶解液,并采用电脑化学发光仪测定了蛋膜蛋白及其酶解液清除超氧阴离子自由基的能力。结果表明,蛋膜蛋白及其酶解液均具有较好的超氧阴离子清除能力,且胰蛋白酶酶解液的IC50最小,为0.270mg/ml。
- 周艳华马美湖蔡朝霞李涛
- 关键词：光谱分析酶解化学发光法体外抗氧化活性
