兰州军区医药卫生科研基金(LXH99-11)
- 作品数:1 被引量:4H指数:1
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- 烟草节杆菌02181肌酸酶的纯化及理化特性被引量:4
- 2006年
- 采用DEAE-纤维素和羟基磷灰石层析联合使用的纯化程序,从烟草节杆菌02181株提取纯化了肌酸酶.比活性由0.92 U/m g上升至124.44 U/m g,酶被提纯了135.26倍,在非变性聚丙烯酰胺凝胶电泳上呈单一区带,最终收率达52.95%.特性研究显示此酶的相对分子量为84500,等电点为4.80,在磷酸盐缓冲体系中,最适pH为6.50,pH 7.00环境下耐受性最好,最适温度为35℃,米氏常数(Km)为46.50 mm ol/L,最大反应速度(Vm ax)为8.20μm ol/m in.Cu2+、SDS可使酶完全失活,Hg2+、Cd2+、Zn2+和Fe3+明显抑制酶活性,M g2+、M n2+、B rij 35、T riton X-100和邻菲饶啉对酶活性有一定的抑制作用,EDTA对酶活性无明显影响,而Ca2+和N aN3对酶有一定的激活作用.络合剂邻菲饶啉和EDTA对酶活性的抑制试验表明此酶属于金属酶类.
- 罗侃崔有宏曾志南徐东贺燕鸿
- 关键词:肌酸酶纯化