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焦磷酸测序法检测结直肠癌患者K—ras基因外显子2第12和13密码子点突变被引量：2: 2012年; 目的探讨焦磷酸测序法检测结直肠癌患者肿瘤组织K．ras基因外显子2第12和13密码子点突变方法的临床应用价值。方法以已知K—ras基因突变的结直肠癌细胞株SW480、DLD-1和野生型细胞株HT．29DNA作为测序模板检验焦磷酸测序法的准确性。对含不同比例（2％、3％、5％、10％、20％、30％和50％）结直肠癌细胞株K．ras基因的DNA混合样本采用焦磷酸测序法进行基因突变率检测，并与Sanger测序结果平行进行Fisher精确检验比较，评价其灵敏度。同时用焦磷酸测序法检测分析30份临床结直肠癌患者石蜡包埋组织中K—ras基因第12和13密码子突变。结果当混合已知突变类型的结直肠癌细胞株K—ras基因的DNA样本突变DNA比例在5％和10％浓度时，Sanger测序法检出K—ras基因突变率分别为33．3％（4／12）和58．3％（7／12），焦磷酸测序法分别为91．7％（11／12）和100％（12／12），且2种方法检出K—ras基因突变率的差异有统计学意义（P〈0．05）。此外，用焦磷酸测序法从30例结直肠癌患者石蜡包埋组织标本中检出K—ra$基因外显子2第12和13密码子突变10例，均为杂合型突变，突变率为33．3％（10／30）。最常见的突变类型为G〉A转换[50％（5／10）]和G〉T颠换[（30％（3／10）]。结论焦磷酸测序法检测结直肠癌K—ras基因外显子2第12和13密码子突变具有敏感、准确的优点，可用于临床个体化治疗中肿瘤基因突变检测。（中华检验医学杂志．2012，35：585-592、; 谢国化姚晓虹吴萍沈立松; 关键词：结直肠肿瘤外显子突变

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国家自然科学基金(81101848)

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