国家高技术研究发展计划(102090204)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
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- 抗肿瘤血管三结构域单链抗体V_H/L的构建与表达被引量：5
- 2001年
- 以本室研制的一株抗肿瘤血管单克隆抗体AA98为基础 ,采用PCR扩增抗体AA98基因的重链可变区(VH)和轻链 (L) ,以重链恒定区 1(CH1) 5′端 12个氨基酸的序列作为连接肽 ,并将连接肽中的Lys突变为Ser,构建VH 连接肽 L三结构域单链抗体。重组VH/L单链抗体在大肠杆菌中得到了高效表达 ,其表达量占菌体总蛋白质的 2 0 %。表达的蛋白质在菌内形成包含体 ,经凝胶过滤法复性 ,获得了有抗原结合活性的VH/L。该三结构域单链抗体的成功构建和复性 ,为重组抗体片段的研制提供了借鉴。
- 吴小平杨东玲张志强阎锡蕴
- 关键词：复性
- 一种新型肿瘤血管抗体Fab的基因克隆与表达被引量：5
- 2000年
- 鼠单克隆抗体AA98是我室研制的一株新型抗肿瘤血管抗体 ,体内实验证明它可以抑制血管生成 ,抑制肿瘤生长。从分泌抗体AA98的杂交瘤细胞中提取总RNA ,采用逆转录 PCR(RT PCR)分别扩增重链Fd及轻链κ,并进行序列测定。将Fd和κ链依次与噬菌粒 pComb3H连接 ,构建pComb3H AA98Fab表达载体。在大肠杆菌中表达了AA98Fab。免疫印迹表明该Fab片段识别分子量为 10 0kD的蛋白 ,具有原抗体AA98的抗原特异性。AA98Fab是研究抗体AA98作用机理的工具 ,也为制备重组免疫毒素 。
- 吴小平张志强杨东玲阎锡蕴
- 关键词：肿瘤血管基因克隆
