国家自然科学基金(30571376)
- 作品数：2 被引量：6H指数：2
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- 猪瘟病毒衣壳蛋白靶向核酸酶表达系统的建立及鉴定
- 根据猪瘟病毒衣壳蛋白C基因序列设计一对引物,RT-PCR扩增获得编码猪瘟病毒衣壳蛋白的C基因片断,将其插入到含有葡萄球菌核酸酶SN基因的真核表达载体pcDNA-SN中,筛选获得重组质粒pcDNA-C-SN。脂质体转染猪肾...
- 周斌刘珂陈溥言
- 关键词：猪瘟病毒衣壳蛋白葡萄球菌核酸酶抗病毒感染
- 文献传递
- 整合猪瘟病毒囊膜蛋白的假型鼠白血病病毒感染性的研究被引量：3
- 2008年
- 通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增了猪瘟病毒(CSFV)的E0、E2和E012基因并进行了克隆与鉴定。构建了真核表达载体pcDNA-E0、pcDNA-E2和pcDNA-E012,通过与鼠白血病病毒(MuLV)假型病毒构建体系的两种质粒pHIT60和pHIT111瞬时共转染人胚肾细胞(293T),48h后收集假型病毒上清液,将假型病毒上清液超速离心后用抗CSFV的多抗进行Western-blot检测。结果证明E012蛋白能够在假型病毒颗粒表面表达,说明E012能够整合到此病毒粒子表面;用其感染多种宿主细胞,48h后检测发现在猪肾细胞(SK6,PK15)和猪睾丸细胞(ST)上,标记基因LacZ能有效表达,证实构建的CSFV假型病毒具有感染性。
- 周斌党占国刘珂陈溥言
- 关键词：囊膜蛋白鼠白血病病毒感染性
- 整合猪瘟病毒囊膜蛋白的假型鼠白血病病毒感染性的研究
- 通过反转录-聚合酶链式反应(RT-PCR)扩增了猪瘟病毒(CSFV)的EO、E2、E012基因并进行了克隆与鉴定,构建了真核表达载体pcDNA-E0,pcDNA-E2,pcDNA-E012,通过与鼠白血病病毒(MuLV)...
- 周斌党占国刘珂陈溥言
- 关键词：CSFV囊膜蛋白鼠白血病病毒假病毒感染性
- 文献传递
- 猪瘟病毒衣壳蛋白靶向核酸酶表达系统的建立及鉴定被引量：3
- 2008年
- 根据猪瘟病毒衣壳蛋白(C)基因序列设计一对引物,RT-PCR扩增获得编码猪瘟病毒衣壳蛋白的C基因,将其插入到含有葡萄球菌核酸酶(SN)基因的真核表达载体pcDNA-SN中,筛选获得重组质粒pcDNA-C-SN。脂质体转染猪肾细胞(PK-15),并经G418稳定筛选,通过RT-PCR、免疫印迹和间接免疫荧光鉴定表达的融合蛋白,体外DNA消化试验检测核酸酶活性。结果表明融合蛋白C-SN在PK-15细胞中获得了稳定表达,能够被兔抗猪瘟病毒衣壳蛋白多抗所识别,并具有良好的核酸酶活性,能够对DNA进行切割。同时,稳定表达融合蛋白C-SN的PK-15细胞系中能够有效抑制猪瘟野毒的增殖,使其感染性降低102～103倍。这些结果为进一步将衣壳蛋白靶向病毒灭活策略应用于抵抗猪瘟病毒感染奠定了基础。
- 周斌刘珂陈溥言
- 关键词：猪瘟病毒衣壳蛋白葡萄球菌核酸酶抗病毒感染
