江苏省卫生厅科研基金(JD200903)
- 作品数：1 被引量：0H指数：0
- 相关作者：黄健林乃祥李小宁更多>>
- 相关机构：苏州卫生职业技术学院更多>>
- 发文基金：江苏省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- RNAi下调人肺癌B7-H1基因对T细胞免疫学功能的影响
- 2013年
- 设计与鉴定负性协同刺激分子人B7-H1基因有效RNAi干扰位点,探讨RNAi阻断B7-H1分子表达对肺癌细胞株H1299生物学功能的影响。采用流式细胞术分析B7-H1基因在人细胞株H1299表面表达特性,应用生物信息学方法分析该基因并设计其RNAi干扰的探针序列,构建含有该干扰序列的重组腺病毒载体,转染细胞株,免疫荧光方法分析细胞表面B7-H1的表达变化,在此基础上,应用RNAi转染细胞和T细胞共培养体系分析B7-H1表达受抑后对T细胞效应的影响,CCK-8掺入法和ELISA法分析T细胞增殖和细胞因子产生的变化。与对照组相比,三个B7-H1RNA干扰序列对B7-H1分子的表达均有一定的抑制效应,其中217-245位干扰序列使细胞表面目的分子表达强度降为45.4%,734-762靶点组目的分子表达强度则降为51.3%,427-455序列对B7-H1分子表达的干扰效应最为显著,使其表达降至18.9%。T细胞功能研究结果显示,抑制效应较强的RNAi作用T细胞后对T细胞负性调控能力弱,细胞增殖能力和细胞因子产生比其他各组强(P<0.05)。人B7-H1基因427-455位进行RNAi干扰具有显著效果,可有效调节靶基因的表达和生物学功能。
- 黄健李小宁林乃祥
- 关键词：B7-H1H1299RNAI生物学功能
