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移植间充质干细胞在胶原诱导性关节炎大鼠关节的分布和作用: 2011年; 目的探讨移植人的异基因骨髓间充质干细胞（BM-MSCs）在类风湿关节炎（RA）动物模型胶原诱导性关节炎（CIA）大鼠炎症关节局部的转归以及对关节局部组织损伤的修复作用。方法分别选取5只Wistar幼年大鼠和30只Wistar成年雌性大鼠，5只Wistar幼年大鼠用以提取BM-MSCs，30只Wistar成年雌性大鼠随机分为CIA造模A组、B组和正常C组各10只。BM-MSCs分离、传代培养后用5一溴脲嘧啶脱氧核苷（5-BrdU）进行标记。CIA大鼠成功造模后，采取尾静脉注射移植于A组和C组大鼠，移植细胞数为1．Oxl0^7／kg。移植后1-4周观察各组动物一般状况和关节局部肿胀度的变化；于移植4周后用关节组织病理切片局部免疫组织化学抗5-BrdU和骨保护素的方法观察BM-MSCs向受体关节局部的趋化和聚集以及对关节组织中骨保护素表达的影响。2组间比较采用t检验。结果BM-MSCs移植后，受试动物关节肿胀开始消退[（200±350）m]，移植后2、3、4周时与未移植BM-MSCs的B组动物[（320±110）μ1]之间比较差异有统计学意义（P〈0，05）；在受者关节滑膜、血管内膜及软骨组织中均可见5-BrdU阳性细胞，滑膜组织处的平均灰度值CIA造模A组（85±9）低于正常C组（110±6），差异有统计学意义（P〈0．05）；BM-MSCs移植后CIA造模A组关节滑膜中骨保护素阳性率增加，平均灰度值为54-4，明显低于未移植的CIA造模B组（77±6），差异有统计学意义（P〈0．05）。结论通过外周静脉移植的BM-MSCs可以特异性趋化和聚集到炎症关节局部，并可以减轻关节损害，而这种局部组织损伤修复作用可能是通过增加局部炎症关节组织中骨保护素的含量而发挥的。; 马丽辉乔振华李小峰; 关键词：间质干细胞关节炎类风湿关节炎

异基因骨髓间充质干细胞对类风湿关节炎患者主要细胞因子分泌的影响: 2011年; 目的探讨在体外环境中，异基因骨髓间充质干细胞（Allo—BM—MSCs）对类风湿关节炎（RA）患者的白细胞介素（IL）-1、肿瘤坏死因子（TNF）-α和转化生长因子（TGF）-β，分泌的影响。方法采集健康供者的骨髓标本，经密度梯度离心分离、纯化获得其骨髓间充质干细胞（bMSCs），进行体外培养扩增。同时采集RA患者的外周血，分离单个核细胞。将来源于健康供者的bMSCs分别与来源于RA患者的单个核细胞和健康供者的单个核细胞在体外进行共培养，用酶联免疫吸附试验（ELISA）法检测bMSCs与淋巴细胞混合培养液中细胞因子IL-1、TNF-α和TGF—β1的变化。采用方差分析和相关性分析进行统计学分析。结果经bMSCs与RA淋巴细胞共培养7d后，培养液中IL-1浓度（6．2±1．0）ng/L和TNF—α浓度（4．6±1．2）ng／L低于单独RA组浓度（38．4±0．5）和（29．4±1．3）ng／L，差异均有统计学意义（P〈0．05）；但是单独正常淋巴细胞和bMSCs与正常淋巴细胞共培养后，培养液中IL-1浓度（4．4±1.3）和（4．4±1．1）ng／L及TNF-α浓度（5．3±1．7）和（5．0±1．7）ng／L之间比较差异均无统计学意义（P〉0．05）；经bMSCs与RA淋巴细胞共培养7d后，培养液中TGF—β1浓度（22.5±2．2）ng／L高于单独RA组（2．6±1．0）ng／L，差异有统计学意义（P〈0．05）；单独正常淋巴细胞和bMSCs与正常淋巴细胞共培养后，培养液中TGF—β1浓度（4．8±1．4）和（10．5±1．2）ng／L比较差异有统计学意义（P〈0．05）。IL-1与TNF-α呈正相关（r=0．896，P=0．000），TGF-β1与TNF-α呈负相关（r=-0．356，P=-0．019），TGF—β1与IL-1呈负相关（r=-0．380，P=0.000）。结论Allo—BM—MSCs在体外可以特异性调节RA患者细胞因子的分泌。bMSCs可能在RA发病和发展中起-定的作用，有希望用于RA治疗。; 马丽辉乔振华姚震罗静; 关键词：关节炎类风湿间质干细胞细胞因子

类风湿关节炎患者外周血T淋巴细胞亚群与临床相关性分析被引量：8: 2011年; 目的探讨类风湿关节炎（RA）患者外周血T细胞亚群的变化情况，了解其变化在RA发病及炎症活动中的意义。方法采用流式细胞仪荧光抗体标记法分别对197例RA患者的外周血淋巴细胞进行CD3／CD8／CD45／CD4及CD3／CD16＋56／CD45／CD19四色荧光抗体（B．D）标记，分析比较RA患者外周血淋巴细胞比例情况，并与RA疾病活动性评分（DAS28-4）、压痛关节数、肿胀关节数、晨僵时间、医生和患者对疼痛程度的视觉模糊评分（VAS）、血红细胞沉降率、C反应蛋白及血清学抗体行相关分析。结果RA患者外周血淋巴细胞中CD3＋CD19-CD3＋CD4＋和CD3＋CD8＋T细胞占总淋巴细胞的百分率分别为（71．06±12．07）％、（45．13±36．14）％和（26．56±9．54）％，RA患者CD3＋CD19-T细胞与DAS28-4、压痛关节数、肿胀关节数及患者VAS存在负相关（P〈0．05）。RA患者外周血CD3＋，CD4＋T）淋巴细胞与抗环瓜氨酸肽抗体呈明显负相关（r=-0．156，P=0．029），与抗角蛋白抗体、人抗核周因子抗体、类风湿因子无明显相关。合并肺间质病变组与未合并肺间质病变组T细胞和Ts细胞差异有统计学意义（Z=-2．159和-2．031，P=0．031和0．042），合并干燥综合征组与未合并干燥综合征组的免疫功能差异无统计学意义（P〉0．05）。结论RA患者外周血T淋巴细胞存在比例的失衡，T淋巴细胞数量的异常可能是RA发病及炎症活动的重要影响因素。; 薛丽巾王秦罗静马丽辉张少然吕志勤白洁李小峰; 关键词：T淋巴细胞

异基因骨髓间充质干细胞移植对类风湿关节炎大鼠血清IL-1、TNF-α、TGF-β1表达的影响被引量：3: 2011年; 目的探讨异基因骨髓间充质干细胞(BM-MSCs)移植对类风湿关节炎(RA)动物模型(CIA大鼠)血清中白细胞介素-1(IL-1)、肿瘤坏死因子(TNF-α)和转化生长因子(TGF-β1)表达的影响。方法分别选取5只Wistar幼年大鼠和20只Wistar成年雌性大鼠。5只Wistar幼年大鼠用以提取BM-MSCs,20只Wistar成年雌性大鼠经CIA造模成功后随机分为BM-MSCs移植A组和空白对照B组。BM-MSCs分离、传代培养后,通过CIA大鼠尾静脉注射移植于A组动物,BM-MSC移植数目为1.0×107/kg(受者体重)。于移植4周后用ELISA方法分别检测2组动物血清中IL-1、TNF-α和TGF-β1的含量。结果经BM-MSCs移植治疗4周后,BM-MSCs移植组血清中IL-1和TNF-α的浓度明显低于空白对照组,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。同时血清TGF-β1的浓度明显高于空白对照组,与空白对照组比较差异有统计学意义(P<0.05)。结论异基因BM-MSCs移植可以影响CIA大鼠血清中IL-1、TNF-α和TGF-β1的表达,对类风湿关节炎的免疫紊乱有调节作用,有可能用于RA的治疗。; 马丽辉乔振华李小峰刘志贞; 关键词：骨髓间充质干细胞类风湿关节炎

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山西省卫生厅科技攻关计划项目(200903)

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