上海市浦江人才计划项目(06PJ14081)
- 作品数：4 被引量：13H指数：3
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- 相关机构：上海海洋大学上海水产大学东京大学更多>>
- 发文基金：上海市浦江人才计划项目上海市科委国际合作基金更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程农业科学更多>>
- 鲢鱼骨骼肌轻酶解肌球蛋白基因的cDNA克隆被引量：3
- 2010年
- 通过RT-PCR法和3′-RACE法从冬季和夏季鲢鱼的骨骼肌中分离到两种肌球蛋白重链同工型基因,分别命名为低温型(sc-w)和高温型(sc-s)。两种同工型基因的cDNA序列包含了部分3′-翻译区和全部3′-非翻译区,编码了鲢鱼轻酶解肌球蛋白(light meromyosin,LMM)羧基端的一部分氨基酸序列。在终止密码子的上游和下游区域,两种同工型基因之间在核苷酸序列上显示了明显的差异,其序列同源性为79.5%,推断的氨基酸序列的同源性为88.1%。根据与草鱼和鲤鱼相关同工型氨基酸序列的比对结果,发现在15个氨基酸残基位点上鲢鱼低温型(sc-w)与草鱼10℃型(gc10)一致,但两者显示了与其它同工型不同的变异,并且其中的11个位点属高度保守性残基。这些结果似乎表明了基于低温驯化的淡水鱼表达的肌球蛋白重链同工型必须在它们的初级结构上发生某些氨基酸残基的变异才能有助于其适应低温的栖息环境,在蛋白质水平上则展现出完全不同于高温栖息鱼类的肌球蛋白功能和性质。另一方面,根据分子系统树的分析结果,表明了来自相似栖息环境温度的鱼的肌球蛋白重链之间具有更近的基因距离,进一步证明了环境温度对广温性淡水鱼肌球蛋白重链的基因歧化和功能进化的影响。
- 王玲军陶妍党静王孙勇
- 关键词：鲢鱼CDNA克隆
- 鲢鱼骨骼肌肌球蛋白重链基因的cDNA克隆与表达被引量：5
- 2010年
- 肌球蛋白分子含有2个约200kD的重链亚基和4个约20kD的轻链亚基，重链亚基由球状的头部（S1）和α-双螺旋的杆部（Rod）组成。在鱼类肌肉蛋白质的组成中，肌球蛋白约占肌原纤维蛋白的50％以上，并且其基因在生物进化过程中的变异性很大，以致肌原纤维蛋白性质的变化主要是由肌球蛋白的变化引起的。
- 党静陶妍王孙勇鲍其泠
- 关键词：鲢鱼肌球蛋白重链CDNA克隆RT-PCR
- 鲢肌球蛋白重链球状结构域的cDNA克隆及结构解析被引量：3
- 2010年
- 根据已经获得的两种鲢肌球蛋白重链同工型基因(低温型sc-w和高温型sc-s)在3′端展现的明显差异,设计了2个特异性的反向引物,以鲤科鱼类肌球蛋白重链5′端的保守序列为正向引物,通过Long-PCR对编码鲢两种肌球蛋白重链同工型的球状结构域(Subfragment-1,S1)的全长基因进行了克隆和测序,并推断出它们一级结构的氨基酸序列。研究结果表明,sc-w与sc-s在S1的初级结构上显示80.5%的同源性、与已经报道的草鱼低温型(gc10)有97.2%的高同源性;sc-s则与草鱼中间型(gcI)和高温型(gc30)显示了分别为98.4%和97.1%的高同源性。低温型的sc-w和gc10在S1初级结构上展现的特有变异主要发生在43个氨基酸残基位点,其中15个属保守性残基。对S1区域中两个功能性的表面环loop1(与ATP结合位点有关)和loop2(与肌动蛋白结合位点有关)的结构解析发现,sc-w和gc10在两个表面环的长度、残基电荷分布和氨基酸组成等方面与其它同工型之间存在明显差异,揭示了这两个表面环的结构差异可能影响了栖息于不同环境温度下的淡水鱼的肌球蛋白"分子马达"功能。分子系统树的分析结果进一步证明,鱼类栖息环境温度对其肌球蛋白同工型的基因和功能歧化的影响。
- 刘召静陶妍王玲军党静福岛英登
- 关键词：肌球蛋白CDNA克隆氨基酸序列
- 草鱼骨骼肌肌球蛋白热稳定性及凝胶化特性的季节变化被引量：9
- 2008年
- 对不同季节的草鱼(Ctenopharyngodon idellus)骨骼肌肌球蛋白进行提取和纯化,通过差示扫描量热仪(DSC)和流变仪对它们的热稳定性及动态黏弹性的变化进行了测定和比较。春、夏、秋、冬季鱼肌球蛋白的热转化温度(Tm)分别为42.2、45、41、39.5℃,表明春、夏季鱼较秋、冬季鱼具有更好的肌球蛋白热稳定性;并且四种肌球蛋白的动态黏弹性参数随温度上升的变化趋势是不同的,证明了具有不同热稳定性的肌球蛋白显示不同的热凝胶形成过程;春、夏季草鱼两段形成凝胶:第一段在42℃之前,第二段在44℃之后,而秋、冬季草鱼三段形成凝胶:第一段在30℃之前,第二段在34～39℃,第三段在40℃之后,表明肌球蛋白的热稳定性越差,其形成凝胶的起始温度越低。此外,对不同季节的草鱼鱼糜样品凝胶强度的测定结果显示,秋季鱼较其他三种季节的鱼具有更好的凝胶形成能力。
- 董永陶妍
- 关键词：草鱼肌球蛋白凝胶强度
