民族医药科学技术研究专项课题(QZYY2010-04)
- 作品数：4 被引量：13H指数：2
- 相关作者：唐中生谢高宇陆莹罗亚非张作涛更多>>
- 相关机构：贵阳中医学院济源市中医院茅台学院更多>>
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- 甘草多糖对脐血源单核细胞分化为树突状细胞过程中NF-kBp65表达的影响被引量：1
- 2015年
- 目的观察脐血源单核细胞分化为树突状细胞(DC)的过程中,核转录因子-k B p65(NF-k B p65)的表达以及GPS对单核细胞分化为DC的影响。方法无菌条件下采集脐血,非连续密度梯度离心获取脐血单核细胞;用含粒单细胞刺激因子(GM-CSF)、白介素-4(IL-4)、脂多糖(LPS)和GPS的RPMI-1640培养液分别对细胞因子组、GPS组、联合培养组的单核细胞进行体外培养;应用倒置相差显微镜、瑞氏染色和CD86、CD83、HLA-DR、S-100的免疫细胞化学法鉴定单核细胞和DC。动态观察单核细胞分化为DC过程中不同时间点的NF-k B p65的表达,并进行图像和SPSS软件分析。结果 CD86、CD83、HLADR、S-100的免疫细胞化学法证实所获单核细胞和DC符合各自的形态和表型特征。在含GM-CSF和IL-4的RPMI-1640培养液培养7d时,单核细胞分化成未成熟DC(im DC);在含GM-CSF、IL-4和LPS的RPMI-1640培养液继续培养5d时,imDC分化为成熟DC(m DC),两者的细胞核内NF-k B p65表达具有显著性差异(P<0.05)。单纯用只含GPS的RPMI-1640培养液培养单核细胞至7d时,可见其细胞核呈NF-k Bp65阳性,已分化为im DC,继续培养5d,则分化为DC。用含GMCSF、IL-4和甘草多糖的RPMI-1640培养液联合培养7 d时,则该单核细胞分化为im DC;加入LPS后继续培养5 d,im DC的细胞核呈NF-k Bp65强阳性,免疫细胞化学法证实im DC已经分化为DC。联合培养组细胞的表型表达均强于细胞因子组和GPS组(P<0.05)。结论脐血来源单核细胞分化为im DC和m DC过程中,细胞核内NF-k B p65表达逐渐增强。单纯用GPS(400μg/m L)可以刺激单核细胞分化为im DC和m DC,效果逊于细胞因子GM-CSF、IL-4和LPS共同培养。
- 唐中生吴春朋谢高宇陆莹罗亚非
- 关键词：细胞表面抗原P65甘草多糖
- 甘草多糖促进脐血源树突状细胞分化与成熟的初步研究
- 2012年
- 目的:研究两种浓度的GPS体外对脐血单核细胞来源的DC的分化、成熟的影响。方法:无菌条件下采集脐血,非连续密度梯度离心法获取脐血单核细胞并分为2组,分别用低、高浓度为100μg/ml、400μg/ml的GPS悬液诱导DC。运用倒置相差显微镜观察DC形态,ELISA法检测DC培养上清中IL-12的水平。结果:GPS刺激后,两组DC均呈现典型成熟DC形态学特征,尤以高浓度组诱导的DC数量最多,形态学特征最明显,且上清液中IL-12的水平最高(P﹤0.01)。结论:GPS可刺激体外对脐血单核细胞来源DC的分化和成熟,以高浓度组最佳。
- 张作涛谢高宇唐中生罗亚非陆莹
- 关键词：甘草多糖树突状细胞脐血免疫活性
- 不同浓度甘草多糖促进脐血源树突状细胞分化与成熟的研究被引量：8
- 2013年
- 研究不同浓度甘草多糖(GPS)体外对脐血单个核细胞来源树突状细胞(DC)的分化、成熟及免疫活性的影响。无菌条件下采集脐血,密度梯度离心法分离脐血单个核细胞并分为3组,用不同浓度的GPS悬液诱导为DC。用倒置相差显微镜观察DC形态,ELISA法检测DC培养上清中IL-12的水平,MTT法检测DC刺激T细胞增殖的能力。GPS刺激后,各组脐血单个核细胞来源的DC均呈现典型的成熟DC形态学特征,尤以400μg/ml GPS组诱导DC数量最多,最具形态学特征,且上清中IL-12的水平最高(P<0.01),诱导T细胞增殖的能力最强(P<0.01)。表明GPS可促进脐血单个核细胞来源DC的分化和成熟,增强DC的免疫学活性,尤以400μg/ml最佳。
- 唐中生罗亚非谢高宇陈波陆莹张作涛
- 关键词：甘草多糖树突状细胞脐血免疫活性
- 甘草多糖诱导的树突状细胞生物学特性研究被引量：4
- 2020年
- 目的从人外周血获取单核细胞,并利用GPS将其诱导分化为DCs,研究GPS对DCs分化成熟、表型的影响。方法密度梯度离心法及细胞贴壁法获取人外周血单核细胞;对不同分组(细胞因子组、甘草多糖组、联合组)的单核细胞进行体外诱导培养;倒置相差显微镜、瑞氏-姬姆萨染色法观察各组DCs形态变化;Western Blot对比各组DCs标志物蛋白表达差异。结果各组单核细胞体外培养均可诱导为DCs,符合DCs形态学特征,以联合组数量最多、体积最大、突起最显,细胞染色强于它组;Western Blot显示各组细胞标志物蛋白(CD80、CD40、CD83、CD86)均符合DCs表型特征,并随细胞成熟而表达增强,表达量以联合组最明显。结论GPS可诱导DCs的分化成熟,且协同细胞因子效果更佳。这为进一步从DCs角度探讨GPS增强人体免疫和抗肿瘤机制提供了研究基础。
- 王树琪李华唐中生陆莹
- 关键词：树突状细胞甘草多糖单核细胞分化成熟表型
