澳门特别行政区科学技术发展基金(0022009A)
- 作品数：7 被引量：33H指数：4
- 相关作者：李小毛李田许成芳王小韵孟丽荣更多>>
- 相关机构：中山大学附属第三医院澳门理工学院中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：澳门特别行政区科学技术发展基金国家自然科学基金广东省科技计划工业攻关项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 雷帕霉素抑制子宫内膜癌裸鼠移植瘤生长活体成像的观察被引量：5
- 2011年
- 目的:观察雷帕霉素(RA-PA)对不同PTEN表达子宫内膜癌裸鼠移植瘤的抑制作用。方法:通过慢病毒转染构建稳定表达绿色荧光蛋白(GFP)的HEC-1A(PTEN阳性)和Ishikawa(PTEN阴性)细胞株,建立裸鼠移植瘤模型。活体成像系统观察肿瘤的生长情况。观察RAPA治疗后肿瘤的体积及重量的变化。HE染色观察肿瘤的病理形态学变化。结果:建立稳定表达GFP的子宫内膜癌细胞系及裸鼠移植瘤模型,活体荧光成像显示,治疗组裸鼠荧光强度较对照组明显减弱。治疗组肿瘤体积及重量明显小于对照组(P<0.05),Ishikawa细胞组的抑瘤率(67.1%)较高于HEC-1A细胞组的抑瘤率(48.1%)。治疗组的肿瘤组织可见大片肿瘤细胞坏死,对照组肿瘤细胞坏死少。结论:RAPA对PTEN阳性及阴性的子宫内膜癌生长均有明显的抑制作用,PTEN的丢失可增加RAPA抗子宫内膜癌的敏感性。
- 李田杨越波孟丽荣李小毛许成芳李征然
- 关键词：雷帕霉素肿瘤移植
- 雷帕霉素增强子宫内膜癌细胞对阿霉素的敏感性被引量：5
- 2011年
- 目的:探讨mTOR抑制剂雷帕霉素联合阿霉素对子宫内膜癌细胞株的影响及其机制。方法:选用2株不同PTEN状态的子宫内膜癌细胞株:HEC-1A(PTEN野生型)和Ishikawa(PTEN突变型),分别给予低浓度雷帕霉素预处理24 h,再使用阿霉素,MTT法检测联合用药前后阿霉素24 h IC50及细胞生存率的变化,计算两药的联合指数;流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blotting观察PI3K/Akt通路的蛋白磷酸化和凋亡蛋白caspase-3的变化。结果:(1)雷帕霉素或阿霉素单药使用时均明显抑制2株子宫内膜癌细胞的生长。抑制率与时间、剂量呈正相关。使用10 nmol/L雷帕霉素预处理24 h后,阿霉素作用Ishikawa细胞的IC50由(21.3±3.8)μmol/L降到(11.9±1.2)μmol/L(P<0.05);而HEC-1A细胞的IC50由(14.3±2.8)μmol/L降到(8.2±0.9)μmol/L(P<0.05);2株细胞中阿霉素与雷帕霉素的联合指数均大于1.15,提示在2种细胞株中两药均有协同作用;(2)联合用药后,凋亡率较单药使用组明显升高(P<0.05);同时,p-Akt蛋白表达下降,而活化的caspase-3表达上调。结论:雷帕霉素能增加子宫内膜癌细胞对阿霉素的敏感性,从而降低肿瘤细胞对药物的耐药性,具有良好的抗肿瘤前景。
- 许成芳李小毛李田王小韵
- 关键词：子宫内膜肿瘤阿霉素雷帕霉素PI3K/AKT通路
- CHFR基因在肿瘤中的研究现状及意义
- 2012年
- 肿瘤的发生是一个复杂的生物学过程,主要是由于细胞内癌基因、抑癌基因及其他相关调节基因突变,从而使细胞基因组失去稳定性,最终导致肿瘤的发生。正常细胞的生长和分裂是一个高度复杂和精细的过程,为了确保细胞分裂的正常进行,每个细胞内均有一套严格的精确调控细胞增殖过程的监控系统——检查点,以维持基因组的稳定性。人类肿瘤的相关研究发现基因完整性的改变与有丝分裂检查点的功能缺失有关。
- 王小韵李小毛
- 关键词：CHFR基因人类肿瘤抑癌基因细胞分裂生物学过程细胞内
- 紫杉醇对PTEN不同状态的子宫内膜癌细胞株的作用及其机制探讨被引量：15
- 2011年
- 目的研究紫杉醇对不同PTEN状态子宫内膜癌细胞株中的作用及其相关机制。方法利用慢病毒载体系统,分别转染PTEN野生型的HEC-1A细胞和PTEN突变型的Ish-ikawa细胞,建立PTEN基因敲除(HEC-1-RNAi)细胞及过表达(Ishikawa-PTEN)的细胞模型。采用MTT法检测细胞增殖抑制率,流式细胞术检测细胞凋亡率,Western blot观察磷酸化AKT蛋白和Caspase-3蛋白的表达。结果紫杉醇对不同PTEN状态的细胞株均有明显的生长抑制作用,抑制率与时间、剂量成正相关。紫杉醇处理不同PTEN状态的细胞24h后,PTEN阳性细胞的IC50和磷酸化AKT蛋白水平明显低于PTEN阴性细胞,PTEN阳性细胞的凋亡率、Caspase-3的蛋白水平明显高于PTEN阴性细胞。结论 PTEN基因能增加子宫内膜癌细胞株对紫杉醇的敏感性,其可能与抑制PI3K/AKT信号通路,增强Caspase-3蛋白表达有关。
- 许成芳李小毛李田王小韵
- 关键词：紫杉醇PTEN基因PI3KCASPASE-3慢病毒载体
- CHFR在子宫内膜癌细胞中的表达和甲基化调控被引量：1
- 2011年
- 目的:研究CHFR在人子宫内膜癌细胞株中的表达和甲基化状态,以及去甲基化处理后对子宫内膜癌细胞克隆形成能力的影响。方法:半定量RT-PCR和Western blotting检测CHFR在子宫内膜癌细胞株的表达情况,甲基化特异性PCR检测CHFR的甲基化情况,用5-氨杂胞苷(5-aza)去甲基化处理RL-952细胞后再检测CHFR的表达和及其基因甲基化状态,平板克隆形成实验检测去甲基化对RL-952细胞的克隆形成能力的影响。结果:CHFR在子宫内膜癌细胞株中的表达均比正常成纤维细胞(NF)低,特别在RL-952细胞中表达显著降低。CHFR弱表达的RL-952细胞中CHFR异常高甲基化,而CHFR高表达的NF和ISH细胞均未见甲基化。用5-aza去甲基化处理RL-952细胞后,CHFR甲基化条带消失,其mRNA和蛋白表达明显增加,克隆形成率显著降低。结论:CHFR启动子甲基化是导致子宫内膜癌细胞中CHFR表达降低的主要原因,5-aza能恢复CHFR在子宫内膜癌细胞中的表达,并抑制癌细胞的克隆形成能力。
- 王小韵杨越波李小毛许成芳方莉张旭
- 关键词：甲基化
- PTEN和EGFR与子宫内膜癌发生和发展研究的最新进展被引量：4
- 2010年
- 10号染色体同源丢失性磷酸酶与张力蛋白(phosphatase and tensin homology deleted on chromosome ten,PTEN)基因在子宫内膜癌中的严重丢失,是探讨子宫内膜癌发病机制的研究热点。PTEN基因通过影响下游磷脂酰肌醇3激酶/蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase/protein kinase B,PI3K/Akt)/哺乳动物雷帕霉素靶向(mammalian target of rapamycin,mTOR)、黏着斑激酶(focal adhesion kinase,FAK)和丝裂原激活蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)这3条信号途径来调节细胞的生长、增殖、凋亡以及血管生长等,该基因发生丢失或突变均可导致肿瘤的发生。本文就PTEN基因和表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)信号通路及其下游信号通路的联系与子宫内膜癌发生发展研究的最新进展进行综述,为子宫内膜癌的基因诊断和治疗提供理论参考。
- 孟丽荣李田李小毛
- 关键词：子宫内膜肿瘤PTEN信号转导
- PTEN基因对子宫内膜癌细胞PI3K/AKT通路的影响被引量：5
- 2011年
- 【目的】探讨PTEN基因在子宫内膜癌PI3K/AKT通路中的作用,评估PTEN基因在抗肿瘤治疗中的意义。【方法】利用慢病毒载体系统,构建人PTEN基因RNA干扰慢病毒载体和PTEN基因过表达慢病毒载体,分别转染PTEN野生型的HEC-1A细胞和PTEN突变型的Ishikawa细胞,建立PTEN基因敲减及过表达的细胞模型,Western blot方法检测PTEN基因敲减或过表达前后PTEN蛋白的表达和AKT通路的活化情况,MTT法检测慢病毒转染前后细胞增殖的变化,流式细胞术检测慢病毒转染前后细胞周期及细胞凋亡率的变化。【结果】①HEC-1A细胞转染PTEN基因干扰慢病毒载体后,细胞的增殖曲线和细胞凋亡率与对照组比较无明显变化。但Ishikawa细胞转染PTEN基因过表达慢病毒载体后,增殖曲线和细胞凋亡率显示其生长呈明显抑制状态。②当HEC-1A细胞转染了RNA干扰病毒后(HEC-1A-RNAi),Western blot结果显示PTEN蛋白表达下调,其EGFR,p-EGFR,mTOR,p-mTOR,AKT,p-AKT蛋白表达增强,当Ishikawa细胞转染了过表达载体病毒后(Ishikawa-PTEN),Western blot结果显示其PTEN蛋白表达上调,p-EGFR,p-mTOR,AKT,p-AKT蛋白表达减弱。③HEC-1A-RNAi细胞周期中G1期细胞比例减少,S期细胞比例增加,Ishikawa-PTEN细胞周期中G1期细胞比例增加,S期细胞比例减少。【结论】PTEN基因可以抑制细胞增殖过程,有可能成为子宫内膜癌患者基因治疗的选择之一。
- 许成芳李小毛李田王小韵
- 关键词：慢病毒载体PTEN基因AKTPI3K
