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抗软腐病基因在花魔芋块茎组织中特异表达的研究被引量：2: 2014年; 本研究利用PCR技术从马铃薯块茎基因组DNA中克隆块茎特异性启动子patatin,并从苏云金芽孢杆菌218中克隆aii A(高丝氨酸环内酯酶)基因,构建含aii A基因的抗软腐病植物表达载体p BI121-patatinaii A。并利用农杆菌介导法将aii A基因导入花魔芋,以研究aii A基因在魔芋块茎组织中的特异表达。结果表明,转化植株经GUS染色,仅在球茎部位出现蓝色斑点,经PCR检测,RT-PCR及Southern杂交检测证实aii A基因已整合到花魔芋基因组,初步表明aii A基因可在魔芋球茎内特异性表达。本研究对今后魔芋通过分子遗传工程改良软腐病抗性具有一定的应用价值。; 陈磊廖甜甜郭政宏程海丽乐超银; 关键词：AIIA基因组织特异性表达花魔芋

适于SDSPAGE分析的高粱叶片蛋白质提取方法被引量：1: 2013年; 为了探索适于高粱叶片蛋白质SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳(SDS-PAGE)分析的样品制备方法,对TCA/丙酮沉淀后的蛋白质分别用裂解液Ⅰ(尿素+硫脲+CHAPS+DTT)和裂解液Ⅱ(尿素+DTT)2种裂解液进行裂解,用改良的Bradford法进行定量分析,并进行SDS-PAGE分离检测。结果表明,裂解液Ⅰ所得蛋白质质量浓度(2.538g/L)高于裂解液Ⅱ所得蛋白质质量浓度(1.905g/L),且两者呈极显著差异(P<0.05),但裂解液Ⅰ所得蛋白质电泳条带出现1条杂带;而裂解液Ⅱ所得蛋白质能满足上样要求且电泳条带清晰无杂带。因此,TCA/丙酮沉淀并用裂解液Ⅱ进行裂解的方法适用于高粱叶片的SDS-PAGE分析。; 许克静陈云雷珍珍程海丽陈磊乐超银; 关键词：高粱 SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳蛋白质提取

花魔芋抗软腐病植株的鉴定及其抗性机理的初步研究被引量：7: 2013年; 通过筛选获得了对魔芋(Amorphophallus konjac)软腐病具有较强抗性的花魔芋抗病植株,经核型分析发现,其染色体数目与普通植株一致,均为2n=26。抗病实验结果表明,该抗病植株对魔芋软腐病的抗性较普通植株强。采用酶联免疫吸附法,测定了软腐病病原菌接种30小时内的抗病与普通植株叶片中内源植物激素(SA与JA)的含量变化。结果显示,抗病和普通植株叶片中SA和JA含量变化的总体趋势明显不同。主要表现在,抗病和普通植株叶片中SA和JA积累的时间不同;此外,积累的量也有明显差异。推测魔芋抗病植株可能存在与目前大多数植株不同的抗病机制。; 雷珍珍叶晶龙程海丽陈云望彗星许克静乐超银; 关键词：软腐病魔芋抗病茉莉酸

魔芋内生拮抗菌的筛选及鉴定被引量：5: 2014年; 为了从魔芋组织中筛选得到有效抑制魔芋软腐病菌的内生拮抗菌，采用组织块法从魔芋块茎中分离到15株内生细菌，通过菌株发酵上清液抑菌试验筛选拮抗菌株，发现其中5株对魔芋软腐病具有拮抗作用，占所筛内生菌的33％，BS-4、5、8的抑菌圈较大，直径在14～16mm。魔芋块茎感病试验发现，抑菌活性较高的BS-8菌株发酵上清液能在-定程度上抑制魔芋块茎感病，经生理生化和16SrRNA基因序列分析鉴定，证实BS-8菌株为枯草芽孢杆菌（Bacillussubtilis）。BS-8菌株对魔芋软腐病菌具有很好的拮抗性，可作为-种新的植物生防制剂或工程菌进行更深一步的研究。; 程海丽潘虹陈磊乐超银; 关键词：魔芋枯草芽孢杆菌

魔芋内生拮抗菌的定殖研究被引量：2: 2014年; 采用抗魔芋(Amorphophallus rivieri Durieu)软腐病的内生芽孢杆菌BS-8发酵液灌根魔芋植株,定期测定该内生拮抗菌在魔芋叶片中的定殖情况。根据该内生菌16S rRNA特异性保守区域设计引物,定期4次采样,提取魔芋叶片DNA,通过SYBR Green I实时荧光定量PCR法检测该内生拮抗菌在魔芋叶片中的定殖情况。结果表明,经内生拮抗菌灌根培养的魔芋叶片中芽孢杆菌数量均明显大于对照,该内生芽孢杆菌能大量定殖在魔芋叶片中。; 程海丽陈磊乐超银; 关键词：SYBR

花魔芋NBS-LRR类抗病基因同源序列的克隆和初步分析被引量：2: 2019年; 通过同源克隆法从花魔芋抗病植株中得到抗软腐病基因的同源片段,为筛选魔芋抗软腐病基因提供了科学依据。根据已知植物NBS-LRR类抗病基因同源序列(RGA)的保守区域设计简并引物,从抗软腐病花魔芋植株的基因组DNA与cDNA上得到抗病基因同源片段(RGAs),并对其结构进行分析。从抗软腐病花魔芋植株基因组中分离得到了一条500 bp的NBS-LRR类抗病基因同源序列,共获得6条特异序列,分别命名为RGAR1、RGAR2、RGAR3、RGAR4、RGAR5、RGAR6,6条魔芋RGAs在氨基酸水平上的同源性表现出多态性,序列相似性分析结果表明,这些魔芋抗病基因同源序列均包含P-loop、Kinase-2、Kinase-3及疏水结构域HD等保守结构域,与已知的抗病基因在氨基酸水平上的同源性为33%～63%。通过构建系统进化树分析,将这6个序列分为3个亚组,均属于TIR-NBS-LRR类抗病基因。在花魔芋上成功获得了抗病基因同源序列,将为魔芋中抗病基因的克隆、功能分析及定位等提供帮助。; 雷珍珍陈磊张瑶乐超银; 关键词：花魔芋抗病基因同源序列 NBS-LRR 同源克隆

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湖北省自然科学基金(2011CDB184)