国家自然科学基金(30571406)
- 作品数:13 被引量:59H指数:7
- 相关作者:时连根赵林川顾燕燕司马杨虎华荣胜更多>>
- 相关机构:浙江大学苏州大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金浙江省科技计划项目浙江省中医药重点研究计划更多>>
- 相关领域:农业科学生物学医药卫生更多>>
- 滞育发动前家蚕滞育性与非滞育性卵的谷胱甘肽氧化还原循环状态分析被引量:4
- 2012年
- 为了调查滞育和非滞育性家蚕卵的谷胱甘肽氧化还原循环在滞育发动前是否存在差异,利用分光光度法检测滞育发动前(25℃中蚕卵产下后0~24 h)滞育与非滞育蚕卵的谷胱甘肽含量和相关代谢酶活性。滞育发动前,滞育性家蚕卵中的还原型谷胱甘肽(GSH)含量、氧化型谷胱甘肽(GSSG)含量、总谷胱甘肽(GSH+2GSSG)含量和GSH/GSSG比值变化不显著,谷胱甘肽S-转移酶(GST)活性变化不显著,但硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)活性下降23%,谷胱甘肽还原酶(GR)活性升高57%;非滞育性家蚕卵中的GSH含量及TPX和GST活性变化不显著,但GSSG含量升高61%,GSH+2GSSG含量升高41%,GSH/GSSG比值下降33%,GR活性下降16%。与非滞育性家蚕卵相比,滞育发动前滞育性家蚕卵中的GSH含量、GSSG含量和GSH+2GSSG含量较低,GSH/GSSG比值较高,TPX活性较低,GST活性无显著差异,GR活性较高。两种蚕卵中都未能检测到谷胱甘肽过氧化物酶(GPX)和硫氧还蛋白还原酶(TrxR)活性。结果表明,滞育发动前滞育性家蚕卵中较低的TPX活性和较高的GR活性共同导致较高的GSH/GSSG比值,使其谷胱甘肽氧化还原循环处于相对还原态。
- 万华星司马杨虎赵林川
- 关键词:家蚕卵谷胱甘肽还原酶
- 冷藏期家蚕滞育卵和即时浸酸卵的H_2O_2含量及过氧化氢酶基因表达的变化被引量:11
- 2010年
- 将产下后48h的家蚕滞育卵和即时浸酸卵进行低温(5℃)冷藏处理30d以上,滞育卵孵化率显著上升,而即时浸酸卵孵化率显著下降。为了探讨低温处理对滞育卵和即时浸酸卵的孵化产生不同影响的分子机制,测定了冷藏期间2种卵中的H2O2含量、过氧化氢酶(CAT)基因mRNA转录水平和CAT活性变化。结果表明:2种卵在冷藏期间随着卵中的H2O2含量显著增加,CAT基因mRNA转录水平也上调;虽然冷藏后的10~70d,2种卵中的H2O2含量、CAT基因mRNA转录水平及CAT活性都显著上升,但滞育卵的H2O2含量仍显著高于即时浸酸卵,而CAT基因mRNA转录水平和CAT活性则显著低于即时浸酸卵。即时浸酸卵在冷藏过程中H2O2含量显著增加,可能造成了对胚胎的氧化伤害,从而降低其孵化率。然而,滞育卵在冷藏过程中的CAT基因mRNA转录水平及CAT活性相对较低,H2O2相对较高,胚胎却未受到氧化伤害,推测低温处理可能诱导了滞育卵中其它抗氧化反应。
- 侯宜胜王丽姚金美赵林川
- 关键词:滞育卵H2O2过氧化氢酶基因
- 家蚕胚胎滞育的分子机理研究被引量:4
- 2008年
- 家蚕滞育发生于胚胎发育早期,为卵滞育型,由遗传和环境条件支配。在蛹期由咽下神经节合成和分泌的滞育激素,在其滞育过程中起到了决定性作用。滞育激素编码基因的表达,引发咽下神经节的12个细胞合成与分泌滞育激素,滞育激素通过卵巢细胞上滞育激素受体的介导而进入卵内,调节卵内一系列物质代谢,从而实现滞育发动或滞育解除等生理过程。本文简述了滞育激素的结构与功能、滞育激素的编码基因与表达、滞育激素受体基因及其表达等研究成果。
- 顾燕燕华荣胜时连根
- 关键词:家蚕滞育激素G蛋白偶联受体
- 家蚕滞育激素受体基因(BmDHR)的分子克隆及定量分析被引量:8
- 2008年
- 家蚕滞育激素受体(BmDHR)能特异性地识别滞育激素(DH),参与滞育激素信号的转导,在家蚕滞育发动过程中发挥重要作用。采用RT-PCR方法克隆出BmDHRcDNA,其开放阅读框长1 311 bp,编码436个氨基酸,属于一种G蛋白偶联受体,含有7个跨膜结构域。同源性及系统进化分析表明,BmDHR蛋白序列与玉米夜蛾性信息素合成激活肽受体(HzPBANR)和家蚕性信息素合成激活肽受体(BmPBANR)蛋白序列具有较高的同源性,分别为46.0%和40.9%。定时半定量分析显示,BmDHR基因表达水平在不同条件催青的二化性5龄幼虫、蛹体中存在差异。
- 顾燕燕华荣胜周耐明时连根
- 关键词:家蚕基因克隆半定量分析
- 家蚕滞育卵中辅酶Ⅰ和辅酶Ⅱ的含量变化被引量:7
- 2008年
- 利用苹果酸脱氢酶(MDH)和柠檬酸合酶(CS)串联反应以及葡萄糖-6-磷酸脱氢酶(G6PDH)催化葡萄糖-6-磷酸(G-6-P)脱氢反应,分别测定了家蚕滞育发动、即时浸酸和低温冷藏处理蚕卵辅酶Ⅰ(NAD+)和辅酶Ⅱ(NADP+)的含量。滞育发动时蚕卵NAD+含量显著下降,而即时浸酸和低温冷藏处理使蚕卵NAD+含量显著提高。蚕卵中的NADP+在滞育发动前大量积累,滞育发动时下降,即时浸酸处理后NADP+含量显著提高,在低温冷藏早期其含量进一步提高,低温冷藏处理后期又显著下降。分析上述结果认为,家蚕滞育卵中NAD+和NADP+含量的变化分别与呼吸耗氧量和糖元-山梨醇相互转化密切相关。
- 赵林川时连根
- 关键词:家蚕滞育卵
- 家蚕雌蛾体中雌二醇含量的影响因素研究被引量:3
- 2007年
- 用放射免疫法研究了家蚕雌蛾体中雌二醇(estradiol,E2)含量在品种、蛾龄、饲养季节间的变化规律等。结果表明:家蚕雌蛾体富含雌二醇,其含量在蚕品种间存在显著差异,在供试的17个品种中,雌蛾体内E2含量相差2.34倍;在刚羽化至自然死亡的不同蛾龄间,随蛾龄增大,E2含量逐渐增加,至自然死亡前一天达最高值,死亡后又下降;不同饲养季节间雌蛾体的E2含量是春蚕蛾>秋蚕蛾>夏蚕蛾;交配对雌蛾体的E2含量无明显影响。
- 顾燕燕贺伟强时连根
- 关键词:家蚕雌蛾雌二醇
- 用放射免疫法检测家蚕雌蛾体中雌二醇的含量被引量:8
- 2007年
- 为了便于对大量家蚕雌蛾粉及其制品样本中雌二醇的含量进行快速测定,研究了家蚕雌蛾体中雌二醇含量的测定方法。以0.1 mol/L HCl为处理液,乙醚为提取溶剂,振荡重复抽提3次,可有效地提取家蚕雌蛾体中雌二醇。以90 g/L牛血清白蛋白Tris缓冲液为测定溶剂,采用均相竟争的放射免疫法,可精确、稳定地测定出家蚕雌蛾体中雌二醇含量。
- 贺伟强顾燕燕时连根
- 关键词:家蚕雌蛾雌二醇放射免疫法
- 家蚕雌蛾体中孕酮含量的测定方法被引量:5
- 2008年
- 研究家蚕雌蛾体中孕酮含量的测定方法.以0.1 mol·L-1HCl为处理液,乙醚为提取溶剂,振荡重复抽提3次,可有效提取家蚕雌蛾体中的孕酮.以90 g·L-1牛血清白蛋白Tris缓冲液为测定溶剂,采用均相竞争性放射免疫法,可精确、稳定地测定出家蚕雌蛾体中孕酮含量.本方法可用于家蚕雌蛾粉及其制品中孕酮含量的大数量样本的快速测定.
- 顾燕燕贺伟强时连根
- 关键词:家蚕雌蛾孕酮放射免疫法
- 低温处理对家蚕滞育卵还原型与氧化型谷胱甘肽比值的影响被引量:6
- 2011年
- 还原型谷胱甘肽(GSH)与氧化型谷胱甘肽(GSSG)的比值反映出细胞的氧化胁迫状况。利用分光光度法分别测定家蚕滞育卵持续25℃保护和经5℃低温处理后卵内谷胱甘肽代谢的变化,探讨蚕卵的谷胱甘肽代谢与滞育解除的关系。与持续25℃滞育温度条件下的蚕卵相比,5℃低温解除滞育的处理显著提高了蚕卵总谷胱甘肽含量、GSSG含量和硫氧还蛋白过氧化物酶(TPX)活性,而显著降低了GSH含量以及GSH/GSSG比值。结果表明,低温处理过程中,滞育卵TPX活性显著升高,间接地促进GSH氧化为GSSG,使GSH/GSSG比值显著下降,由此导致蚕卵处于过氧化状态。
- 王丽侯宜胜姚金美司马杨虎赵林川
- 关键词:家蚕滞育卵滞育解除还原型谷胱甘肽
- 不同催青方式对二化性家蚕过氧化氢酶基因表达的影响被引量:9
- 2009年
- 25℃明催青和15℃暗催青分别诱导二化性家蚕Bombyx mori产滞育性卵和非滞育性卵。此前我们的研究表明,上述催青处理的二化性家蚕H2O2水平存在显著差异。过氧化氢酶(catalase,CAT)是昆虫清除H2O2的关键酶。为了进一步明确家蚕滞育过程中H2O2代谢的调控机制,用RT-PCR测定了上述两种催青处理对二化性家蚕CAT基因表达的影响。结果表明:25℃明催青显著提高了滞育诱导和决定阶段的CAT mRNA水平和CAT活性。滞育性卵的CAT mRNA水平在产后24h形成峰值,在72h后消失;CAT活性在96h前上升,120h后保持于低水平。非滞育性卵的CAT mRNA水平和CAT活性都随着胚胎发育而上升。可见,25℃明催青诱导二化性家蚕子代滞育可能是通过影响CAT基因表达来调节H2O2水平。
- 韩武梅时连根赵林川
- 关键词:滞育催青过氧化氢酶基因表达