中国博士后科学基金(20080431365)
- 作品数：4 被引量：35H指数：3
- 相关作者：杨桥焦炳华张晓玲代俊张磊更多>>
- 相关机构：第二军医大学中国水产科学研究院东海水产研究所武汉大学更多>>
- 发文基金：中国博士后科学基金国家高技术研究发展计划中央级公益性科研院所基本科研业务费专项更多>>
- 相关领域：生物学轻工技术与工程化学工程理学更多>>
- 类胡萝卜素在耐辐射奇球菌辐射抗性中的作用被引量：16
- 2009年
- 为研究耐辐射奇球菌(Deinococcus radiodurans)中类胡萝卜素的生化合成基因及其在该细菌抗辐射机制中的生物学作用,通过有机溶剂提取及LC-MS技术分析了D.radiodurans所产类胡萝卜素物质的主要组分,运用PCR及基因同源重组技术,对该菌中类胡萝卜素生化合成途径的八氢番茄红素合成酶(phytoene synthase,crtB)及八氢番茄红素脱氢酶(phytoene desaturase,crtI)基因进行了缺失突变,通过表型观察及HPLC定量分析突变株所产类胡萝卜素的组分变化确证突变株构建成功.野生株及crtB与crtI基因缺失突变株对电离辐射和H2O2的敏感性差异比较分析显示,和野生株相比,两种突变株对不同剂量电离辐射和不同浓度H2O2的敏感性更强.crtB及crtI基因功能研究表明,这两个关键性合成基因的缺失,导致突变株不能催化合成类胡萝卜素生化合成途径中的重要中间体——番茄红素及一系列下游产物.通过λ原噬菌体紫外线诱导系统、电子自旋共振(ESR)及DMPO自旋捕集技术,分别在体内和体外评价了其类胡萝卜素的抗氧化能力.结果表明,两种类胡萝卜素对超氧阴离子(O·2)及羟自由基(·OH)均表现出较强的清除作用.上述研究结果为探究D.radiodurans的类胡萝卜素合成基因和生物学功能,及类胡萝卜素在D.radiodurans抗辐射机制中的作用提供了新的直接实验证据.
- 杨桥张晓玲张磊代俊张俊祥焦炳华
- 关键词：耐辐射奇球菌类胡萝卜素抗辐射自由基
- 产Macrolactin A抗生素海洋解淀粉芽孢杆菌的鉴定及发酵条件优化被引量：12
- 2009年
- 为筛选海洋微生物来源的抗生素资源,从我国东海海泥中分离到一株可产大环内酯抗生素Mac-rolactinA(MLA)的海洋细菌,经形态特征、生理生化特性及16SrRNA测序及比对、细胞脂肪酸成分分析等多项指标测定,鉴定并将其命名为解淀粉芽孢杆菌(Bacillus amyloliquefaciens)JY-863。利用Plackett-Burman设计及响应面法对影响该菌株发酵产MLA的主要因素进行了优化。确立其最适发酵条件为:初始pH值6,温度29.9℃,装液量52.3%,转速130r/min,接种量10%,培养时间7d,在优化发酵培养条件下,产生的MLA含量提高了5倍,达到18.5μg/ml。
- 杨桥韩文菊张文俊卢小玲刘小宇许强芝焦炳华
- 关键词：发酵PLACKETT-BURMAN设计响应面法
- 高通量微孔板DAMBO-P^H荧光检测一氧化氮被引量：2
- 2009年
- 一氧化氮(NO)是生物体内的一种重要生物信号传导分子,广泛参与生物体内多种生理及病理过程。为建立快速高效、准确检测生物体释放NO的分析方法,本文选用高灵敏度、高选择性的NO特异性荧光探针8-(3,4-diaminophenyl)-2,6-bis(2-car-boxyethyl)-4,4-difluoro-1,3,5,7-tetramethyl-4-bora-3a,4a-diaza-s-indacene(DAM-BO-PH),激发波长和发射波长分别为520 nm和535 nm,以高通量微孔板(384孔)作为实验工具载体。该方法荧光强度与NO浓度在8.0×10-10~8.0×10-7mol.L-1范围内呈良好线性关系,R=0.9989,检出限为0.18 nmol.L-1,回收率为98%~102%。该方法应用于多种生物样品中释放NO的分析检测,结果令人满意。
- 张晓玲杨桥马明
- 关键词：一氧化氮荧光检测
- 黑色素及谷胱甘肽通过抑制NF-κB途径的激活可有效抑制H_5N_1禽流感病毒感染被引量：8
- 2009年
- 我国是H5N1高致病性禽流感频发区.为筛选天然药物用于H5N1禽流感的防治并研究其抗病毒感染的作用机制,本研究选取黑色素及谷胱甘肽(GSH)为候选药物,通过Hoechst33258荧光染色,观察了禽流感病毒(AIV)感染后的细胞形态变化;细胞凋亡流式细胞术定量分析表明,H5N1AIV感染可诱导宿主狗肾上皮细胞(MDCK)凋亡,而黑色素及GSH对其具有显著抑制作用(P<0.01);当20μg/ml黑色素及10mmol/LGSH共同作用时,抑制率高达89%(P<0.01);采用MTT法检测,黑色素及GSH可增强AIV感染后的宿主细胞存活率;病毒血凝素(Ha)基因的RT-PCR检测结果表明,黑色素及GSH可显著降低AIV在宿主细胞内的增殖(P<0.01);一氧化氮(NO)毛细管电泳(CE)激光诱导荧光检测显示,黑色素及GSH均可显著降低病毒感染诱导宿主细胞内的NO释放量(P<0.05);RT-PCR技术结合ELISA方法,分别分析了病毒感染后宿主细胞的诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)、环氧化酶(cyclooxygenase-2,COX-2)及核因子κB(nuclear factor-kappa B,NF-κB)在mRNA和蛋白水平表达的差异.结果表明,黑色素及GSH可抑制病毒感染诱导的iNOS与COX-2的基因及蛋白的表达(P<0.05),并进而抑制NF-κB途径的激活(P<0.01),从而可有效抑制HNAIV感染.
- 张晓玲杨桥代俊顾潮江许振辉焦炳华
- 关键词：H5N1禽流感病毒病毒感染黑色素谷胱甘肽
