国家自然科学基金(30370439)
- 作品数：10 被引量：27H指数：3
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- 碱性成纤维细胞生长因子对羊骨髓间充质干细胞体外增殖和分化的影响被引量：3
- 2007年
- 目的:探讨碱性成纤维细胞生长因子(bFGF)对羊骨髓间充质干细胞(BMSCs)体外增殖与分化的影响。方法:体外分离培养的羊原代BMSCs分为实验组和对照组,实验组添加bFGF(2μg.L-1)于L-DMED培养液中,对照组使用L-DMED常规培养液。分别测定2组BMSCs生长曲线以及碱性磷酸酶(ALP)活性。应用诱导剂对2组细胞进行成骨、成脂肪诱导,分别在显微镜下观察其分化潜能。结果:单个核细胞接种大约1周成纤维细胞样集落开始出现,2周后形成的集落数量增加,每个集落的体积变大。当第1代BMSCs细胞生长到汇合期时,实验组细胞数是对照组的2.5倍。于第16天实验组ALP活性比对照组明显降低(P<0.05)。2组BMSCs经成骨诱导培养3周后,经Von Kossa染色,已经成骨的细胞内均可见钙盐沉积;已经成骨的细胞内油红-“O”染色显示,成脂肪诱导培养2周后,2组BMSCs均能分化形成脂肪细胞,2组每高倍视野下脂肪细胞计数差异无显著性(P>0.05)。结论:bFGF能提高羊BMSCs集落形成数量及扩增效率,并抑制其ALP活性,同时保持了BMSCs向成骨细胞、脂肪细胞的分化潜能。
- 杨雷李薇姜震宇王冠军
- 关键词：骨髓间充质干细胞成纤维细胞生长因子
- 低剂量辐射诱导人骨髓间充质干细胞分子在P38MAPK通路的信号机制被引量：1
- 2009年
- 目的:探讨低剂量辐射(LDR)对人骨髓间充质干细胞(MSCs)的增殖作用及相关信号传导机制。方法:将培养的人骨髓MSCs及K562细胞分别分成3组:对照组、照射组和SB203580组。3组照射剂量均为75 mGy,观察照射后24 h总P38MAPK、P53、P21表达水平及增殖指数(PI)的变化,同时观察K562及MSCs细胞75 mGy照射后即刻和4、12及24 h磷酸化P38MAPK(p-P38MAPK)表达。SB203580组根据培养液量将SB203580调节成5μmol.L-1终浓度,于实验前1 h加入。结果:人骨髓MSCs细胞p-P38MAPK表达以75 mGy照射后12 h达高峰;照射后24 h P53和P21蛋白表达水平下降,PI增高,但总P38MAPK无变化,SB203580抑制P38MAPK激酶活性后,P53、P21表达上调,PI下降;K562细胞p-P38MAPK、P53、P21、总P38MAPK表达水平及PI在75mGy照射后24 h均无任何改变,加SB203580后PI略有下降,P21蛋白表达略有上升。结论:LDR可诱导人骨髓MSCs增殖兴奋性反应,这种反应是通过P38MAPK信号通路介导的,且与P21下降有关,这种P21下降存在P53依赖性的。
- 徐晓华谭岩盛传伦王冠军
- 关键词：人骨髓间充质干细胞K562SB203580
- 低剂量辐射对人骨髓间充质干细胞生物学特性的影响被引量：8
- 2008年
- 目的:探讨低剂量辐射(LDR)对骨髓间充质干细胞(BM-MSC)生物学特性的影响。方法:应用体外培养传代的P4、P5、BM-MSC,分别采用剂量为50、75和100mGyX射线照射(剂量率为12.5mGy·min-1),检测不同剂量照射后BM-MSC生长、细胞周期与凋亡的变化。结果:与对照组比较,50、75和100mGy照射后第5天BM-MSC生长进度明显加快(P<0.05);与同一时间对照组比较,50、75和100mGy照射BM-MSC后,G0/G1期细胞百分率减少(P<0.05),照射后72h降至最低;S期细胞百分率在照射后48和72h逐渐明显增多(P<0.05),以75mGy照射后72h,S期细胞百分率增多最明显(68.88%);而细胞凋亡的变化是50、75和100mGy照射后24和48h有增多趋势,照射后72h凋亡细胞百分率有减少趋势。结论:LDR对BM-MSC有兴奋性效应。
- 杨岩陈晓李薇王冠军
- 关键词：骨髓间充质干细胞低剂量辐射细胞周期凋亡
- 低剂量辐射后小鼠骨髓造血干、祖细胞的蛋白质组学研究被引量：1
- 2008年
- 本文利用双向凝胶电泳方法建立低剂量辐射后不同时间点小鼠骨髓造血干、祖细胞与相应假照组细胞蛋白质组二维凝胶电泳图谱,用图像分析软件分析照射组与假照组差异表达蛋白,并利用MALDI-TOF-MS生物质谱对差异蛋白质进行鉴定分析.结果表明低剂量辐射后骨髓造血干、祖细胞中表达上调的蛋白26个,表达下调的蛋白4个,消失的蛋白4个.其中碳酸酐酶II、蛋白二硫键异构酶、层粘连蛋白受体、嘌呤核苷磷酸化酶、谷胱甘肽过氧化物酶、氯化琥珀胆碱细胞内信号通道蛋白、中心体肌动蛋白-α、磷酸葡萄糖脱氢酶、原纤维蛋白、丝氨酸蛋白酶抑制剂等22种蛋白被鉴定出来.研究表明低剂量辐射使骨髓造血干、祖细胞某些蛋白表达上调或下调,并鉴定出与低剂量辐射作用机制相关的蛋白质.从新的视角探讨了低剂量辐射对造血系统的作用机制,同时也为低剂量辐射作用机制的研究提供了一种新的有效的研究手段.
- 张一琼李薇王冠军
- 关键词：蛋白质组二维凝胶电泳低剂量辐射质谱
- BEL7402细胞低剂量辐射后细胞周期和相关蛋白表达的变化被引量：2
- 2009年
- 目的研究低剂量辐射(LDR)对人肝癌细胞(BEL7402)增殖、细胞周期及相关信号蛋白表达的影响,为LDR临床应用提供理论依据。方法体外培养BEL7402,分为7个实验组:假辐射组(0 mGy)、5个LDR组(25,50,75,100,200 mGy)及高剂量辐射组(1 Gy)。辐射后用细胞计数法及噻唑蓝比色试验(MTT)检测细胞增殖率,用流式细胞术测定细胞周期中G0/G1,S,G2/M期的比例。应用蛋白分析系统分析检测细胞周期及相关信号蛋白共40个蛋白的表达。结果细胞计数及MTT试验,5个LDR组BEL7402细胞增殖率与假辐射组比较差异不显著(P>0.05)。流式细胞术试验,5个LDR组BEL7402细胞12、24 h G0/G1期细胞比例增高,但与假辐射组比较差异不显著(P>0.05);S期比例降低,与假辐射组比较差异显著(P<0.05);G2/M期比例升高,与假辐射组比较差异显著(P<0.05)。48 h后G0/G1,S,G2/M期与假辐射组比较差异不显著(P>0.05)。蛋白分析试验LDR后8种蛋白表达降低。结论LDR对BEL7402细胞增殖无促进作用,但在一定程度抑制增殖及细胞周期相关蛋白的表达。
- 许颖马克威李薇王冠军
- 关键词：低剂量辐射信号
- 应用蛋白质组学方法研究低剂量辐射对人骨髓间充质干细胞的影响被引量：4
- 2008年
- 本研究应用蛋白质组学方法探讨低剂量辐射对人骨髓间充质干细胞的影响。利用双向凝胶电泳建立低剂量照射组与假照组人骨髓间充质干细胞组蛋白质组二维凝胶电泳图谱,利用MALDI-TOF-MS生物质谱对差异表达的蛋白质进行鉴定分析。结果发现,低剂量照射后人骨髓间充质干细胞中表达上调的蛋白有12个,表达下调的蛋白有12个,消失的蛋白有3个。质谱鉴定出12个差异蛋白。结论:鉴定出的12种蛋白,其中某些蛋白如脯氨酰羟化酶、二氢嘧啶酶、ARP3放射相关蛋白、鸟嘌呤核苷酸结合蛋白、磷酸甘油酸变位酶等可能与低剂量辐射作用机制相关,本研究为低剂量辐射对造血系统的作用机制提出了一些新的认识。
- 张一琼李薇王冠军杨岩王杰张学敏
- 关键词：蛋白质组低剂量辐射骨髓间充质干细胞二维凝胶电泳质谱
- 低剂量辐射增强大剂量辐射对人胶质瘤的抑瘤作用被引量：2
- 2008年
- 目的探讨低剂量辐射及低剂量联合大剂量辐射对人胶质瘤生长的影响。方法以胶质瘤细胞株U251及荷人胶质瘤裸鼠移植瘤为研究对象，分别给予低剂量辐射和低剂量联合大剂量辐射，采用细胞计数、噻唑蓝（MTT）、流式细胞术等方法检测对细胞增殖的影响，通过计算抑瘤率来观察低剂量辐射联合大剂量辐射对移植瘤生长的影响。结果低剂量辐射后U251细胞计数、MTT及流式细胞术检测结果与假照组相比差异无统计学意义；大剂量辐射组及低剂量联合大剂量辐射组细胞增殖明显受抑，凋亡增多，细胞周期G2期阻滞，两组间差异无统计学意义；低剂量辐射联合大剂量辐射组与单独大剂量辐射组均对裸鼠移植瘤有明显的抑制作用，但联合照射组抑瘤作用更强；联合照射组与单纯大剂量辐射组相比，血液系统损伤有所减轻。低剂量辐射组与假照组相比肿瘤生长差异无统计学意义。结论低剂量辐射对人胶质瘤细胞无直接的抑制作用、兴奋效应，不诱导对大剂量辐射适应性反应，但能够在对正常造血系统产生保护作用的基础上，增强大剂量辐射对荷瘤裸鼠移植瘤的抑瘤作用，这种协同抗肿瘤作用在去除细胞免疫影响后仍然存在。
- 王畅王冠军谭业辉姜宏宇李薇
- 关键词：低剂量辐射人胶质瘤细胞荷瘤裸鼠抗肿瘤作用
- 低剂量辐射对HCT-8细胞周期及其相关蛋白表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:研究低剂量照射(LDR)对人结肠癌细胞(HCT-8)增殖、细胞周期及其相关信号蛋白表达的影响,为低剂量辐射临床应用提供理论依据。方法:体外培养人结肠癌细胞HCT-8,分为7个实验组:假照组(0mGy),25、50、75、100和200mGy低剂量X线照射组和1000mGy高剂量X线照射组。照射后用细胞计数法及噻唑蓝比色(MTT)检测细胞增殖率,用流式细胞术测定细胞周期中G0/G1、S、G2/M期的比例。应用蛋白法分析检测细胞周期及相关信号蛋白(共9个蛋白)的表达。结果:经细胞计数及MTT实验证实,25、50、75、100和200mGy低剂量辐射组HCT-8细胞增殖率与假照组比较差异均无显著性(P>0.05),与高剂量组比较差异均有显著性(P<0.05)。经流式细胞术检测,与假照组比较,75mGy低剂量辐射12和24h后,HCT-8细胞G0/G1期比例增高(P>0.05),S期比例显著降低(P<0.05);G2/M期比例显著升高(P<0.05);48h后G0/G1、S及G2/M期HCT-8细胞比例与假照组比较差异均无显著性(P>0.05)。蛋白分析检测,低剂量辐射后HCT-8细胞中Akt、PCNA、P27、CDK2、cyclinE、EGFR、ERK1/2、p-ERK、p-GSK-3α/β等9种蛋白表达量均较假照组降低。结论:低剂量辐射对HCT-8细胞增殖无促进作用,但在一定程度抑制细胞增殖及细胞周期相关蛋白的表达。
- 许颖马克威李薇王冠军
- 关键词：低剂量辐射细胞周期
- 低剂量辐射后小鼠血清的蛋白质组学研究被引量：7
- 2007年
- 本研究应用蛋白质组学方法探讨低剂量辐射对造血系统的作用机制,筛选与低剂量辐射作用机制相关的蛋白质,为低剂量辐射的临床应用提供实验依据和理论基础。利用双向凝胶电泳建立低剂量辐射后不同时间点小鼠外周血血清与假照射组蛋白质组二维凝胶电泳图谱,利用MALDI-TOF-MS生物质谱对差异表达的蛋白质进行鉴定分析。结果表明:低剂量照射后,与假照射组相比照射组新出现的蛋白点有4个,表达上调的蛋白点有13个,表达下调的蛋白点有6个,消失的蛋白点有3个。某些蛋白的表达在照射组不同时间点呈现动态的变化规律,经质谱鉴定发现雌激素受体在照射组表达下调,维生素D结合蛋白及载脂蛋白等在照射组表达上调。结论:低剂量辐射使血浆中某些蛋白表达上调或下调,并发现了一些与低剂量辐射作用机制相关的蛋白质。
- 李薇张一琼王冠军王杰张学敏
- 关键词：蛋白质组低剂量辐射二维凝胶电泳质谱
- 低剂量辐射对人骨髓间充质干细胞造血生长因子表达量的影响被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨低剂量辐射(LDR)对人骨髓间充质干细胞(BM-MSC)的兴奋性效应及其分子机制。方法:应用体外传代培养的P4和P5BM-MSC,采用X射线照射,分为50、75和100mGy3个照射剂量组,剂量率为12.5mGy.min-1,每组细胞设对应假照组,采用ELISA方法检测LDR后BM-MSC细胞因子表达量的变化。结果:与同一时间假照组比较,50、75和100mGyX射线照射人BM-MSC后,在培养24和48h时干细胞因子(SCF)分泌量均有升高趋势,仅75mGy照射后48h时SCF分泌量明显升高,与同一时间假照组比较差异有显著性(P<0.05);50和75mGy照射组在24和48h,100mGy照射组在24h时IL-6分泌量明显升高,与同一时间假照组比较差异有显著性(P<0.05);50、75和100mGy照射BM-MSC后,与同一时间假照组比较,除50mGy照射后72h外,M-SCF分泌量在照射后在24、48和72h均明显升高(P<0.05),以75mGy照射后72h升高最明显。结论:LDR对BM-MSC有兴奋效应,表现为细胞生长加速,同时在一定时间内可以使造血生长因子表达量增多。
- 杨岩王娟王冠军朱婧妍
- 关键词：骨髓间充质干细胞低剂量辐射造血生长因子
