吉林省自然科学基金(201015175)
- 作品数：10 被引量：15H指数：2
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- MSCs对辐射诱导小鼠胸腺瘤中T细胞CD4/CD8各亚群及各亚群中CD45比例变化的影响被引量：5
- 2013年
- 目的观察MSCs对辐射诱导小鼠胸腺瘤中T细胞CD4/CD8各亚群及各亚群中CD45比例变化的影响,探讨MSCs对辐射诱发肿瘤的预防和治疗作用。方法应用Kaplan经典方法制备C57BL/6幼年鼠胸腺瘤模型[1],经小鼠尾静脉输注同系鼠MSCs,6个月后取胸腺组织,将胸腺细胞制成单细胞,标记CD4、CD8、CD45,流式细胞术分析T细胞亚群。结果流式细胞术分析结果显示:照射后CD4-CD8-亚群比例由正常组的(5.11±5.10)%降低到(0.01±0.01)%(P<0.05),MSCs治疗(0.61±0.39)%后有所恢复;MSCs治疗组(91.49±4.47)%中CD4+CD8+亚群比例与正常组(82.44±6.06)%接近,单纯照射组(99.09±0.49)%显著高于正常组(P<0.05);照射后CD4+CD8-亚群由(7.72±3.37)%下降到(0.87±0.49)%,CD4-CD8+亚群由(4.74±2.59)%下降到(0.02±0.01)%,MSCs治疗后CD4+CD8-和CD4-CD8+都有不同程度上调。正常组、单纯照射组、MSCs治疗组中CD45+在CD4+CD8+中的比例分别为(86.09±2.24)%、(0.16±0.03)%、(97.35±3.23)%,差异有统计学意义(P<0.05);单纯照射组CD4-CD8-、CD4-CD8+和CD4+CD8-中CD45+均有不同程度的降低,MSCs治疗组有不同程度升高,且具有统计学意义(P<0.05)。结论 MSCs可使辐射诱导胸腺瘤模型组小鼠胸腺中T细胞CD4/CD8各亚群及各亚群中CD45比例增高或恢复,提示MSCs具有防治辐射诱发胸腺瘤的作用,并对辐射造成的胸腺损伤具有修复作用。
- 王玲张红梅李东红宋新灵国春龙陈玉丙卢日峰
- 关键词：MSCS胸腺瘤CD8CD45
- 人Rac1基因shRNA表达质粒的构建及鉴定被引量：1
- 2011年
- 目的构建人Rac1基因shRNA表达质粒,为提高卵巢癌放化疗的敏感性奠定基础。方法根据GenBank中登录的人Rac1基因序列,应用shRNA设计软件设计并合成用于构建shRNA表达质粒的oligo DNA,构建shRNA重组质粒。将阳性Rac1基因shRNA重组质粒经脂质体介导转染卵巢癌Skov3细胞,48 h后经RT-PCR筛选有效的shRNA重组质粒。结果经限制性内切酶BamHⅠ和PstⅠ酶切鉴定出阳性Rac1基因shRNA重组质粒,序列比对分析结果与理论序列完全一致。RT-PCR检测显示,转染pGPU6/GFP/Rac1-524的Skov3细胞Rac1基因mRNA的转录水平下降。结论已成功构建人Rac1基因shRNA表达质粒,并筛选出有效的干扰质粒pGPU6/GFP/Rac1-524。
- 王虹张菊青陈玉丙张红梅崔满华
- 关键词：RAC1RNA干扰卵巢肿瘤
- 骨髓间充质干细胞移植对脑缺血模型大鼠记忆功能的影响被引量：1
- 2011年
- 目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)对脑缺血模型大鼠的迁徙及模型鼠学习记忆功能的影响。方法全骨髓贴壁分离培养大鼠MSCs,线栓法制备Wester大鼠脑缺血模型,经颈动脉移植DAPI标记的MSCs,通过激光共聚焦显微镜观察MSCs在脑组织内的迁徙作用,骨髓间充质干细胞移植后第2周及第8周,行Morris水迷宫测试大鼠记忆的功能。结果 MSCs经颈动脉移植后,在24 h即出现在脑损伤区域血管内,第5天在血管周围组织内开始弥散,第10天在损伤区域可见广泛弥散。MSCs治疗后水迷宫试验中,第2周及第6周正常组、模型组、PBS注入组及MSCs治疗组逃避潜伏期时间经组间比较具有统计学意义。结论动脉移植MSCs后,MSCs首先出现在大鼠缺血性脑损伤区域血管内,然后在周围组织弥散,MSCs移植对脑缺血模型鼠的学习记忆能力有一定的恢复作用。
- 刘丽萍那汉荣
- 关键词：骨髓间充质干细胞脑缺血学习记忆
- 移植后的Wistar大鼠骨髓间充质干细胞向神经元分化的实验研究被引量：2
- 2011年
- 目的观察Wistar大鼠骨髓间充质干细胞(BMSCs)移植后在脊髓损伤区是否向神经元分化。方法首先用BrdU在体外标记BMSCs,将标记后的BMSCs分别由大鼠尾静脉及脊髓损伤局部移植到大鼠体内,于移植后10天、20天及30天灌杀大鼠,制作脊髓的冰冻切片并行免疫组织化学染色,在激光共聚焦显微镜下观察植入的BMSCs表达神经元特异性蛋白NSE的情况。结果移植术后10天2、0天及30天,损伤脊髓内可见BrdU/NSE双标记的细胞。结论 BMSCs移植后在脊髓损伤区内可见神经元特异性蛋白NSE,移植的BMSCs可能分化为神经元。
- 陈玉丙贾全章李东君孙景海吴传真王风华徐爽刘丽萍姜大伟高德萱张红梅
- 关键词：骨髓间充质干细胞神经元分化
- Rac1 shRNA对卵巢癌细胞株Skov3细胞周期及凋亡的影响被引量：1
- 2011年
- 目的为Rac1 shRNA应用于卵巢癌治疗提供实验依据。方法将筛选的有效的Rac1 shRNA载体pGPU6/GFP/Rac1-524以Lipo-fectimineTM2000介导转染卵巢癌细胞株Skov3,48 h后收集细胞,RT-PCR检测转染细胞cyclin D1 mRNA的表达;将转染细胞标记AnnexinⅤ,流式细胞术检测分析转染细胞的凋亡情况。结果转染Rac1 shRNA pGPU6/GFP/Rac1-524的卵巢癌细胞株Skov3的cyclin D1 mRNA表达量下降;AnnexinⅤ阳性细胞数(54%)明显高于未转染组(5.6%);AnnexinⅤ和PI双阳性的细胞数(32.3%)也明显高于未转染组(3.2%)。结论 Rac1 shRNA pG-PU6/GFP/Rac1-524可以下调cyclin D1的表达,并促使Skov3细胞凋亡。
- 王虹张菊青陈玉丙张红梅崔满华
- 关键词：RAC1干扰RNA卵巢癌CYCLIND1凋亡
- Snail蛋白在膀胱癌中的表达及其临床意义
- 2013年
- 目的探讨Snail蛋白在膀胱癌中的表达及与临床病理特征的关系。方法采用免疫组化法检测128例膀胱癌组织和20例正常组织中Snail蛋白的表达,并结合临床资料进行分析。结果正常组织中Snail蛋白的表达水平明显低于肿瘤组织(P<0.001)。G1级和G2～G3级别膀胱癌中Snail蛋白表达的阳性率分别为37.8%、60.2%,差别有统计学意义(P=0.015)。非肌层浸润性膀胱癌和肌层浸润性膀胱癌中Snail蛋白表达的阳性率43.7%和70.7%,差别有统计学意义(P=0.004)。Kaplan-Meier生存显示:Snail蛋白表达的与膀胱癌患者的5年总生存率有关(P<0.001)。Snail蛋白表达与患者的年龄、性别、肿瘤的数目及大小无明显相关性(P>0.05)。结论 Snail蛋白的高表达可能在膀胱癌组织发生、发展过程中起到重要作用,有望成为膀胱癌预后的一个新分子指标。
- 胡森谭振朝王玉玺陈亮彭鄂军曾晓勇
- 关键词：膀胱肿瘤SNAIL预后
- CXCR4基因shRNA表达质粒的构建及筛选鉴定
- 2013年
- 目的构建编码CXCR4 mRNA的短发卡样RNA(shRNA)表达质粒用以筛选出基因沉默效果最明显的shRNA质粒表达载体。方法根据GenBank中登录的CXCR4基因的核苷酸序列,应用shRNA设计软件设计并合成4条短发卡shRNA的oligo DNA,构建shRNA重组质粒。采用酶切电泳和测序方法进行鉴定。将鉴定后的CXCR4基因shRNA重组质粒经脂质体介导转染胶质瘤U251细胞,24 h后经RT-PCR筛选有效的shRNA重组质粒。结果构建的质粒表达载体PCR鉴定均可扩增出目的条带,DNA测序结果与理论序列完全一致。RT-PCR检测显示,转染pGPU6/GFP/Rac1-421的U251细胞CXCR4基因mRNA的转录水平下降。结论成功构建CXCR4基因shRNA表达质粒,并筛选出效果最为明显的shRNA质粒表达载体为pGPU6/GFP/Rac1-421。
- 胡志洪王晓婓国春龙宋新灵
- 关键词：CXC趋化因子受体4RNA干扰U251细胞
- 骨髓间充质干细胞移植和直流电刺激对大鼠脊髓损伤的修复作用被引量：4
- 2011年
- 目的探讨骨髓间充质干细胞(Bone marrow mesenchymal stem cells,BMSCs)移植和直流电刺激对大鼠脊髓损伤(Spinal cord injury,SCI)的修复作用。方法采用脊椎骨破坏法制备大鼠SCI模型,将模型大鼠随机分为模型组、BMSCs移植组、电刺激组和电刺激+BMSCs移植组,通过BBB评分、体感诱发电位(Somatosensory evoked potential,SEP)测定和免疫组化法观察不同方法治疗SCI的效果。结果 BMSCs移植后7和14 d,模型组和电刺激组BBB评分与BMSCs移植组和电刺激+BM-SCs移植组相比,差异有统计学意义(P<0.05);电刺激+BMSCs移植组脊髓功能恢复最好。SEP检测,BMSCs移植后14 d,BMSCs移植组和电刺激+BMSCs移植组与其他两组比较,潜伏期幅有明显差异(P<0.05)。采用NF-200标记脊髓神经元,模型组在损伤14 d后,仅见少量的NF阳性细胞;而电刺激组和BMSCs移植组可见大量NF阳性细胞和轴突分布于损伤区周围;电刺激+BMSCs移植组NF阳性细胞明显多于电刺激组和BMSCs移植组(P<0.05)。BMSCs移植组在移植后7 d,局部组织脑衍生的亲神经因子(Brain-derived neurotropic factor,BDNF)表达量明显高于模型组(P<0.05),14 d最强,21 d减弱,电刺激+BMSCs移植组BDNF表达最强(P<0.05)。结论 BMSCs移植联合电刺激能够最大程度地促进SCI修复。
- 范东艳王苹刘然陈玉丙
- 关键词：间质干细胞移植电刺激疗法脊髓损伤
- 骨髓间充质干细胞抑制辐射诱导C57BL/6小鼠胸腺瘤的发生被引量：2
- 2012年
- 目的观察骨髓间充质干细胞(MSCs)对辐射诱导胸腺瘤形成的影响,探讨辐射损伤的防治,为预防辐射诱发肿瘤的发生提供实验依据。方法按照Kaplan经典方法,取(13±2)g雌性C57Bl/6小鼠,每次照射剂量1.75 Gy,每周1次,共4次,制备小鼠胸腺瘤动物模型。无菌取乳鼠股骨骨髓,分离、培养、DAPI标记MSCs,取1.0×106个MSCs经尾静脉注入模型小鼠,每周1次,共2次。末次照射后6个月杀鼠取胸腺,10%甲醛固定、包埋、切片、HE染色,病理学检测胸腺结构,判断胸腺瘤的形成情况,计算胸腺瘤发生率。结果镜下观察可见假照射组C57BL/6小鼠胸腺组织结构正常,皮髓质结构清晰,淋巴细胞形态规则,呈圆形或卵圆形。辐射诱导模型组C57BL/6小鼠无正常胸腺结构,未见正常淋巴细胞,淋巴样肿瘤细胞弥漫分布,胞核大,深染,呈典型的淋巴瘤特征性细胞。MSCs注射组可见小鼠胸腺结构,未见淋巴瘤特征性细胞。模型组C57BL/6小鼠胸腺瘤的发生率为72.73%,MSCs注射组的发生率为20%。结论辐射诱导C57BL/6小鼠胸腺瘤模型建立成功;MSCs可降低辐射诱导C57BL/6小鼠胸腺瘤的发生率。
- 姚月良陈玉丙韩志龙王铁君葛立本
- 关键词：骨髓间充质干细胞电离辐射胸腺瘤
- Rac1 shRNA对卵巢癌细胞株Skov3生物学行为的影响被引量：1
- 2011年
- 目的为Rac1 shRNA治疗卵巢癌提供实验依据。方法 Rac1 shRNA载体pGPU6/GFP/Rac1-524以L ipofectim ineTM2000介导转染卵巢癌细胞株Skov3,Transwell肿瘤细胞迁移和侵袭实验检测转染细胞的迁移和侵袭能力,W estern印迹分析转染细胞MMP2蛋白的表达情况。结果转染Rac1 shRNA载体pGPU6/GFP/Rac1-524组、转染非特异shRNA载体pGPU6/GFP/NC组和未转染组迁移到滤膜底面的细胞数分别为97±21、319±75、365±92,而侵袭到滤膜底面的细胞数分别为79±22、285±63、324±84,转染Rac1 shRNA载体组与转染pGPU6/GFP/NC组、未转染组比较差异显著(P<0.05),转染pGPU6/GFP/NC组与未转染组相比无统计学意义(P>0.05)。转染Rac1 shRNA载体pGPU6/GFP/Rac1-524组MMP2蛋白的表达量下降。结论 Rac1 shRNA载体pGPU6/GFP/Rac1-524可有效抑制卵巢癌细胞Skov3的迁移和侵袭,该抑制作用可能是通过调控MMP2的表达而实现的。
- 王虹张菊青陈玉丙张红梅崔满华
- 关键词：RACLRNA干扰卵巢癌
