国家科技重大专项(2012ZX10002004-006)
- 作品数：10 被引量：59H指数：3
- 相关作者：段钟平郑素军周莉陈德喜任锋更多>>
- 相关机构：首都医科大学附属北京佑安医院河北医科大学第三医院山西医科大学第二医院更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项北京市卫生系统高层次卫生技术人才培养项目国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝纤维化抵抗对乙酰氨基酚诱导的致死性损伤及其机制被引量：3
- 2015年
- 目的 证明四氯化碳（CCl4）诱导的肝纤维化能够保护小鼠抵抗致死性对乙酰氨基酚（APAP）攻击,并初步探讨其发挥保护作用的机制. 方法 建立CCl4诱导的肝纤维化小鼠模型,于纤维化6周时以致死剂量的APAP（1 g/kg）进行攻击,以同样处理的正常小鼠作为对照.即实验共分为4组：对照组、急性损伤组（APAP组）、肝纤维化组（Fib组）、肝纤维化＋急性攻击组（Fib＋APAP组）,每组5只.根据攻击前后小鼠生存率、转氨酶水平及肝组织学的变化来评估正常和纤维化小鼠对致死性APAP损伤的耐受性.免疫组织化学法分析各组小鼠肝组织中高迁移率族蛋白1（HMGB1）的表达.组间差异的比较采用One-way ANOVA分析和Newman-Keuls检验. 结果 接受APAP攻击的纤维化小鼠的肝损害程度明显轻于同样处理的正常小鼠,表现为：（1） Fib＋APAP组小鼠的生存率明显高于APAP组（80％对比0）; （2） Fib＋APAP组小鼠的sALT升高水平显著低于APAP组[（6437±1 913） U/L对比（12 456±3 441） U/L],P=0.022,攻击前后,正常小鼠的sALT水平升高了257.4倍,而纤维化小鼠则仅升高了12.2倍;（3） Fib＋APAP组的肝组织学检查结果较APAP组明显改善.免疫组织化学分析结果表明,APAP组小鼠肝组织中HMGB1呈高表达,并且可见明显的HMGB1由胞核向胞质转位,而Fib＋APAP组HMGB1的表达明显弱于APAP组,且胞质转位少见.结论 CCl4诱导的肝纤维化可能通过限制HMGB1的胞质转位及其所触发的损伤效应而保护小鼠抵抗致死性APAP的攻击.
- 白丽祖可佳张晓慧任锋郑素军陈煜段钟平
- 关键词：肝硬化对乙酰氨基酚
- 维生素D在丙型肝炎中作用的研究进展被引量：2
- 2014年
- 维生素D经典的生物学作用在于调节体内钙、磷代谢。近几年研究发现，维生素D与癌症、心血管疾病、自身免疫性疾病、感染性疾病等有相关陛。在研究丙型肝炎时也发现，维生素D在慢性丙型肝炎患者体内普遍缺乏，而且能够影响感染者抗病毒治疗的疗效，与肝脏疾病的进展也密切相关。现就维生素D在丙型肝炎中作用的研究进展做一综述。
- 任艳段钟平韩源平郑素军
- 关键词：维生素D
- 急性肝衰竭预后评估系统及研究进展被引量：1
- 2012年
- 急性肝衰竭病情进展迅速,除肝脏移植外目前缺乏比较有效的内科治疗手段,死亡率高。随着肝脏移植手术开展和普及,对急性肝衰竭患者进行早期准确的预后评估,对患者下一步的临床治疗决策至关重要。我们对目前主要急性肝衰竭预后模型做一综述,分析其优点及局限性,希望国内能加强相关的研究。
- 段钟平朱陇东
- 关键词：急性肝衰竭预后模型
- 过氧化物酶体增殖物激活受体α对小鼠急性肝衰竭的作用与机制被引量：3
- 2014年
- 目的：探讨过氧化物酶体增殖物激活受体α（ PPARα）对D-氨基半乳糖（ D-GalN）联合脂多糖诱导的小鼠急性肝衰竭（ALF）的作用与机制。方法将C57BL/6小鼠按随机数字表法随机分为对照组、ALF组、WY14643组、3-MA＋WY14643组、对照小干扰RNA（ siRNA）＋WY14643组、自噬相关基因ATG7 siRNA（siAtg7）＋WY14643组，每组8只。通过腹腔注射溶于生理盐水中的D-GalN （700 mg/kg）联合脂多糖（10μg/kg）构建小鼠ALF模型。 WY14643作为PPARα的选择性激动剂于造模前2 h以6 mg/kg通过尾静脉注射；3-MA作为自噬抑制剂于造模前2 h以10 mg/kg通过尾静脉注射；siAtg7作为自噬抑制剂于造模前48 h以50μmol· L^-1· kg^-1过尾静脉注射；对照siRNA于造模前48 h以50μmol· L^-1· kg^-1过尾静脉注射。在D-GalN联合脂多糖注射造模后6 h麻醉小鼠取血，获取肝组织并迅速提取mRNA。组织病理学分析及血清转氨酶活性测定观察肝组织损伤的严重程度；实时定量PCR检测自噬相关基因ATG5、ATG7、溶酶体相关膜蛋白1（LAMP1）及肿瘤坏死因子（ TNF）-α、白细胞介素（ IL）-1β、IL-6、趋化因子配体（ CXCL）-1、CXCL-10的mRNA表达；蛋白质印迹检测自噬相关蛋白LC3、ATG5、ATG7、LAMP1的表达。结果与ALF组相比，WY14643组小鼠肝小叶结构较完整，部分肝细胞呈气球样变，小叶内及汇管区炎细胞浸润不明显，血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）水平较低[（486±56）比（2705±423） U/L，（795±115）比（3709±820）U/L，均P＜0.05]，自噬相关基因LAMP1和蛋白表达更高（mRNA：4.28±0.57比2.67±0.43，P＜0.05）；与WY14643组相比，3-MA＋WY14643组和siAtg7＋WY14643组肝细胞呈大片状坏死，肝索解离，肝小叶结构无法辨认，汇管区及坏死区可见大量中性粒细胞和淋巴细胞等炎细胞浸润，血清ALT、AST水平更高[（2563±576）、（2148±221）U/L和（3474±858）�
- 焦明静任锋周莉段钟平赵彩彦
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体肝功能衰竭自噬炎症
- 内质网应激在D-氨基半乳糖／脂多糖诱导小鼠急性肝衰竭中的作用被引量：11
- 2014年
- 目的研究内质网应激在D-氨基半乳糖／脂多糖联合注射诱导小鼠急性肝衰竭致病机制中的作用。方法以C57BL／6小鼠为研究对象，腹腔注射D-氨基半乳糖／脂多糖建立小鼠急性肝衰竭模型。动物分为对照组、急性肝衰竭模型组、4-丁酸苯酯干预组（建模前6h腹腔注射）。Westemblot方法检测肝组织内质网应激标志物蛋白表达水平，检测血清ALT、AST水平评价肝脏功能，观察肝脏组织病理学变化评价肝脏损伤情况，实时荧光定量PCR检测肝细胞炎症因子如肿瘤坏死因子（TNF）α、白细胞介素（IL）-6和IL-1β基因表达情况，凋亡细胞原位末端转移酶标记试验法检测肝细胞凋亡情况。多组间均数比较采用单因素方差分析，两样本均数比较采用成组设计t检验；对于小鼠的生存分析，应用两两比较的Logrank检验。结果Westernblot方法结果显示，内质网应激蛋白标志物葡萄糖调节蛋白78和葡萄糖调节蛋白94随着急性肝衰竭的进展表达水平逐渐升高；非折叠蛋白反应蛋白1型内质网跨膜蛋白激酶1α、X盒结合蛋白1、活化转录因子6在急性肝衰竭早期被激活，而内质网应激诱导的凋亡蛋白CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白和caspasel2在急性肝衰竭晚期表达升高。4-丁酸苯酯抑制内质网应激可显著改善肝炎症[ALT：（1227．7±301．1）u／L与（727．5±412．5）u／L，P〈0．05；AST：（1682．9±580．2）u／L与（744．9±267．5）U／L，P〈0．051，并且抑制炎症因子的表达（TNFα：1．55±0．47与0．63±0．20，P〈0．05；IL-1β：7．39±2．03与4．51±1．44，P〈0．05；IL-6：0．43±0．14与0．18±0．03，P〈0．05）；凋亡细胞原位末端转移酶标记试验和Westemblot方法研究结果表明，4-丁酸苯酯干预内质网应激可显著抑制肝细胞凋亡，并降低了剪切型caspase3表达。结论内质网应激在D-氨基半乳糖／脂多糖诱导小鼠急性
- 任锋杨丙章张向颖温韬王欣欣殷继明朴正福郑素军张晶陈煜陈德喜段钟平
- 关键词：肝功能衰竭急性脂多糖类炎症内质网应激
- 内质网应激调控糖原合成酶激酶3β活性在小鼠急性肝衰竭致病中的作用被引量：1
- 2016年
- 目的：研究严重内质网应激介导糖原合成酶激酶3β（ GSK3β）活性在小鼠急性肝衰竭肝损伤病理机制中的作用。方法以C57BL／6小鼠为研究对象，腹腔注射D-氨基半乳糖（ D-GalN）和脂多糖（ LPS）诱导小鼠急性肝衰竭模型。动物实验分组：阴性对照组（ n＝10）、急性肝衰竭模型组（n＝18）、4-丁酸苯酯（4-PBA，内质网应激抑制剂）干预组（n＝18）和SB216763（GSK3β特异性抑制剂）干预组（n＝16）。检测血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）评价肝脏功能，观察肝脏组织病理变化评价肝脏损伤情况，免疫印迹方法检测肝脏组织中蛋白表达水平， GSK3β活性检测试剂盒检测肝脏组织中GSK3β活性改变，四甲基偶氮唑盐（ MTT）法检测细胞生存率。结果体内实验表明，在D-GalN／LPS诱导的急性肝衰竭过程中，内质网应激标志蛋白葡萄糖调节蛋白78（ GRP78）和特异性凋亡分子CCAAT／增强子结合蛋白同源蛋白（CHOP）的表达逐渐升高，提示严重内质网应激被激活，同时GSK3β活性也逐渐升高。4-PBA抑制内质网应激可显著改善肝脏功能[ALT：（365.4±58.6）比（1094.5±201.5）U／L；AST：（555.1±60.8）比（1444.3±533.7）U／L，均P＜0.05]和病理损伤，此外，4-PBA还抑制急性肝衰竭小鼠肝脏中GSK3β的活性（2.6±0.3比4.6±1.3，P＜0.05）。进一步研究表明，抑制GSK3β活性能够下调CHOP和GRP78的表达而改善急性肝衰竭肝损伤。衣霉素诱导肝细胞凋亡的体外实验表明，抑制GSK3β活性能够促进细胞生存。结论在D-GalN／LPS诱导的急性肝衰竭过程中，严重内质网应激通过上调GSK3β活性而促进急性肝衰竭的发生和发展。
- 高虹张向颖岳莉英刘兆玉贾妮娜陈德喜段钟平任锋
- 关键词：炎症内质网应激糖原合成酶激酶3Β
- Caspase-1介导糖原合酶激酶-3β促进D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导的小鼠急性肝衰竭肝损伤被引量：2
- 2016年
- 目的研究半胱氨酸天冬氨酸特异性蛋白水解酶-1（caspase-1）在D-氨基半乳糖（D—GaIN）联合脂多糖（LPS）诱导的小鼠急性肝衰竭（ALF）中的作用及其可能机制。方法以C57BL／6小鼠为研究对象，通过腹腔注射溶于生理盐水的D—GaIN（450rag／kg）联合LPS（10μg/kg）构建小鼠ALF模型；将小鼠分为对照组、氟甲基酮（easpase-1抑制剂，Z—WEHD—FMK）单独处理组、ALF组、Z—WEHD—FMK干预组。组织病理学分析及血清转氨酶活性测定观察肝组织损伤严重程度；Westernblot检测肝脏组织中easpase-1以及糖原合激酶-3β（GSK-3β）磷酸化的表达；qRT—PCR检钡4细胞炎症因子基因表达。结果easpase-1mRNA和蛋白水平在急性肝衰竭疾病进展过程中活性升高。给予Z—WEHD—FMK抑制caspase-1活性后，可显著改善肝脏病例损伤并且降低血清ALT、AST水平[AIJT：z—wEHD—FMK干预组（479．2±39．5）U／L，ALF组（998．5±60．4）U／L，P〈0．05；AST：Z—WEHD—FMK干预组（478．5±28．6）U／L，ALF组（1180．7±91．4）U／L，P〈0．05]；此外，z—WEHD—FMK干预组炎症因子TNF-α、IL-1β、IL-18、IL-33的mRNA水平表达下调；Westernblot显示z—WEHD—FMK抑制caspase-1活性后，GSK-3β发生磷酸化而活性受抑制。结论急性肝衰竭疾病进展过程中，caspase-1活化提高了GSK-3β活性，促进炎症反应的发生并导致肝脏组织的损伤。
- 杨蓉蓉任锋张莉张向颖时红波陈德喜段钟平王琦
- 关键词：CASPASE-1糖原合酶激酶-3Β肝功能衰竭
- 北京地区住院肝病患者营养风险的状况被引量：35
- 2013年
- 目的 目前对我国住院肝病患者营养状况的了解不多.本研究拟调查住院肝病患者的营养风险及营养不良发生率,分析其营养风险和预后的关系,为进一步临床干预提供参考信息. 方法 选取我院人工肝中心2012年4月至2012年12月住院的肝病患者331例,用实际体质量占理想体质量百分比、三头肌皮褶厚度（TSF）及上臂肌围（MAMC）评价其营养状况.用营养风险筛查2002表评估患者营养风险.同时记录患者的体质量指数、握力、白蛋白、前白蛋白、淋巴细胞计数、住院天数、住院期间并发症隋况、有无酗酒史和出院转归.对存在肝硬化的患者记录其入院时和出院时的肝功能Child-Pugh分级.均值比较用t检验,率的比较用x2检验或Firsher’s精确检验.结果 入院时有营养风险的患者共有113例,占34.1％,其中慢性肝炎组有营养风险的比例最低,为17.02％；慢加急性肝衰竭组有营养风险的比例最高,达56.52％.用TSF和MAMC评价患者营养状况,其总体营养不良发生率分别为36.9％和38.7％.有营养风险的肝硬化/肝癌患者中Child-Pugh分级C级的比例显著高于无营养风险的患者.有酗酒史的患者,用TSF评价其营养状况,存在营养不良的比例高于无酗酒史的患者.有营养风险者的体质量指数及握力、入院时的白蛋白、前白蛋白及淋巴细胞计数均低于无营养风险者,平均住院天数、并发症的发生率、死亡比例均明显高于无营养风险者. 结论 目前北京地区住院肝病患者有较高比例的营养风险及营养不良状态.TSF、MAMC均可用于评估住院肝病患者的营养状态.经营养风险筛查2002评估为有营养风险的肝病患者,其临床预后较差,需要积极进行营养干预.
- 郭会敏周莉马文晨朱彦涛王燕王静孙晓玲张长青段钟平
- 关键词：肝疾病营养调查营养不良
- 过氧化物酶体增殖物激活受体α对D-氨基半乳糖联合脂多糖诱导的小鼠急性肝衰竭的保护作用与机制被引量：4
- 2014年
- 目的 研究过氧化物酶体增殖物激活受体α（PPAR α）对D-氨基半乳糖（D-GalN）联合脂多糖（LPS）诱导的小鼠急性肝衰竭（ALF）的保护作用及其机制.方法 第一部分实验将C57BL/6小鼠按随机数字表法随机分为对照组、ALF 2h组、ALF 4h组、ALF 6h组,每组8只;第二部分实验将C57BL/6小鼠按随机数字表法随机分为对照组、ALF组、WY14643组,每组8只.前后两部分实验的给药方式一样,通过腹腔注射溶于生理盐水中的D-GalN （700 mg/kg）联合LPS（10 μg/kg）构建小鼠ALF模型;WY14643作为PPARα的选择性激动剂于造模前2h以6 mg/kg通过尾静脉注射.第一部分实验分别在D-GalN/LPS注射后及注射后2h、4h、6h麻醉小鼠取血,获取肝组织并迅速提取mRNA;第二部分实验在D-GalN/LPS注射后6h麻醉小鼠取血,获取肝组织并迅速提取mRNA,mRNA和肝组织都在-80℃储存供以后分析使用.组织病理学分析及血清转氨酶活性测定观察肝组织损伤的严重程度;实时定量PCR检测促炎性细胞因子TNFα、IL-1β、IL-6以及趋化因子（CXCL）-1、CXCL-10的mRNA表达;蛋白质印迹检测炎症信号通路相关蛋白（磷酸化的NF-κBp65、JNK、ERK、p38）的表达.结果 PPAR α的mRNA和蛋白在急性肝衰竭疾病进展过程中表达逐渐减少.在给予WY14643激活PPAR α后,与ALF组相比,WY14643组肝小叶结构较完整,部分肝细胞呈气球样变,小叶内及汇管区炎细胞浸润不明显,血清ALT、AST水平较低[ALT：WY14643组（555±62）U/L,ALF组（2 898±822） U/L,P＜0.05;AST：WY14643组（791±58） U/L,ALF组（3 013±997）U/L,P＜0.05],促炎性细胞因子、趋化因子的mRNA及磷酸化的NF-κB p65、ERK、JNK蛋白表达减少,且差异具有统计学意义.在对照组、ALF组、WY14643组基因表达结果显示,TNFα的相对表达量分别为0.161±0.085、7.996±1.068、3.346±0.942,P＜0.05;IL-1β的相对表达量分别为0.041±0.002、3.657±0.904、0.176±0.089,P＜0.01;IL-6的相对表�
- 焦明静任锋周莉段钟平赵彩彦
- 关键词：过氧化物酶体增殖物激活受体炎症
- 人工肝治疗患者家属健康教育需求调查分析
- 2013年
- 人工肝是借助体外机械、化学或生物性装置，暂时及部分替代肝脏功能．从而协助治疗肝功能不全、肝衰竭或相关肝脏疾病的方法。人工肝治疗患者家属对治疗的认知程度会影响到患者对治疗的接受度，影响到患者病情。为此，我们对2010年6月至2012年3月进行人工肝治疗的126例患者家属进行了健康教育需求调查。报告如下。
- 李颖孔明段钟平郑素军
- 关键词：家属健康教育患者家属人工肝肝功能不全肝脏功能
