湖北省科技攻关计划(2004AA202B03)
- 作品数：3 被引量：15H指数：2
- 相关作者：陈思怀张涌魏庆信郑新民华文君更多>>
- 相关机构：西北农林科技大学湖北省农业科学院西南农业大学更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 多重RT-PCR快速检测禽流感病毒的研究被引量：11
- 2006年
- 参考H1-H15亚型禽流感病毒(AIV)的核蛋白(NP)基因序列以及H5、H6、H9亚型AIV血凝素(HA)基因,共设计4对引物,建立了2对引物扩增AIV的NP、HA基因的多重RT-PCR方法。应用此法分别对H5、H6、H9亚型AIV尿囊液RT-PCR,电泳,回收预期片段进行测序,并同Genebank的注册序列进行同源性分析。也对NDVI、BVI、BDV尿囊液以及3种亚型AIV尿囊液的2倍系列稀释样品进行检测。结果表明,3种亚型AIV尿囊液均出现2条特异性条带,经测序确证为目的扩增片段,BLAST的同源性初步判断3种AIV的亚型为H5N1、H6N2、H9N20对NDVI、BVI、BDV的RNA扩增未见2条目的条带,判断为阴性,说明该法特异性强;能对3种亚型AIV尿囊液64～128倍稀释的样品检测出AIV,表明其灵敏度高。该检测法检测的整个过程仅需4h,实现了AIV的快速检测。
- 陈思怀乔宪凤华文君郑新民魏庆信张涌
- 关键词：禽流感
- H_6N_2亚型禽流感病毒血凝素基因的克隆及其序列分析被引量：1
- 2006年
- 设计特异引物,采用RT-PCR技术,成功从本实验室分离、保存的H6N2禽流感病毒毒株(HB 2002)中克隆到血凝素基因(HA)序列,该克隆基因全长1 714 bp,提交GenBank,获得登录号DQ 285546。同部分H6,H5,H7,H9亚型禽流感病毒HA基因序列分析表明,该基因核酸、氨基酸序列与A/duck/Hainan/4/2004(H6N2),A/duck/HongKong/3600/99(H6N2)毒株有99%的相似性;分子进化分析结果显示,该基因与此2毒株亲缘关系最近。由该克隆核酸序列推导的HA蛋白共566个氨基酸,该蛋白同其他H6亚型AIV的HA蛋白有相同裂解位点序列即PQIETR↓G,无高致病性毒株典型的裂解位点特征,因此,初步判定毒株HB 2002为低致病性禽流感病毒。
- 陈思怀乔宪凤华文君郑新民魏庆信黎晓敏张涌
- 关键词：禽流感病毒血凝素基因克隆
- 禽流感分子生物学诊断技术研究进展被引量：4
- 2005年
- 禽流感不但造成养禽业的巨大经济损失,而且也严重威胁着人类公共卫生安全。检测禽流感病毒是诊断的关键。分子生物学检测技术较常规检测方法快速、准确、灵敏。通过对核酸杂交技术、常规RT-PCR技术、实时RT-PCR技术、PCR-ELISA技术、核酸依赖的扩增技术(NASBA)、环介导的等温扩增技术(LAMP)以及基因芯片等诊断技术的基本原理、检测优点以及应用现状进行综述,为禽流感的诊断提供参考。
- 陈思怀乔宪凤魏庆信张涌
- 关键词：禽流感PCRNASBALAMP基因芯片
