湖北省科技攻关计划(2004AA202B04)
- 作品数：3 被引量：23H指数：3
- 相关作者：谷长勤胡薛英张万坡程国富宋念华更多>>
- 相关机构：华中农业大学湖北省动物疫病诊断中心武汉生物工程学院更多>>
- 发文基金：湖北省科技攻关计划更多>>
- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- H_9N_2亚型禽流感病毒诱导蛋鸡免疫器官细胞凋亡的动态变化被引量：12
- 2008年
- 应用末端脱氧核苷酸转移酶介导的生物素化的dUTP切口末端标记(即TUNEL)法和透射电镜(TEM),对人工感染H9N2亚型禽流感病毒蛋鸡的脾脏、胸腺、法氏囊和盲肠扁桃体进行了细胞凋亡动态研究。结果显示,感染蛋鸡脾脏、胸腺、法氏囊中细胞凋亡率升高。接种后3d,脾脏和法氏囊的细胞凋亡率升至最高值分别为6.2%和1.7%,随后下降,但在接种后14d仍显著高于对照组(P<0.05)。胸腺的细胞凋亡率从接种后3～21d均极显著地高于对照组(P<0.01)。而盲肠扁桃体的细胞凋亡率在整个试验期间变化不明显。电镜下凋亡细胞呈典型的形态学特征:细胞染色质固缩并凝结成块,聚集在核膜周边呈新月状或环状小体。结果表明,H9N2亚型禽流感病毒感染蛋鸡能诱导免疫器官的细胞凋亡。
- 谷长勤罗玲胡薛英张万坡周诗其程国富
- 关键词：细胞凋亡H9N2亚型禽流感病毒蛋鸡
- H9N2亚型禽流感病毒原位杂交检测方法的建立被引量：8
- 2005年
- 根据已知禽流感病毒(Avianinfluenzavirus,AIV)核蛋白(NP)基因序列,选取其中保守区域设计出1对引物,以RT-PCR方法扩增出543bp的NP基因片段,采用地高辛标记制备探针。MDCK细胞人工感染H9N2亚型禽流感病毒后,不同时间取样制备细胞涂片,进行原位杂交,研究了禽流感病毒对MDCK细胞的感染,探讨了原位杂交的条件及其应用于检测AIV感染的可行性。结果显示,感染24h后,原位杂交可检测出细胞内的病毒RNA,并且杂交信号的强度与感染时间的长短有关。研究表明,原位杂交检测禽流感病毒,不但能很好地表现病毒和细胞的位置关系,而且具有较好的特异性和灵敏性,为禽流感病毒的组织原位杂交检测奠定了实验基础。
- 张万坡程国富谷长勤李德学宋念华毕丁仁胡薛英胡思顺胡智斌
- 关键词：原位杂交禽流感病毒MDCK细胞
- 禽流感H5和H9亚型基因探针的制备被引量：3
- 2007年
- 参照GeneBank数据库上H5N1和H9N2 AIV的HA基因序列,选取保守区域,设计了两对引物,分别用于扩增HA基因,产物纯化回收得到180bp和285bp cDNA片段,采用随机引物法Digxigenin-11-dUTP标记得到探针H5PR和H9PR,通过斑点杂交检测,结果表明探针的灵敏度高和特异性好,可以进行相关性试验。
- 方浩宋念华姚志伟熊元林王松太
- 关键词：禽流感病毒斑点杂交
