国家自然科学基金(81160044)
- 作品数：16 被引量：93H指数：5
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- p38MAPK通路介导胰高血糖素样肽-1对人脐静脉内皮细胞凋亡的抑制被引量：2
- 2012年
- 本文旨在探讨胰高血糖素样肽-1 (glucagon-like peptide-1, GLP-1)对棕榈酸盐诱导的人脐静脉内皮细胞(human umbili-cal vein endothelial cells, HUVECs)凋亡的影响及其机制。体外培养HUVECs,用棕榈酸盐诱导其凋亡,同时加入GLP-1干预。酶联接免疫吸附剂测定(enzyme-linked immunosorbnent assay, ELISA)法分别测定Caspase-3活性和DNA碎片含量,Westernblot测定磷酸化细胞丝裂原活化蛋白激酶(phospho-p38 mitogen-activated protein kinase, p-p38 MAPK)表达。结果显示,与对照组相比,棕榈酸盐处理的HUVECs中Caspase-3活性和DNA碎片含量显著增多;而GLP-1可呈剂量依赖性降低棕榈酸盐所诱导升高的Caspase-3活性和DNA碎片。另外,GLP-1显著抑制由棕榈酸盐诱导的HUVECsp-p38 MAPK表达上调。以上结果提示,GLP-1可以抑制棕榈酸盐诱发的HUVECs脂性凋亡,其机制可能是对p-p38 MAPK表达的下调。
- 徐华李海龙牛自勇李桂忠曹军姜怡邓
- 关键词：胰高血糖素样肽-1P38MAPK凋亡
- 同型半胱氨酸引起平滑肌细胞LDLR启动子区DNA甲基化改变的位点分析被引量：5
- 2012年
- 目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)引起平滑肌细胞低密度脂蛋白受体(LDLR)启动子区DNA甲基化改变的特点及机制。方法原代培养人脐静脉平滑肌细胞(VSMCs)并鉴定,用50、100、200、500μmol·L-1Hcy干预,巢式降落式甲基化特异性PCR(nMS-PCR)法检测LDLR甲基化改变,甲基敏感性限制性内切酶HpaII和BssHII分析LDLR DNA甲基接受能力。结果 50、100、200、500μmol·L-1Hcy组平滑肌细胞LDLR启动子区DNA去甲基化(P<0.05),经限制性内切酶HpaII消化后,LDLR启动子区C↓CGG序列被酶切,经限制性内切酶BssHII消化后,LDLR启动子区GC↓GCGC序列被酶切,与对照组比较,DNA甲基接受能力下降,其中HpaII引起的效果更明显。结论 Hcy可使平滑肌细胞LDLR启动子区DNA去甲基化的效应偏重于一般的CpG二核苷酸序列,CpG岛所受影响相对较小。
- 杨安宁王菊杨晓玲马长剑孙炜炜马胜超王磊徐华姜怡邓
- 关键词：同型半胱氨酸低密度脂蛋白受体DNA甲基化平滑肌细胞
- HHcy对ApoE^(-/-)鼠动脉粥样硬化的影响及叶酸、VB_(12)的干预效应被引量：3
- 2011年
- 目的探讨高同型半胱氨酸血症(HHcy)对ApoE-/-鼠动脉粥样硬化(AS)形成的影响及叶酸、维生素B1(2VB12)的干预效应。方法健康5周龄雄鼠(SPF级C57BL/6J)作为对照组,饲以普通饮食。另选5周龄雄性纯合子ApoE-/-鼠(SPF级近交系C57BL/6J)36只,随机平均分为高脂血症组、HHcy组、干预组。喂养14周后,取血测定血清Hcy及血脂水平,取主动脉进行石蜡包埋并切片,HE染色后检测主动脉斑块面积及内中膜厚度。结果 HHcy组血清同型半胱氨酸(Hcy)水平明显高于对照组与干预组(P<0.001),与对照组比较,其血脂LDL、TG、CHOL分别升高约2.2、7.6、7.2倍,HDL下降约63%(P<0.001)。HE染色可见三组ApoE-/-鼠均有AS斑块形成,HHcy组主动脉斑块面积6.21×105μm2明显大于高脂血症组3.99×105μm2与干预组4.41×105μm(2P<0.05)。AS斑块面积与其血清Hcy水平呈正相关(r=0.4898,P<0.001)。结论 HHcy导致ApoE-/-鼠AS病变形成,且病变程度依赖血清Hcy水平,叶酸和VB12的干预可有效缓解HHcy引起的血管损伤。
- 巩慧慧王菊孙炜炜马胜超马琳娜姜怡邓
- 关键词：叶酸维生素B12动脉粥样硬化
- 糖尿病并发症相关性氧化应激的实验研究被引量：3
- 2012年
- 目的链脲佐菌素(STZ)诱导大鼠1型糖尿病模型的基础上,探讨糖尿病氧化应激指标的变化。方法采用一次性腹腔注射STZ的方法,监测不同时点大鼠的空腹血糖、体质量及血浆中的丙二醛(MDA)和超氧化物歧化酶(SOD)等指标,并对结果进行统计学处理。结果大鼠注射STZ 72h后血糖值达到成模标准,并逐渐出现糖尿病表现,观察7周,始终满足成模标准,未见转复。DM组大鼠肾脏及肝脏肥大指数较CON组显著增加。氧化应激相关指标测定表明,较对照组相比,实验组大鼠血浆中脂质过氧化产物MDA水平显著升高,而SOD水平显著下降。结论本实验Ⅰ型糖尿病模型大鼠造模成功且模型稳定,氧化应激指标改变。
- 徐华纳春祥李海龙李桂忠曹军姜怡邓
- 关键词：糖尿病链脲佐菌素氧化应激
- 凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1甲基化在同型半胱氨酸作用下对人内皮细胞存活的影响被引量：5
- 2013年
- 目的 :探讨凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1(LOX-1)甲基化在同型半胱氨酸(Hcy)对动脉粥样硬化过程中降低内皮细胞存活率的作用机制研究。方法 :按不同浓度的Hcy对人脐静脉内皮细胞作用分组:对照组(0μM Hcy)、50μM Hcy组、100μM Hcy组、200μM Hcy组和500μM Hcy组;②100μM Hcy+30μM维生素B12+30μM叶酸组(拮抗剂组),各组(n=5)培养液孵育72 h后,采用3-(4,5)-双甲基-2-噻唑-(2,5)-2苯基溴化四氮唑蓝试验检测Hcy对内皮细胞活性的影响;用分光光度比色法检测各组细胞中过氧化氢;酶免法检测氧化低密度脂蛋白、甲基转移酶-1(DNMT-1)含量;荧光定量聚合酶链式反应(PCR)测LOX-1和DNMT-1 mRNA的表达;蛋白免疫印迹法测LOX-1蛋白的表达;巢式降落式PCR法测LOX-1基因甲基化的改变。结果 :同型半胱氨酸对人脐静脉内皮细胞存活率的影响:拮抗剂组与对照组比较差异无统计学意义(P>0.05)。100、200、500μMHcy组与对照组比较:氧化低密度脂蛋白和过氧化氢的含量、LOX-1信使核糖核酸(mRNA)相对甘油醛-3-磷酸脱氢酶(GAPDH)表达量及LOX-1蛋白相对β-肌动蛋白表达量均增加;DNMT-1的含量和mRNA表达、LOX-1基因甲基化程度均降低,差异均有统计学意义(P<0.001)。结论 :LOX-1低甲基化可能是Hcy致内皮细胞损伤的重要机制之一,其中过氧化氢、氧化低密度脂蛋白和DNMT-1可能起了重要的作用。
- 马胜超孙炜炜巩慧慧马长剑王菊田珏姜怡邓
- 关键词：同型半胱氨酸甲基化人脐静脉内皮细胞凝集素样氧化低密度脂蛋白受体-1
- 叶酸、维生素B12对HHcy小鼠血清TNF-α、IL-6干预作用的研究
- 2014年
- 目的:探讨叶酸、维生素B12(VB12)对高同型半胱氨酸血症(HHcy)ApoE-/-小鼠血清TNF-α、IL-6的干预效应。方法健康5周龄雄性纯合子ApoE-/-小鼠(SPF级近交系)36只,随机平均分为三组:模型对照组、HHcy组、干预组;另选健康5w龄雄鼠(SPF级C57BL/6J)12只作为正常对照组。喂养18w后处死,眼球取血并采用酶联免疫吸附实验(Elisa)方法测定血清Hcy及TNF-α、IL-6水平。结果 HHcy组血清同型半胱氨酸Hcy、TNF-α、IL-6水平明显高于正常对照组与模型对照组(P<0.01);干预组Hcy、TNF-α(P<0.01)、IL-6(P<0.05)水平与HHcy组相比均有所下降。结论叶酸、VB12可有效降低HHcy ApoE-/-小鼠血清TNF-α、IL-6的水平,缓解HHcy引起的血管损伤。
- 焦运周龙霞杨安宁陈久凯杨晓玲曹军姜怡邓
- 关键词：叶酸维生素B12高同型半胱氨酸血症
- 线粒体DNA氧化损伤在高同型半胱氨酸血症致载脂蛋白E-/-鼠心肌损伤中的作用
- 目的：探讨线粒体氧化损伤在高蛋氨酸饮食诱导载脂蛋白E-/-鼠心肌病变中的作用.方法：以12只健康5周龄雄鼠(SPF级C57BL/6J)作为对照组,饲以普通饮食.另选5周龄雄性纯合子载脂蛋白-/-鼠(SPF级近交系C57B...
- 杨晓玲马长剑马胜超巩慧慧孙炜炜王菊姜怡邓
- 关键词：高同型半胱氨酸血症线粒体DNA心肌损伤
- Hcy对动脉粥样硬化小鼠肝脏脂质代谢的影响被引量：11
- 2014年
- 目的探讨同型半胱氨酸(Hcy)促进ApoE基因敲除(ApoE-/-)鼠动脉粥样硬化(AS)形成同时是否对肝脏脂质代谢产生影响。方法取健康5周龄雄鼠(SPF级C57BL/6J)12只作为正常对照组,饲以普通饮食;另选5周龄雄性纯合子ApoE-/-鼠(SPF级近交系C57BL/6J)36只,分为模型对照组、高同型半胱氨酸血症(HHcy)组、叶酸和VB12干预的干预组,每组12只,饲养18周后,生化分析仪测定血清Hcy及血脂总胆固醇(CHOL)、三酰甘油(TG)、高密度脂蛋白(HDL)、低密度脂蛋白(LDL)水平,主动脉冰冻切片苏木素-伊红(HE)染色后观察并测量斑块面积;肝脏组织冰冻切片油红O染色观察肝脏细胞脂质变化,酶法测定肝脏脂质代谢改变。结果与正常对照组比较,HHcy组血清Hcy、LDL、TG、CHOL水平明显增高(P<0.01),分别升高约2.3、2.8、5.0、10.7倍,HDL下降约64%(P<0.01);干预组Hcy、LDL、CHOL水平较HHcy组分别下降43%、34%、21%,HDL水平增高36%(P<0.05),TG无明显变化;HE染色可见3组ApoE-/-鼠主动脉均有AS形成,其中HHcy组主动脉斑块面积28.2×104μm2,明显大于模型对照组的17.0×104μm2(P<0.05),干预组斑块面积17.1×104μm2,较HHcy组减轻(P<0.05)。肝脏油红O染色HHcy组脂质积累明显;干预组肝细胞内有少量脂质沉积;氧化酶法检测发现HHcy组肝脏组织中CHOL和TG分别是正常对照组的2.2、2.8倍(P<0.01);干预组肝脏CHOL、TG水平与HHcy组比较下降30%、33%(P<0.01)。结论 Hcy促进ApoE-/-鼠AS形成的同时加速肝脏脂代谢紊乱。
- 卢冠军杨安宁蔡欣哈丽娜杨晓玲姜怡邓
- 关键词：脂类代谢动脉粥样硬化
- 小鼠组织SAM和SAH在动脉粥样硬化评价中的应用被引量：1
- 2012年
- 目的探讨S-腺苷同型半胱氨酸(S-adenosyl Homocysteine,SAH)和S-腺苷甲硫氨酸(S-Adenosyl-methionine,SAM)在载脂蛋白E基因敲除(ApoE-/-)小鼠动脉粥样硬化(Atherosclerosis,AS)评价中的应用。方法采用高效液相色谱法(High Performance Liquid Chromatography,HPLC)检测各组ApoE-/-小鼠(模型对照组、高蛋氨酸饮食组、叶酸和维生素B12治疗组)心脏、肝脏、肾脏组织中SAM和SAH含量的变化,并与正常对照组比较。HE染色光镜观察各组主动脉病理学改变。结果 HPLC实验数据表明,正常对照组、模型对照组、高蛋氨酸饮食组的小鼠心脏、肝脏、肾脏组织中SAM、SAH的含量依次增加,治疗组小鼠心脏、肝脏、肾脏组织中SAM、SAH的含量则有所降低,与正常对照组比较差异均有统计学意义(P<0.05)。与模型对照组比较,肾脏高蛋氨酸饮食组SAM、SAH含量差异有统计学意义(P<0.05),治疗组肝脏、肾脏SAM、SAH含量差异有统计学意义(P<0.01)。与高蛋氨酸饮食组比较,肝脏、肾脏治疗组SAM、SAH含量有明显差异(P<0.01)。同时,HE染色显示高蛋氨酸饮食组主动脉AS的病理改变明显。结论 SAM、SAH含量升高可能是高蛋氨酸饮食促进ApoE-/-小鼠动脉粥样硬化发生的重要机制之一。
- 梁宇廖国玲马琳娜曹成建姜怡邓
- 关键词：S-腺苷同型半胱氨酸S-腺苷甲硫氨酸APOE-/-小鼠
- 枸杞多糖对同型半胱氨酸致THP-1单核细胞源性巨噬细胞脂质沉积及内质网应激的影响被引量：5
- 2015年
- 目的探讨枸杞多糖(LBP)对同型半胱氨酸(Hcy)致THP-1单核细胞源性巨噬细胞脂质沉积及内质网应激(ERS)的影响。方法复制THP-1单核细胞源性巨噬细胞模型,共分为以下6组:NC组不做其他处理,Hcy组选用100μmol/L的Hcy干预,20 LBP组选用终浓度100μmol/L的Hcy+20μg/m L的LBP干预,50 LBP组选用终浓度100μmol/L的Hcy+50μg/m L的LBP干预,100 LBP组选用终浓度100μmol/L的Hcy+100μg/m L的LBP干预,200 LBP组选用终浓度100μmol/L的Hcy+200μg/m L的LBP干预。显微镜下观察巨噬细胞模型是否复制成功;RT-q PCR分析脂肪酸结合蛋白4(FABP4)mRNA表达改变;免疫荧光检测巨噬细胞内FABP4蛋白含量的变化;ELISA检测细胞内氧化低密度脂蛋白(ox-LDL)及内质网应激标志蛋白(CHOP、GRP78、XBP-1)含量的变化。结果成功复制THP-1单核细胞源性巨噬细胞模型。与NC组比较,Hcy组巨噬细胞内ox-LDL及FABP4的含量及内质网应激标志蛋白表达显著增加(P<0.05,P<0.01)。而不同LBP作用浓度组间比较,oxLDL含量和FABP4 mRNA水平,50LBP组、100LBP组、200LBP组与Hcy组比较,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01),100LBP组、200LBP组与50LBP组比较差异有统计学意义(P<0.05)。200 LBP组与Hcy组、50 LBP组比较,GRP78含量差异统计学意义(P<0.05,P<0.01)。100 LBP组、200 LBP组与Hcy组比较,CHOP含量差异有统计学意义(P<0.01),200 LBP组与50 LBP组比较,CHOP含量差异有统计学意义(P<0.05)。50 LBP组、100LBP组、200 LBP组与Hcy组比较,Xbp-1含量差异有统计学意义(P<0.01),100 LBP组、200 LBP组与50 LBP组比较,Xbp-1含量差异有统计学意义(P<0.01)。结论随着LBP浓度的增加,可逐渐减少Hcy导致的THP-1单核细胞源性巨噬细胞内的脂质沉积及内质网应激蛋白含量,从而发挥抗动脉粥样硬化的作用。
- 哈丽娜赵丽张辉杨安宁姜怡邓
- 关键词：枸杞多糖氧化低密度脂蛋白内质网应激
