国家自然科学基金(81160037)
- 作品数：2 被引量：3H指数：1
- 相关作者：贾长库万云乐李文滨陈亚进刘红蕾更多>>
- 相关机构：海南医学院附属医院中山大学附属第六医院中山大学孙逸仙纪念医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金海南省自然科学基金更多>>
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- 大鼠肝静脉血采集方法研究
- 2014年
- 目的:探讨大鼠肝静脉血标本采集的有效方法。方法:SD大鼠随机分对照组与实验组,对照组采用肝上下腔静脉穿刺取血,实验组采用肝下下腔静脉置管取血。成功采集2 mL肝静脉血为成功的标准,对两组的采集成功率及各种并发症分别进行比较。结果:对照组与实验组出血及气栓等总并发症发生率分别为76.2%和13.3%,两组差异有统计学意义(P<0.001);对照组成功率为14.3%,实验组的成功率为93.3%,两组差异有统计学意义(P<0.001);对照组取血平均时间为(186.0±17.56)s,实验组为(49.6±7.46)s,差异有统计学意义(P<0.001)。结论:肝下下腔静脉置管技术采血是大鼠肝静脉血采集的有效方法。
- 贾长库杨青壮翁杰陈有科刘红蕾
- 关键词：肝静脉血样采集
- 大鼠线粒体融合蛋白基因重组腺病毒载体的构建及鉴定被引量：3
- 2014年
- 目的 构建并鉴定携带大鼠线粒体融合蛋白（rMfn2）基因的重组腺病毒AdS-mCMV-增强绿色荧光蛋白（EGFP）-CMV-rMfn2表达载体.方法 设计含有Not Ⅰ和HindⅢ酶切位点的引物,应用聚合酶链反应（PCR）法扩增目的基因rMfn2,将扩增产物连接到穿梭质粒上,构建重组穿梭质粒pDC316-mCMV-EGFP-CMV-rMfn2.测序鉴定重组穿梭质粒后,与腺病毒骨架质粒pAd5在JM109感受态细胞中同源重组,获得重组腺病毒AD-rMfn2,而后感染HEK293细胞进行包装、扩增、纯化,并测定病毒滴度;逆转录-聚合酶链反应（RT-PCR）及Western blot检测目的基因rMfn2在HEK293细胞中的转录及表达.结果 腺病毒穿梭质粒经PCR、双酶切及测序鉴定证明构建正确,目的基因rMfn2正确克隆至腺病毒骨架质粒中;在HEK293细胞中包装、扩增获得了高滴度的重组腺病毒AD-rMfn2,其滴度为4×1013 TU/L;AD-rMfn2感染HEK293细胞48 h后,可检测到目的基因rMfn2的转录和蛋白表达.结论 成功构建重组腺病毒AD-rMfn2.
- 李文滨林泽宇陈亚进龙天柱万云乐贾长库
- 关键词：重组腺病毒
