广东省自然科学基金(S2012010009050)
- 作品数：4 被引量：20H指数：2
- 相关作者：黄俊琪蔡燕张倩倩桂连齐一鸣更多>>
- 相关机构：中山大学中山大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：广东省科技计划工业攻关项目国家自然科学基金广东省自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 肝癌转移相关标志物的研究进展被引量：8
- 2017年
- 肝癌是我国最常见的恶性肿瘤之一，发病率和病死率高［1］。肝癌的治疗一般采取手术、放化疗与中药结合疗法，肝癌复发转移是影响患者疗效和获得长期生存的关键之一，是当前肝癌研究的热点。深入研究肝癌转移和复发的机制，寻找与肝癌转移相关的靶标，对于肝癌的治疗具有重要的临床价值。现就近些年关于肝癌转移标志物的研究，综述如下。
- 蔡燕黄俊琪
- 关键词：肝癌转移相关标志物复发转移转移标志物恶性肿瘤结合疗法
- 应用Luminex xMAP液相芯片技术研究miRNAs对THP-1细胞产生细胞因子的影响被引量：1
- 2015年
- 目的研究let-7e单独作用或miR-106b和miR-20a共同作用对THP-1细胞产生细胞因子的影响。方法用Cy3标记的miRNA阴性对照瞬转THP-1细胞24h、36h和48h，免疫荧光法检测其转染效率；let-7e、miR-106b及miR-20amimic分别瞬转THP-1细胞24h、36h和48h，qRT—PCR检测各miRNA表达量并筛选各miRNA的最佳转染时间；1mg／L LPS刺激各miRNA转染的THP-1细胞1h后，Luminex xMAP液相芯片技术检测THP-1细胞产生的IL-8、干扰素诱导蛋白-10（IP-10）、单核细胞趋化蛋白-1（MCP—1）、IL-1d、IL-6、IL-10、TNF-α、IFN-α和IFN—β，并进行差异性分析。结果转染后90％以上的THP-1细胞带有红色荧光；let-7e mimic的最佳转染时间是48h，miR-106b及miR-20amimic的最佳转染时间是24h；相对于各自的对照组，let-7e mimic组IL-8、IP-10和MCP-1表达量增加，而在miR-106b和miR-20a mimic共转染组各趋化因子表达量减少。结论let-7e促进THP-1细胞中IL-8、IP-10和MCP-1的表达，miR-106b和miR-20a共同抑制它们的表达。
- 桂连张倩倩蔡燕郭琪黄俊琪
- 关键词：液相芯片细胞因子
- MicroRNA let-7e对LPS诱导的TNF-α表达的影响及机制的初步研究被引量：2
- 2015年
- 目的研究let-7e对LPS诱导的人原代单核细胞产生的TNF-α表达的影响及其机制。方法用全血分离人原代单核细胞，流式细胞术检测单核细胞表面标记CD14；let-7e mimics或mimics NC瞬转原代单核细胞24h、36h、48h，qRT-PCR和免疫荧光法检测其转染效率；采用1mg／L LPS刺激原代单核细胞1h、3h、6h、12h后，ELISA法检测细胞培养上清中TNF-α的浓度，筛选出LPS最佳刺激时间；qRT—PCR法及ELISA法评估let-7e对LPS诱导原代单核细胞产生TNF-α的影响；Western blot法检测瞬转1et-7e mimics后EZH2的表达水平以及瞬转siEZH2后NF-κB p65、ARFGAP1和Arfaptin 2的表达水平。结果CD14^＋细胞大于70％；免疫荧光结果显示miRNA模拟物可以转染原代单核细胞，转染率约为70％；let-7e mimics转染原代单核细胞24h，细胞内即可表达较高水平的let-7e；LPS刺激原代单核细胞12h即可产生较高水平的TNF-α。ELISA结果证实let-7e mimics显著抑制LPS诱导的TNF-α的产生，同时在mRNA水平也得到一致的结果；Western blot结果显示let-7e mimics组EZH2的水平明显低于let-7e mimics NC组，沉默EZH2后胞核中NF—κ Bp65显著下调，沉默EZH2后囊泡转运调节蛋白ARFGAP1和Arfaptin2的表达显著下降。结论在原代单核细胞中，let-7e显著抑制LPS诱导的TNF-α的表达；其机制可能是1et-7e靶向作用EZH2进而调节NF—κB的活性及囊泡转运相关蛋白ARFGAP1和Arfaptin2的表达水平。
- 张倩倩张英可桂连黄俊琪
- 关键词：TNF-ΑLPS
- 2型登革病毒通过线粒体途径诱导EA．hy926细胞凋亡被引量：9
- 2013年
- 目的:探讨登革病毒诱导EA.hy926细胞(人脐静脉内皮细胞融合细胞株)相对活力的变化与线粒体膜电位(mitochondrial membrane potential,Δψm)改变及线粒体凋亡途径的关系。方法:用2型登革病毒(denguevirus type 2,DENV-2)感染EA.hy926细胞,MTT法检测感染前后EA.hy926细胞的相对活力,荧光显微镜和流式细胞术分别观察感染前后JC-1在EA.hy926细胞线粒体内的聚集情况以检测Δψm的改变,通过比色法检测caspase-9的活性变化。结果:DENV-2感染EA·hy926细胞24 h、36 h及48 h后,细胞活性受到显著抑制,550 nm处的A值均低于未感染组,差异有统计学意义(P<0.05,P<0.01);JC-1染色显示,感染后各时点,代表正常线粒体的红色荧光均较未感染组减弱,而代表Δψm下降的绿色荧光较未感染组逐渐增强。流式细胞术检测Δψm平均荧光密度比未感染组减低,差异有统计学意义。DENV-2感染后早期即可出现caspase-9活性的上升,与未感染组相比,各时点的活性差异均有统计学意义(P<0.01)。结论:DENV-2感染EA·hy926细胞后可诱发Δψm下降,增强caspase-9活性,进而启动线粒体的凋亡途径。
- 齐一鸣黄俊琪
- 关键词：登革病毒线粒体膜电位血管内皮细胞
