辽宁省自然科学基金(2013021040)
- 作品数：3 被引量：7H指数：2
- 相关作者：王敏史聪双婷李昌林王丹丹更多>>
- 相关机构：中国医科大学成都市第一人民医院更多>>
- 发文基金：辽宁省自然科学基金国家自然科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- miR-134 miR-17～92基因簇与卵巢癌耐药的关系被引量：2
- 2014年
- 目的检测并验证miR-134及miR-17～92基因簇在紫杉醇耐药与敏感卵巢癌细胞中的差异表达并探讨两者参与卵巢癌耐药的可能机制。方法2010年10月至2012年12月于中国医科大学附属盛京医院，用Affymetrix GeneChip miRNA芯片对紫杉醇耐药与敏感卵巢癌细胞miRNA基因表达谱进行分析。选取差异表达明显的miR-134和miR-17～92基因簇，采用Real-timePCR方法进一步验证芯片结果。应用生物信息学分析软件预测miR-134和miR-17～92基因簇各自潜在的靶基因并通过WesternBlot对部分靶基因进行验证。结果与敏感卵巢癌SKOV3细胞相比，耐药卵巢癌SKOV3-TR30细胞中miR-134低表达，miR-17～92基因簇高表达。软件预测得到miR-134基因簇潜在靶基因c-Myc，MRP1／ABCCl等共128个，软件预测得到miR-17～92基因簇潜在靶基因BIM，PTEN，ABCAl等共30个。与敏感卵巢癌SKOV3细胞相比，耐药卵巢癌SKOV3-TR30细胞中miR-134潜在靶基因c-Myc蛋白高表达；miR-17～92基因簇潜在靶基因BIM蛋白低表达（P均〈0．05），PTEN蛋白虽表达增高但差异无统计学意义。结论MicroRNA表达谱基因芯片可筛查出紫杉醇耐药与敏感卵巢癌细胞的差异表达基因。低表达miR-134和高表达的miR-17～92基因簇可能分别通过调节其潜在靶基因c-Myc及BIM蛋白表达参与卵巢癌化疗耐药。
- 王丹丹王敏双婷史聪张萍陶陶史春雪吴建磊
- 关键词：卵巢癌耐药
- Wip-1基因在子宫内膜癌组织中的表达及其与细胞凋亡的关系研究被引量：4
- 2016年
- 目的探讨野生型p53诱导磷酸酶1(Wip-1)基因在子宫内膜癌组织中的表达及与细胞凋亡的关系。方法选取子宫内膜癌患者68例,子宫内膜不典型增生患者30例,并留取正常子宫内膜组织标本40份。培养子宫内膜癌细胞系ECC-1(ER阳性)和KLE(ER阴性),将细胞分为Wip-1siRNA组、siRNA对照组和空白对照组。利用实时荧光定量聚合酶链式反应(PCR)技术检测不同组织及不同转染组细胞中Wip-1基因表达,四甲基噻唑蓝(MTT)比色法检测不同处理组细胞增殖能力,Annexin V-异硫氰酸荧光素(FITC)/碘化丙啶(PI)双染色检测不同处理组细胞凋亡及细胞周期。结果子宫内膜癌组织中Wip-1mRNA表达水平(2.37±0.16)高于子宫内膜不典型增生组织(1.59±0.14)和正常子宫内膜组织(1.14±0.12),且子宫内膜不典型增生组织高于正常子宫内膜组织,差异均有统计学意义(P<0.01);子宫内膜癌组织中Wip-1mRNA表达水平与病理分期、病理分级、淋巴结转移、p53有关(P<0.01);Wip-1siRNA组ECC-1细胞和KLE细胞在转染后24、48、96h细胞存活率均低于siRNA对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05);Wip-1siRNA组ECC-1细胞和KLE细胞G0+G1期比例均高于siRNA对照组和空白对照组,而S期和G2+M期比例均低于siRNA对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.01);Wip-1siRNA组ECC-1细胞和KLE细胞凋亡率均高于siRNA对照组和空白对照组,差异均有统计学意义(P<0.05)。结论 Wip-1基因参与了子宫内膜癌细胞增殖和凋亡过程。
- 蒙荣钦王阳杜泽东虞小林李昌林王敏
- 关键词：子宫内膜癌凋亡
- miR-134靶基因筛选与鉴定在卵巢癌耐药中的应用研究被引量：1
- 2014年
- 目的应用Hybrid-PCR技术,筛选miR-134在人卵巢癌紫杉醇耐药SKOV3-TR30细胞中潜在靶基因,为卵巢癌耐药的研究提供理论依据。方法 2011年9月至2013年9月在中国医科大学附属盛京医院通过RNA抽提,Hybrid-PCR引物设计,Hybrid-PCR及测序,BioEdit和DNAclub分析所有测序结果并运用BLAST分析确定候选靶mRNA的确切信息。最后通过候选靶基因的3’UTR荧光素酶报告基因质粒及miRNA共转染HEK293细胞进行双荧光素酶报告基因检测。结果 Hybrid-PCR方法筛选出SKOV3-TR30中miR-134的潜在靶基因有:C16orf72、PNAS-105、spermidine synthase、VIM2、F-box protein 2、GAPDH、PRPF6和RPL41,成功构建以上8个靶基因3’-UTR荧光素酶报告基因质粒;通过荧光素酶报告基因检测显示miR-134对8个候选靶基因3’-UTR区均具有直接结合作用。结论在SKOV3-TR3O细胞中,运用Hybrid-PCR方法共筛选得到8个miR-134候选靶基因;miR-134可能通过调控这些靶基因在卵巢癌耐药形成中发挥作用。
- 双婷王敏常爽周莹莹闫效宇史聪胡婷
- 关键词：卵巢肿瘤耐药
