中央级公益性科研院所基本科研业务费专项(Z109021010)
- 作品数：2 被引量：2H指数：1
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- 相关领域：农业科学更多>>
- 秦川牛生长抑制素基因克隆及原核表达研究
- 2012年
- 试验旨在通过基因工程方法获得重组肌肉生长抑制素蛋白。提取秦川牛的骨骼肌总RNA,根据基因库中海福特牛肌肉生长抑制素基因序列设计合成特异性引物,引物两端分别加上BamHⅠ和XhoⅠ酶切位点及保护碱基,用RT-PCR方法扩增肌肉生长抑制素全长基因,并将其克隆到pMD18-T载体上,测序后经BamHⅠ和XhoⅠ双酶切,将目的片段插入到PGEX-4T-1中,构建原核表达载体PGEX-4T-1-M,将重组表达质粒转化至Rosetta(DE3)中诱导表达。结果表明,扩增的秦川牛肌肉生长抑制素全长基因1 128bp,克隆载体经过DNA序列测定,所得基因与GenBank上发表的一致;成功构建原核表达载体PGEX-4T-1-M,经IPTG诱导,表达出了GST-M融合蛋白,用GST标签抗体做Western blotting印记证明产物大约69ku,与预期大小相符,并在Rosetta(DE3)菌中成功的进行融合蛋白表达。
- 周光现常馨月阚靖博张恩平
- 关键词：肌肉生长抑制素克隆原核表达蛋白印迹
- 秦川牛ESRRα基因的多态性及其与肉质性状的关联分析被引量：2
- 2012年
- 雌激素相关受体α(Estrogen-related receptorsα,ESRRα)是一个多功能蛋白,主要参与全身能量代谢,并且在脂肪细胞分化过程中起着重要作用。研究采用直接测序与限制性内切酶片段长度多态性(RFLP)相结合的方法,对282头秦川牛ESRRα基因的第一内含子进行多态性检测,发现一个单核苷酸多态位点(SNP)(C147A)。通过分析得出:在这个秦川牛群体中存在2个等位基因,A和C,两个等位基因的频率分别为0.4025和0.5975,检测到3种基因型,AA、CA和CC,3种基因型的频率分别为0.1844,0.4363和0.3794。ESRRα基因与秦川牛肉质性状的关联分析结果表明:CC基因型对牛的背膘厚有较大影响(P<0.05);而AA基因型和CA基因型个体的大理石花纹则显著高于CC型个体(P<0.05)。
- 张思慧马森曾洁常馨月周光现曹宝红张恩平
- 关键词：遗传多态性
