吉林省科技厅资助项目(200705274)
- 作品数：4 被引量：6H指数：2
- 相关作者：王志成杨海山李长锋张斌潘奇正更多>>
- 相关机构：吉林大学中日联谊医院吉林大学吉林省肿瘤医院更多>>
- 发文基金：吉林省科技厅资助项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 靶向存活素的RNAi联合X射线照射对肺腺癌移植肿瘤的抑制作用被引量：2
- 2009年
- 目的利用RNAi、RT-PCR和Western blot技术,探讨靶向存活素的基因沉默联合X射线照射对肺腺癌移植瘤的抑制作用及相关机制。方法根据Genbank中存活素(Survivin)的cDNA序列设计RNAi序列,构建shRNA真核表达载体pGenesil-2-Survivin,经过酶切,测序鉴定后,将经脂质体包裹的pGenesil-2-Survivin注射到裸鼠移植肺腺癌瘤体内,并联合5 Gy X射线照射,利用RT-PCR和Western blot技术检测移植肿瘤内Survivin mRNA和蛋白表达情况,观察肿瘤生长变化。实验分为正常组、pGenesil-2-Survivin组、5 Gy照射组和pGenesil2-Survivin+5 Gy组。结果RT-PCR和Western blot结果显示,5 Gy X射线没有明显改变Survivin mRNA和蛋白的表达,而pGenesil-2-Survivin和pGenesil-2-Sur-vivin+5 Gy照射则明显抑制了Survivin的表达,与正常组比较具有统计学意义(P<0.001);5 Gy照射后,肿瘤的生长被抑制,而pGenesil-2-Survivin质粒的抑制作用更强,5 Gy照射能增强pGenesil-2-Survivin质粒的抑制作用。结论靶向存活素的RNAi能够明显抑制裸鼠移植肿瘤的生长,联合5 Gy X射线照射能够增强抑制作用,这可能与Survivin基因mR-NA与蛋白被抑制相关。
- 李长锋张斌张金萍王志成杨海山
- 关键词：RNA干扰生存素X射线照射
- 靶向survivin的RNAi联合X线照射对肺腺癌A549细胞周期、凋亡及增殖的影响被引量：3
- 2009年
- 目的构建靶向生存素(survivin)基因的RNA干扰(RNAi)载体,观察其联合X射线照射对肺腺癌A549细胞周期、凋亡及增殖影响。方法根据GenBank中survivin的cDNA序列设计干扰序列,构建干扰survivin的重组干扰质粒pGenesil2-survivin。酶切、测序鉴定正确后,干扰质粒经脂质体介导转染肺腺癌A549细胞,联合5Gy射线照射,应用PI单染、流式细胞仪检测细胞周期与凋亡变化,MTT检测细胞增殖的变化。结果酶切和测序结果显示,载体构建正确;转染空载体pGenesil2对细胞G0/G1期、S期及凋亡,增殖能力影响不大,降低了G2/M期(P<0.05);而干扰质粒pGene-sil2-survivin能延长G0/G1期,缩短S期,诱导细胞凋亡增加,降低细胞增殖能力(P<0.05);5Gy照射对细胞周期影响不大,增加细胞凋亡,降低增殖能力(P<0.05);转染pGenesil2-survivin后,进行5GyX射线照射,延长G0/G1期,缩短S期,诱导细胞凋亡增加,降低细胞增殖能力(P<0.05,P<0.01)。结论靶向survivin的RNAi可延长G0/G1期,缩短S期,增加细胞凋亡,降低细胞增殖能力,X射线照射能够增强该质粒的作用。
- 李长锋张斌王志成杨海山潘奇正
- 关键词：SURVIVINMTF
- CyclinB2、CDK1在胃癌中的表达水平及生物学意义被引量：1
- 2015年
- 目的探讨胃癌患者瘤组织中细胞周期蛋白(Cyclin)B2、细胞周期依赖性激酶(CDK1)的表达水平及其预后的临床生物学意义。方法共收集60例胃癌患者组织标本,采用免疫组化法检测胃癌及癌旁组织Cyclin B2、CDK1表达水平进而分析其与患者临床病理特征及长期预后的相关性。结果胃癌组织Cyclin B2、CDK1表达水平明显高于癌旁组织(χ2=17.515,P<0.001),病理为Ⅲ期患者的瘤组织中Cyclin B2、CDK1的表达水平明显高于术后病理Ⅰ期,临床统计学证实Cyclin B2、CDK1的表达水平与TNM分期有关(χ2=11.545,P=0.05)。Cyclin B2、CDK1高表达的胃癌患者总生存率明显差于Cyclin B2、CDK1低表达者(P=0.039),而无疾病生存率两者无显著性差异(P=0.096)。结论胃癌患者Cyclin B2、CDK1高表达可能提示肿瘤侵袭的生物学能力较强,并与患者低总生存率(OS)有关。
- 王晓明梁国栋杨玉波王斌刘海瑞王淑红
- 关键词：胃癌细胞周期依赖性激酶
- 靶向生存素基因的RNAi对肺腺癌A549细胞放射敏感性的影响
- 2009年
- 目的构建靶向生存素（survivin）基因的RNA干扰（RNAi）载体，观察对肺腺癌A549细胞放射敏感性的影响，并探讨其机制。方法根据survivin的cDNA序列设计干扰序列，构建干扰survivin的重组干扰质粒pGenesil2-survivin。酶切、测序鉴定正确后，经脂质体介导转染肺腺癌A549细胞；应用反转录-聚合酶链式反应（RT-PCR）和Western blot法检测survivin的表达；流式细胞术检测细胞凋亡的变化；克隆形成实验检测细胞的放射敏感性。结果酶切和测序结果显示，载体构建正确；将质粒pGenesi12-survivin转染肺腺癌A549细胞48h，survivin蛋白水平及mRNA水平在正常组与pGenesi12组中无明显变化，5Gy照射组增强，而转染pGenesi12-survivin后明显抑制；pGenesi12-survivin与5Gy X射线照射都能诱导细胞凋亡增加（t1=10.63，P〈0.001；t2=3.75，P〈0.05），两者共同作用，凋亡增加更明显（t=4.83，P〈0.05）；克隆形成实验显示，pGenesi12与正常组Do、Dq无明显变化，而pGenesi12-survivin则明显降低，说明其可以提高A549细胞的放射敏感性。结论靶向生存素基因的RNAi能够明显抑制survivin mRNA与蛋白的表达，促进凋亡，增强A549细胞的放射敏感性。
- 李长锋张斌王芳王志成杨海山
- 关键词：RNA干扰生存素
