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塞来昔布拮抗卡铂在食管癌细胞的细胞毒作用被引量：3: 2014年; 目的探讨塞来昔布(celecoxib)在人食管癌细胞是否影响卡铂介导的细胞毒作用。方法 MTT法检测卡铂单独及联合celecoxib后对食管癌亲代细胞EC109及耐药细胞EC109/CDDP的细胞毒作用。Western blot方法检测卡铂单独及联合celecoxib后caspase-3的活化、PARP蛋白的剪切,以及CTR1蛋白的表达。Caspase-3/7 Assay试剂盒检测细胞caspase-3酶活性。流式细胞仪检测卡铂单独及联合celecoxib作用下细胞凋亡比率。ICP-MS检测卡铂单独及联合celecoxib作用下细胞内卡铂蓄积量。结果卡铂在EC109及EC109/CDDP细胞的IC50在联合应用celecoxib后显著增加,说明celecoxib拮抗了卡铂介导的细胞毒作用。在联合应用celecoxib后caspase-3及PARP蛋白的剪切较单独应用卡铂时明显减少,且caspase-3酶活性较单独应用卡铂时显著降低。此外,联合应用celecoxib后,EC109和EC109/CDDP细胞凋亡率比单独应用卡铂时明显降低,而细胞存活率明显增加。联合应用celecoxib后,EC109和EC109/CDDP细胞内卡铂蓄积量比单独应用卡铂时显著降低,而CTR1蛋白的表达无明显改变。结论 Celecoxib拮抗卡铂在食管癌细胞介导的细胞毒作用,通过降低细胞内卡铂蓄积量抑制卡铂介导的食管癌细胞凋亡。; 时粒笠钟德胜古春萍余乐; 关键词：食管肿瘤卡铂塞来昔布细胞毒作用

表皮生长因子通过上调环氧酶2促进人食管鳞癌细胞HKESC-1的增殖被引量：1: 2011年; 目的研究表皮生长因子(EGF)促进人食管鳞癌细胞增殖的机制。方法氚标记的脱氧胸腺嘧啶核苷掺入法检测细胞增殖。酶免疫法检测前列腺素(PGE2)的释放。免疫印迹法检测环氧酶1(COX-1),环氧酶2(COX-2),PGE2受体亚型EP1和EP2的蛋白表达。结果 EGF上调人食管鳞癌HKESC-1细胞COX-2蛋白表达,而不影响COX-1蛋白表达。EGF还能刺激HKESC-1细胞释放PGE2,并上调PGE2受体亚型EP2的蛋白表达。非选择性COX抑制剂吲哚美辛和COX-2选择性抑制剂SC-236均可完全阻断EGF刺激的PGE2释放。这两种COX抑制剂也都能够抑制EGF的促细胞增殖作用。结论 EGF对HKESC-1细胞的促增殖作用,一方面是通过诱导COX-2蛋白的表达从而促进PGE2的释放;另一方面通过上调EP2受体的蛋白表达。; 余乐曹之宪刘叔文; 关键词：食管鳞癌 EGF 环氧酶前列腺素环氧酶抑制剂

顺铂降低铜离子转运蛋白1表达诱导人食管鳞癌细胞耐药被引量：6: 2011年; 目的诱导对顺铂耐药的人食管鳞癌细胞株,并进一步研究细胞耐药性产生的机制。方法逐渐增加顺铂浓度处理人食管鳞癌细胞HKESC-1,诱导顺铂耐药细胞株HKESC-1/cis。MTT法观察顺铂的细胞毒作用以及细胞的生长曲线。电感耦合等离子体质谱检测细胞内顺铂的蓄积和Pt-DNA加合物的形成。Western blot检测铜离子转运蛋白(copper transporter 1,CTR1)的表达。结果顺铂耐药细胞株HKESC-1/cis较其亲代细胞HKESC-1对顺铂引起的细胞毒作用敏感性下降,耐药指数为2.9。顺铂耐药细胞株HKESC-1/cis与其亲代细胞HKESC-1的生长速度相似。然而,HKESC-1/cis细胞内顺铂蓄积和Pt-DNA加合物的形成较HKESC-1细胞减少,并且CTR1蛋白表达水平降低。结论顺铂通过降低细胞膜CTR1蛋白的表达,抑制顺铂进入细胞,导致细胞耐药性的产生。; 余乐陈明辉古春萍李亦蕾曹之宪刘叔文; 关键词：食管鳞癌顺铂耐药性细胞毒作用

顺铂下调铜离子转运蛋白1诱导人食管鳞癌细胞EC109耐药被引量：2: 2011年; 目的研究人食管鳞癌细胞顺铂耐药性产生的机制。方法 MTT法检测顺铂对耐药细胞EC109/CDDP及其亲代细胞EC109的细胞毒作用。电感耦合等离子体质谱检测细胞内顺铂的蓄积和Pt-DNA加合物的形成。Western blotting检测人多聚腺苷二磷酸核糖聚合酶(poly-ADP-ribose polymerase,PARP)的剪切和铜离子转运蛋白1(copper transporter1,CTR1)的蛋白表达。结果顺铂耐药细胞株EC109/CDDP较其亲代细胞EC109对顺铂引起的细胞毒作用和凋亡敏感性下降,细胞内顺铂蓄积和Pt-DNA加合物的形成减少,并且CTR1蛋白表达水平降低。结论顺铂通过降低细胞CTR1蛋白表达抑制顺铂进入细胞,导致细胞耐药性的产生。; 余乐陈明辉古春萍李亦蕾文静傅剑华曹之宪刘叔文; 关键词：食管鳞癌 EC109 顺铂

COX-2抑制剂联合抗肿瘤的研究进展被引量：24: 2012年; 环氧酶-2(cyclooxygenase 2,COX-2)抑制剂具有预防和治疗多种肿瘤的作用,并且能够影响化疗药物的抗肿瘤活性。COX-2抑制剂联合化疗药物抗肿瘤可能成为肿瘤治疗的新方法。该文对国内外COX-2抑制剂联合化疗药物抗肿瘤的临床前和临床研究进行综述,分析研究结论中存在的争议,并探讨影响化疗效果的可能机制。; 刘智豪刘叔文余乐; 关键词：COX-2抑制剂联合疗法肿瘤体外研究化疗

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国家自然科学基金(81001456)