国家自然科学基金(30370596)
- 作品数：5 被引量：34H指数：3
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- 一例伴有t(6;11)(q27;q23)的急性单核细胞白血病患者的遗传学研究被引量：7
- 2004年
- 陈苏宁薛永权吴亚芳潘金兰
- 关键词：急性单核细胞白血病核型FISH
- 人单核细胞白血病细胞系SHI-1的多药耐药和耐药蛋白的表达被引量：3
- 2007年
- 目的探讨人单核细胞白血病细胞系SHI-1多药耐药谱及其机制。方法噻唑蓝(MTT)检测SHI-1细胞对柔红霉素、鬼臼乙叉甙、高三尖杉酯碱、紫杉醇和长春新碱的敏感性;流式细胞术(FCM)检测SHI-1细胞中P糖蛋白(P-gp)、多药耐药相关蛋白(MRP)、肺耐药相关蛋白(LRP)、乳腺癌耐药蛋白(BCRP)、谷胱甘肽-S-转移酶-π(GST-π)等耐药蛋白的表达。结果MTT药敏实验结果显示SHI-1细胞存在着多药耐药,尤其对VP-16最为明显。FCM检测显示SHI-1细胞中P-gp阳性比例10.78%,相对荧光强度(RFI)为1.02;GST-π阳性率93.52%,RFI6.91;LRP阳性率92.86%,RFI8.00;MRP阳性率4.54%,RFI1.38;BCRP阳性率3.84%,RFI1.06。结论SHI-1细胞存在多药耐药,以对VP-16最为明显,其耐药机制可能与LRP和GST-π的高表达有关。
- 陈苏宁薛永权吴亚芳潘金兰岑建农
- 关键词：多药耐药肺耐药相关蛋白
- 人单核细胞白血病细胞系SHI-1的诱导分化和凋亡被引量：6
- 2006年
- 目的对该实验室建立的一株新的人单核细胞白血病细胞系SHI-1进行诱导分化和凋亡的研究。方法以瑞特染色、四唑氮蓝还原试验(NBT)、流式细胞仪(FCM)检测AnnexinV以及CD11b和CD14表达的改变后和DNA凝胶电泳等方法观察三丁酸甘油酯(TB)作用后SHI-1细胞的改变;以瑞特染色、FCM检测AnnexinV以及CD11b和CD14表达的改变等方法观察三氧化二砷(As2O3)作用后SHI-1细胞的改变。结果SHI-1细胞经TB处理后,可出现典型的凋亡形态学改变,部分细胞出现部分分化,NBT实验显示还原率上升,FCM结果示CD11b的表达无改变,而CD14的表达上调,AnnexinV的检测结果显示SHI-1细胞经TB作用24h后凋亡率明显上升,可见典型的DNA梯带。SHI-1细胞经As2O3作用后可见典型的凋亡形态学改变,部分细胞可见部分分化的改变,SHI-1细胞CD14的表达上调,CD11b的表达无改变,FCM检测AnnexinV显示凋亡率明显上升。TPA作用24h后SHI-1细胞基本贴壁,形态不规则,有伪足形成。结论TB对SHI-1细胞具有诱导分化和凋亡的双向调节作用。TPA可诱导SHI-1细胞分化和贴壁。0.5μmol/L、1.0μmol/L和2.0μmol/LAs2O3可诱导SHI-1细胞发生凋亡和部分分化。
- 陈苏宁薛永权吴亚芳潘金兰岑建农
- 关键词：诱导分化凋亡
- 一株伴有t(6;11)(q27;q23)和p53基因异常的人单核细胞白血病细胞系SHI-1的建立及鉴定被引量：19
- 2005年
- 目的建立人急性单核细胞白血病(AMLM5b)细胞系并研究其生物学特性。方法从1例AMLM5b患者白血病复发时的骨髓标本分离出单个核细胞,用液体培养法进行培养。采用瑞特染色、电子显微镜、细胞化学染色、流式细胞仪、R显带核型分析、逆转录聚合酶链反应(RTPCR)、荧光原位杂交(FISH)、半固体甲基纤维素集落培养、裸小鼠致瘤实验、荧光定量PCR、DNA荧光染色法及支原体肉汤培养法、短串联重复序列(STR)PCR、p53基因的PCR扩增产物测序、多色FISH(MFISH)和3HTdR掺入实验等方法对SHI1细胞的生物学特性进行了鉴定。结果建立了1个可持续增殖的人单核细胞白血病细胞系SHI1;形态学和免疫表型呈现典型的单核系特征;核型分析显示SHI1细胞系有和患者复发时骨髓细胞完全相同的异常46,XY,t(6;11)(q27;q23),del(17)(p11);RTPCR检出MLLAF6融合基因的转录本;FISH检测结果显示存在6号和11号染色体之间易位、MLL基因的重排和p53基因的缺失;PCR产物测序结果显示1个p53等位基因6号外显子发生点突变ATC→ACC集落培养显示SHI1细胞具有较强的集落形成能力;皮下接种4只裸小鼠均形成实体肿瘤;荧光定量PCR提示无EB病毒感染;DNA荧光染色法和支原体肉汤培养法未检出支原体;MFISH证实传代至2003年3月的SHI1细胞除有t(6;11)、del(17)(p11)外,?
- 陈苏宁薛永权张学光吴亚芳潘金兰王勇岑建农
- 关键词：人单核细胞P53基因白血病细胞系显带PCR产物
- 耐As_2O_3的白血病细胞系SHI-1/AS2的建立及耐药机制的初步研究被引量：1
- 2009年
- 目的建立三氧化二砷(As2O3)的耐药细胞株,进一步从分子水平研究其耐药机制。方法采用高度短时间接触培养方法建立耐As2O3的白血病细胞系(SHI-1/AS2)。细胞倍增时间和耐药倍数测定采用MTT法;细胞周期和细胞免疫表型测定采用流式细胞分析术;常见的10个耐药基因检测和比较采用实时定量PCR(RQ-PCR)。结果耐As2O3的白血病细胞系SHI-1/AS2的细胞倍增时间与SHI-1相似,差异无统计学意义(P>0.05)。SHI-1/AS2细胞G0/G1期细胞少于SHI-1细胞,而G2/M、S期细胞则多于SHI-1细胞,差异均有高度统计学意义(均P<0.01)。SHI-1/AS2细胞对As2O3的耐药倍数是SHI-1的2.7倍,差异有统计学意义(P<0.01)。SHI-1/AS2细胞的集落形成率高于SHI-1细胞。SHI-1/AS2细胞的耐药相关基因Bcl-2有明显上调,Bax、Fas及MGMT下调,而其他耐药相关基因无明显变化。结论建立一株对As2O3产生耐药的白血病细胞系SHI-1/AS2,耐药倍数是SHI-1的2.7倍,其耐药机制与Bcl-2、Bax和Fas基因介导的细胞凋亡调控有关。
- 王勇薛永权陈苏宁吴亚芳潘金兰张俊沈娟
- 关键词：抗药性砷剂白血病
